Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Диксон М. -> "Ферменты 2" -> 36

Ферменты 2 - Диксон М.

Диксон М., Уэбб Э. Ферменты 2 — М.: Мир, 1982. — 515 c.
Скачать (прямая ссылка): fermentit21982.djvu
Предыдущая << 1 .. 30 31 32 33 34 35 < 36 > 37 38 39 40 41 42 .. 158 >> Следующая

следующем виде:
ATP + E = ADP + E-Pi, (7.6 а)
Е-Pj + Глутамат - Е-Глутамат + Pj, (7.80)'
Е-Глутамат + Цистеин = Е -|- Глутамил-цистеии. (7.81).
Обменная реакция (7.6 д) показывает, что фермент соединяете" с фосфатной
группой АТР, а обменная реакция (7.79) - что он соединяется с глутаматом
(=Х). Тот факт, что для обменной реакции (7.6д) необходим глутамат,
показывает, что глутамат освобождает фосфатную группу из соединения с
ферментом: это согласуется с уравнением (7.80) и, между прочим,
свидетельствует о том, что Е - Pi представляет собой весьма прочное
соединение, которое спонтанно не гидролизуется. Ингибирующее-влияние,
которое глутамат оказывает на реакцию (7.6 г) и на включение ADP* в АТР,
объясняется уменьшением концентрации Е- Pi и, следовательно, замедлением
реакции, обратной реакции (7.6а); присутствие цистеина ( = Y), уменьшая
концентрацию комплекса Е - глутамат, замедляет реакцию, обратную (7.80),
и, следовательно, также реакцию (7.6 д). Все это позволяет предполагать,
что рассматриваемая система функционирует по механизму трехстадийного
переноса типа (а); с другой стороны, Струмейер и Блок [4545] установили,
что добавление-глутамата не приводит к освобождению фосфата, пока не
добавлен также цистеин. Это указывает на образование в качестве
интермедиата глутамилфосфата и на вытеснение из него фосфата цистеином;
поэтому реакции (7.80) и (7.81) следует заменить на (7.82) и (7.83):
Е-Pj + Глутамат = Е-Глутамил-Р,, (7.82)
Е-Глутамил-Р-, + Цистеин = Е -(- Глутамил-цистеин Pj. (7.83)
Процесс остается трехстадийным переносом (перенос фосфата от АТР на
фермент, затем от фермента на связанный глутамат и далее перенос
глутамата от фосфата на цистеин), однако-
6-14
-474
Глава 7
в рассматриваемом случае образуется тройной комплекс, содержащий фермент,
глутамат и фосфат.
Было высказано предположение, что подобным же образом функционирует и
глутатионсинтетаза (КФ 6.3.2.3); поскольку, однако, не удалось обнаружить
фосфорилирования фермента [3230] и было установлено участие в процессе
низкомолекулярной РНК [318], механизм процесса должен быть другим.
Высказывалось также предположение, что механизм действия сукцинил-СоА -
синтетазы (образующей ADP) из растений (КФ 6.2.1.5) очень близок к
приведенному выше механизму действия глутамилцистеинсинтетазы, если в
реакциях (7.82) и (7.83) заменить глутамат на СоА, а цистеин - на
сукцинат. Реакция обмена
катализируется ферментом только в присутствии фосфата, что позволяет
высказать предположение о наличии механизма типа (а) с сукцинатом в
качестве X. Однако было обнаружено, что обменная реакция (7.6 д), которая
должна была бы катализироваться ферментом в присутствии сукцината,
требует также кофермента А. Для объяснения этой ситуации Кауфман [2354]
предложил следующий механизм:
Альтернативные возможности - образование в качестве интермедиатов
сукцинилфосфата или СоА-фосфата - были исключены.
Однако недавно Мойер и др. [3285, 3811], используя высоко-очищенный
фермент из Е. coli, получили результаты, которые не согласуются с
приведенным выше механизмом и указывают на наличие следующих стадий:
В пользу приведенной схемы, но не схемы Кауфмана, свидетельствуют
следующие данные, (а) Обменная реакция (7.84) в отличие от данных
Кауфмана не зависит от фосфата. Это показывает, что на третьей стадии не
происходит освобождения фосфата. (б) Реакция обмена ADP-Pi + Pj* = ADP-
Pl* + Pl не за-
Сукцинил-СоА + Сукцинат* = Сукцинил*-СоЛ -f- Сукцинат (7.84)
ADP-Pi + Е = ADP + Е-Pj,
Е-Pi + СоА = Е(СоА-Р;),
Е(СоА-Р;) + Сукцинат = Е + Сукцинил-СоА + Pt.
?(7.6 а)
(7.85)
(7.86)
ADP- Pj + Е = ADP + Е-Pj,
Е-Р[ + СоА = Е-СоА + Pj,
Е-СоА + Сукцинат = Е + Сукцинил-СоА.
(7.87)
(7.88)
(7.89)
Механизм действия ферментов
475
висит от сукцината, это означает, что свободный фосфат освобождается из
АТР в результате протекания первых двух реакций. (в) Был выделен (в
небольшом количестве) макроэргичес-кий интермедиат; показано, что он
имеет структуру Е-СоА, т. е. является продуктом соединения фермента с
СоА, не содержащим сукцината, фосфата и ADP; молекула СоА связана с ги-
стидиновым остатком фермента. Показано также, что макроэр-гический
интермедиат реагирует с фосфатом, образуя Е-Pi [реакция (7.88)], и с
фосфатом плюс ADP, образуя АТР [реакции (7.88) и (7.87)]. Эти результаты
однозначно показывают, что фермент относится к типу (а) в табл. 7.6, где
X - это СоА, а У - сукцинат.
В системах, приведенных в табл. 7.6, в качестве интермедиатов выступают
двойные комплексы, т. е. в каждый данный момент времени фермент связывает
только один реактант. Можно, однако, предположить, что синтетазные
реакции протекают-с участием тройных или даже четверных комплексов; в
частности, выше уже отмечалось, что по механизму подобного типа,
вероятно, функционирует глутамилцистеинсинтетаза.
Глутаминсинтетаза (КФ 6.3.1.2) катализирует образование глутамина из
глутамата и аммиака, сопряженное с расщеплением АТР до ADP и фосфата. В
Предыдущая << 1 .. 30 31 32 33 34 35 < 36 > 37 38 39 40 41 42 .. 158 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed