Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Диксон М. -> "Ферменты 2" -> 109

Ферменты 2 - Диксон М.

Диксон М., Уэбб Э. Ферменты 2 — М.: Мир, 1982. — 515 c.
Скачать (прямая ссылка): fermentit21982.djvu
Предыдущая << 1 .. 103 104 105 106 107 108 < 109 > 110 111 112 113 114 115 .. 158 >> Следующая

неактивным. С помощью ЫАО(Р)+-нуклеозидазы (КФ 3.2.2.6) можно заменить
никотинамид другими основаниями и получить таким путем ряд неактивных
аналогов. При участии того же фермента были получены аналоги, содержащие
никотинамид с модифицированной боковой цепью ([107, 108]. Результаты
определения активности этих аналогов в опытах с пятью различными
дегидрогеназами приведены в табл. 9.3.
Таблица 9.3
Скорости восстановления некоторых аналогов NAD'>
Боковая цепь в положении 3 Алкоголь-дегидрогеназа из печени лошади
Алкоголь-дегидрогеназа из дрожжей Лактатдегидрогеназа из мышц
кролика Лактатдегидрогеназа из сердца быка Глицераль-дегидфос-
фатдегид-рогеназа из мышц кролика Гидро- суль- фит
-со-nh2 100 100 100 100 100 +
-н 0 0 0 0 0
-СНз 0 0 0 0 0 -
-nh2 0 0 0 0 0 -
-NH-СО-СН3 0 0 0 0 0 -
-CS-nh2 348 16 3 41 16 +
-СО-NH-ОН 44 3 20 10 19
-СО-NH-NH2 68 8 33 9 38 +
-СО-н 30 2 20 30 0 +
-СО-СНз 90 10 60 15 55
-СНОН-СНз 0 0 0 0 0
/СН3 -со-сн;
792 52 125 37 0
СН3
-СО-СвН5 31 0 0 0 0
-CH = NOH 50 6 7 1 1
-сн=сн-со-nh2 0 0 0 0 0 +
') Скорость восстановления NAD+ принята за 100%. NAD+ (особенно легко в
щелоч-¦ном растворе) образует ряд аддуктов с такими веществами, как
альдегиды, кетоны, тио-лы, сульфит и цианид; присоединение происходит по
положению 4; в спектре поглощения этих соединений (как и у NADH) имеется
полоса в области 340 им. Соединения можно "кислить феррициаиидом до 4-
замещенных аналогов NAD+; как окисленные, так и восстановленные формы
соединений не активны в ферментативных реакциях [640, 48801.
676
Глава 9
Из этой таблицы видно, что для проявления коферментной активности и даже
для восстановления гидросульфитом необходимо, чтобы к кольцу была
присоединена группа СО или какая-либо другая ненасыщенная группировка.
Замещение -СО-NH2 на -CS-NH2 приводит к резкому увеличению активности с
одним из ферментов и к значительному уменьшению активности с другими
ферментами. Замещение или модификация -1ЧН2-группы обычно не полностью
лишает соединение коферментной активности, а приводит лишь к ее снижению,
хотя замена на группу -СН(СНз)г ведет к значительному увеличению
активности с одним ,из ферментов и полному исчезновению активности с
другим. Поскольку специфичность различных дегидрогеназ сильно варьирует,
аналоги успешно используются для разграничения дегидрогеназ различных
видов животных, ,а также изоферментов у одного и того же вида.
Для образования коферментами аддуктов участия дегидрогеназы не требуется.
Например, пируват как в присутствии, так и в отсутствие
лактатдегидрогеназы из сердца при pH 10 образует ковалентное соединение
по С-4 никотинамидного кольца NAD+. Если же соединение образуется в
составе комплекса с ферментом, оно может быть затем экстрагировано;
показана его идентичность соединению, образующемуся в отсутствие
фермента. Однако в последнем случае пируват присоединяется практически
неизбирательно по обеим сторонам кольца [образуется 60% "формы А" и 40%
"формы В" (см. с. 418 и 667), как и в случае присоединения цианида]; в то
же время, если присоединение происходит на ферменте, то вследствие
стереоспецифичности [157] образуется только форма А. Комплекс NAD+ -
пируват, безусловно, является тупиковым и действует как конкурентный
ингибитор.
Другие виды действия. В ряде случаев NAD и NADP выступают в роли
кофакторов в системах, в которых не происходит окисления. В качестве
примеров можно привести реакции, катализируемые лиазами 4.1.1.35,
4.2.1.45, 4.2.1.46, 4.2.1.47, изомера-зами 5.1.3.2, 5.1.3.12, 5.5.1.4 и
трансферазой 2.1.2.10 (в последнем случае, однако, происходит
восстановление).
Некоторые нуклеотиды способствуют сборке неактивных субъединиц фермента в
олигомер, обладающий полной активностью, другими словами, они действуют
как кофакторы типа (г) (см. с. 662). Примеры такого рода приведены в
табл. 10.2; весьма вероятно, что в ряде случаев такое действие (наряду с
функцией окислительно-восстановительного переносчика) может быть присуще
NAD. И в самом деле, было показано, что в присутствии NAD четыре
неактивные субъединицы фермента КФ 1.1.1.49 из эритроцитов объединяются,
образуя активный фермент; для этого же фермента из Neurospora было
показано, что NADP препятствует диссоциации тетрамера на субъединицы.
Кофакторы ферментов
677
Флавины и флавопротеиды
Первым из флавопротеидных ферментов был открыт флаво-протеид Варбурга и
Христиана (КФ 1.6.99.1) [4985], выделенный из дрожжей в 1932 г. Было
установлено, что он состоит из желтой флавиновой группы (она теперь
называется "рибофла-винфосфатом" или "флавинмононуклеотидом") и коллоида,
который, как было показано позднее Теореллом, представляет собой белок.
Строение рибофлавина было установлено путем синтеза Куном и др. [2623] и
Кэррером и др. [2338] в 1935 г.
Позже Варбург и Христиан рассматривали открытый ими флавопротеид как
артефакт [4987]. Однако в настоящее время число известных флавопротеидных
Предыдущая << 1 .. 103 104 105 106 107 108 < 109 > 110 111 112 113 114 115 .. 158 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed