Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Диксон М. -> "Ферменты 2" -> 16

Ферменты 2 - Диксон М.

Диксон М., Уэбб Э. Ферменты 2 — М.: Мир, 1982. — 515 c.
Скачать (прямая ссылка): fermentit21982.djvu
Предыдущая << 1 .. 10 11 12 13 14 15 < 16 > 17 18 19 20 21 22 .. 158 >> Следующая

Кислая фосфатаза (КФ 3.1.3.2) С-О-Р 1 Глюкозо-1-фосфат
Фосфодиэстераза! (КФ 3.1.4.1) С-О-Р Полинуклеотид
случае НзР18С>4 выполняет роль акцептора В ([реакция (7.20)]. Если группа
X (в данном случае гликозильная группа) переносится в форме X-О-, то 180
в молекуле В будет замещен на О; "ели же перенос происходит в форме X-,
то В будет сохранять свою метку.
Ряд данных, полученных этими методами, приведен в табл. 7.4. Эти данные
можно сопоставить с данными по неферментативному гидролизу карбоксильных
эфиров. При неферментативном гидролизе может разорваться любая из связей
(какая именно, это зависит от условий гидролиза и от природы данного
сложного эфира), хотя расщепление связи ацил - кислород наблюдается
наиболее часто (см., например, [2138, Гл. 14]). Установлено, что все
фосфатазы атакуют связь Р-О, а фосфорилазы - связь С-О.
Опыты с ферментами убедительно показывают, что при ферментативном
гидролизе разрывается связь, расположенная с той стороны связующего
атома, к которой примыкает "специфический участок" молекулы субстрата, т.
е. участок, в отношении Которого фермент проявляет наибольшую
специфичность ([2571]; таким образом, разрыв происходит настолько близко
к переноси-
3*
428
Глава 7
мой группе, насколько это возможно. Фосфатазы специфичны по отношению к
фосфатной части молекулы, и обе фосфатазы могут переносить фосфатные
группы на другие молекулы, так что разрыв происходит непосредственно за
атомом фосфора; фосфо-рилазы же, переносящие гликозильные группы,
специфичны по отношению к глюкозной части молекулы, и в этом случае
разрыв происходит непосредственно за атомом углерода глюкозы.
Подтверждение этому было получено Кошландом и Штейном [2571] при изучении
действия дрожжевой инвертазы (фрукто-фуранозидазы) на сахарозу. Этот
фермент специфичен по отношению к фруктозной части молекулы и может
катализировать перенос фруктозильных групп на другие молекулы.
Выяснилось, как этого и следовало ожидать, что расщеплению подвергается
связь, расположенная ближе к фруктозной части молекулы.
М. Кон [830, 831] изучала также действие глицеральдегид-
фосфатдегидрогеназы (КФ 1.2.1.12) и фосфоглицераткиназы (КФ 2.7.2.3). При
проведении суммарной дегидрогеназной реакции
Г лицеральдегпдфосфат -f- Фосфат -J- NAD+ =
= Дифосфог лидерах -f- NADH -f- Н+ (7.23)
с использованием НзР1804 М. Кон не обнаружила изменения содержания 180 в
фосфатной группе. Так же обстояло дело и в том случае, когда реакция
проходила в обратном направлении. Это указывает, что в реакцию
вовлекается связь С-О, а не связь Р-О (результат, вполне согласующийся с
тем фактом, что фермент специфичен по отношению к альдегиду). В то же
время при действии фосфокиназы расщепляется связь Р-О, а это согласуется
с тем, что данный фермент переносит фосфатные группы. Если в
фосфокиназной реакции
Дифосфоглицерат -f- ADP - Фосфоглицераг -f- ATP (7.24)
в качестве субстрата используется дифосфоглицерат, образованный в
рассмотренной выше дегидрогеназной реакции (и поэтому содержащий атомы
180 в фосфатной группе, находящейся в положении 1), то в образующейся
молекуле фосфоглицерата содержится С018ОН-группа, потому что связующий
атом О, который первоначально принадлежал фосфатной группе, остается
связанным с атомом С при разрыве связи Р-О. Следовательно, в результате
функционирования этой двухферментной_ системы один из атомов О фосфатной
группы переносится на карбоксил. Реакция в целом, однако, обратима, так
что атом О из карбоксила может перейти обратно в фосфатную группу; но так
как оба атома в СООН-группе в химическом отношении эквивалентны, то
перейти в фосфатную группу может любой из них. Как было показано в опытах
Кон, это приводит в итоге к разведению 180 в фосфатной группе и притом
только тем количеством iSQ,
Механизм действия' ферментов
429
Рис. 7.1. Предполагаемый механизм действия гексокиназы [1637]. В - оснбв-
ная группа активного центра фермента. Было показано, что практически все
фосфат-переносящие ферменты, а не только киназы, активируются Mg2+.
которое первоначально было связано с данным атомом С фосфо-глицерата.
Аналогичные исследования [831] показали, что при действии дрожжевой
гексокиназы (К Ф 2.7.1.1) и аденилаткиназы (КФ 2.7.4.3) расщепляется
связь Р-О; имеющиеся разрозненные данные позволяют предполагать, что
известные 130 киназ действуют таким же образом. Рассматривая механизм,
предложенный для гексокиназы (рис. 7.1), нетрудно понять, почему
расщепляется именно данная связь.
ОДНО- ИЛИ ДВУХСТАДИЙНЫИ ПЕРЕНОС?
Известен ряд подходов, с помощью которых можно попытаться ответить на
вопрос, как происходит катализируемый ферментом перенос группы, -
непосредственно от одного субстрата к другому в одну стадию или же в две
стадии, сначала от первого субстрата на фермент, а затем с фермента на
второй субстрат.
Весьма полезными здесь могут оказаться кинетические исследования,
поскольку, как отмечалось на с. 142 и далее, двухстадийный перенос
Предыдущая << 1 .. 10 11 12 13 14 15 < 16 > 17 18 19 20 21 22 .. 158 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed