Ферменты 2 - Диксон М.
Скачать (прямая ссылка):
оказываются даже меньшими, чем различия в длинах волн для одного
цитохрома (по данным разных
Кофакторы ферментов
695
Длина волны, нм
Рис. 9.16. Спектры поглощения окисленной (/) и восстановленной (//) форм
цитохрома с [2976].
авторов), то неудивительно, что ряд цитохромов еще не отнесен ни к какой
определенной подгруппе.
В типичном спектре поглощения индивидуального цитохрома (в
восстановленном состоянии) имеются три основные полосы поглощения в
видимой области; в порядке уменьшения длин волн они обозначаются как а-,
{3- и у-полосы. Самой интенсивной, несомненно, является у-полоса; a-
полоса, обычно имеющая вид острого пика, интенсивней, чем р-полоеа.
Следует отметить, что у цитохромов а p-полоса поглощения выражена весьма
слабо, а иногда и совсем отсутствует. В результате окисления
восстановленной формы а- и p-полосы исчезают, поглощение в этой области
становится диффузным; у-полоса остается, но несколько смещается в сторону
ультрафиолетовой области спектра, как видно на рис. 9.16.
Наблюдение за появлением и исчезновением a-полос в спектре позволяет
следить за процессами окисления и восстановления разных цитохромов даже
тогда, когдцдони находятся в живых тканях и суспензиях клеток.
Многие аэробные клетки -имеют типичный спектр поглощения, обусловленный
наличием в них цитохромов а, Ь я с митохондриальной дыхательной системы;
он показан на рис. 9.17
Таблица 9.6
Некоторые цитохромы и их характеристики
Цитохром
Характеристика
аа.
bi
bo
Идентичен цитохром с-оксидазе (КФ 1.9.3.1); терминальная оксидаза
дыхательной цепи, локализована во внутренней мембране митохондрий
эукариотических клеток. Содержит две гемовые группы (типа а), возможно,
связанные различным образом. Содержит также два атома меди на два тема.
Этот цитохром восстанавливается восстановленной формой цитохрома с и
окисляется 02. Его восстановленная форма связывает СО, причем последняя
ингибирует цитохром, конкурируя с Ог; на свету соединение с СО
диссоциирует. Этот цитохром ингибируется также цианидом. Длины волн полос
поглощения: спектр восстановленной формы а=605, у=
= 405 нм; комплекс с СО а=590, у=430 нм.
Обнаружен у ряда бактерий (например, Acetobacter pas-teurianum).
Восстановленная форма окисляется 02. Соединяется с цианидом. Длина волны
полосы поглощения в спектре восстановленной формы: а=590 нм.
Компонент митохондриальной дыхательной цепи; функционирует между
субстратами и цитохромом с,. Имеются данные о наличии трех форм цитохрома
b [995]. Длина волны полосы поглощения восстановленной формы: а=563 нм.
Мол. масса 13 700 (при кристаллизации из тканей личинки мясной мухи).
Обнаружен у ряда бактерий (например, Е. coli). Длина волны полосы
поглощения восстановленной формы: "=559 нм.
Идентичен дрожжевой лактатдегидрогеназе (цитохром-ной) (К Ф 1.1.2.3).
Содержит один FMN на один гем. Представляет собой тетрамер с мол. массой
235 000.
Находится в микросомах растительных клеток. Длина волны полосы поглощения
восстановленной формы: а=559 нм. Мол. масса 40 000.
Находится в микросомах клеток животных тканей. Белок с небольшой
молекулярной массой; содержит один гем на молекулу. Переносчик в
окислительно-восстановительных процессах; восстанавливается NADH в
присутствии цитохром 65-ре-дуктазы (КФ Е6.2.2). При обычном выделении с
помощью липазы получают хорошо растворимый препарат. Мол. масса 11000-12
000, его полипептидная цепь содержит 82-93 остатка. Получен в
кристаллическом виде. Для фермента, выделенного из печени теленка,
установлена трехмерная структура [3027]. Аминокислотные
последовательности определены для препаратов фермента из шести видов
млекопитающих. При выделении с помощью детергентов получают "вторую"
форму фермента с мол. массой 16 700, имеющую дополнительный гидрофобный
сегмент, содержащий 40-44 остатка. Этот сегмент удаляется при
ферментативном гидролизе, а фермент переходит при этом в "первую" форму.
"Вторая" форма фермента при удалении детергентов агрегирует. "Вторая"
форма (но не "первая") спонтанно связывается с микросомами. Длина волны
полосы поглощения восстановленной формы: а=
= 556 нм.
Продолжение табл. 9.6
Цитохром
Характеристика
Р-450
Находится в хлоропластах растений. Участвует в процессах фотосинтеза.
Длина волны полосы поглощения восстановленной формы: а=563 нм.
Находится в початке зантедешии эфиопской (Zantedeshia aethiopica).
Восстановленная форма окисляется 02. Не ингибируется цианидом. Длина
волны полосы поглощения восстановленной формы: а=560 нм.
Сходен с цитохромами группы Ь; по-видимому, является группой цитохромов-
с различной специфичностью. Функционирует в гидроксилазных системах.
Широко распространен; получен в кристаллическом виде из Pseudomonas. Мол.
масса 45 ООО. Спектр поглощения: a-полоса выражена слабо; длина волны
поглощения СО-комплекса восстановленной формы - у=450 нм.
Компонент дыхательной цепи митохондрий. Функционирует между цитохромом b
и цитохром с-оксидазой (КФ 1.9.3.1'). Небольшой белок (мол. масса 13 ООО)
