Витамины - Девятин В.А.
Скачать (прямая ссылка):
Е в 20мл=8,9.
1 см
Для каждой серии опытов необходимо ставить контрольный опыт с чистой никотиновой кислотой. Для этого основной раствор,, содержащий 0,1 % никотиновой кислоты, разбавляют в колбе такой же емкости, какая применялась для испытуемого раствора (20—25 мл), и проводят реакцию с метолом и CNBr, как выше описано.
Если растворы слегка мутноваты, то перед измерением интенсивности окраски в штуфенфотометре их следует профильтровать.
2. Метод определения никотиновой кислоты в промышленных препаратах (по Иосиковой).
а) Для препаратов, не содержащих, кроме никотиновой, других кислот. Навеску исследуемого препарата в количестве 0,1—1 г помещают в стаканчик, приливают 15 мл воды и нагревают на сетке при помешивании до полного растворения навески. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры, переносят в мерный цилиндр емкостью 25 мл, смывают стенки стаканчика водой, доводя объем жидкости в цилиндре до 25 мл, перемешивают и фильтруют.
Из фильтрата отбирают 1—5 мл в эрленм ей еров скую колбочку, добавляют 1 каплю фенолфталеина и титруют из микробюретки или градуированной пипетки 0,1 N раствором щелочи до слаборозового окрашивания.
Расчет содержания никотиновой кислоты в испытуемом препарате производят пользуясь следующей формулой;
у_ п ¦ к • 25 . 100 ~~а~ПП 0,081 ’
где: п количество миллилитров 0,1 N раствора щелочи, пошедшее на титрование,
К - поправка к 0,1 N раствору щелочи,
25 —объём жидкости, в которой растворена навеска, а—навеска исследуемого препарата в г, взятая для определения, b—количество миллилитров фильтрата, взятого для титрования,
0,081—количество миллилитров 0,Ш раствора щелочи, идущее на титрование 1 мг никотиновой кислоты.
Работа с весьма ядовитым цианистым калием имеет ряд существенных недостатков, что тормозит внедрение этих методов в пищевые производства и мешает их широкому распространению.
Шмук, Девятниным и Иосиковой и др. (Ю) было показано, что в этой реакции цианистый калий может быть с успехом заменен неядовитым роданистым калием. В связи с этим во Всесоюзном витаминном институте Иосиковой для промышленных препаратов и одновременно и независимо от нее в НИХФИ Пономаревым (для мочи) были разработаны соответствующие методы.
Приводим описание метода определения никотиновой кислоты в витаминных препаратах по Иосиковой.
б) Роданбромидный метод. Берут 10 — 20 драже, взвешивают их для установления среднего веса, растирают в ступке, отбирают навеску в количестве 1—3 г на техно-химиче-ских весах, помещают ее в стаканчик и растворяют при нагревании в 10—15 мл дестиллированной воды. По охлаждении раствор переносят в мерный цилиндр, доводят до объема водой с таким расчетом, чтобы в 5 мл вытяжки содержалось 0,5—1 мг никотиновой кислоты, хорошо перемешивают содержимое цилиндра и фильтруют через складчатый фильтр.
Из фильтрата отбирают 5 мл в стаканчик и добавляют 1 каплю 2%-ного раствора щелочи. К полученной смеси прибавляют 2 мл роданбромидного раствора, 11 мл спиртового раствора анилина1, хорошо перемешивают и оставляют на один-два часа.
По истечении указанного времени смесь отфильтровывают от выпавшего осадка и образовавшуюся желтую окраску раствора сравнивают со стандартным раствором никотиновой кислоты в колориметре Дюбоска, устанавливая стандартный раствор всегда на 10 мм.
Приготовление стандартного раствора никотиновой кислоты. Навеску кристаллического никотинамида или никотиновой кис-
1 Один объем анилина растворяют в 10 объемах 96%-ного этилового опирта.
лоты растворяют в горячей воде с таким расчетом, чтобы в
1 мл раствора содержалось точно I мг никотиновой кислоты. Из полученного раствора отбирают 1 мл в стаканчик, добавляют
4 мл воды и 1 каплю 2N раствора щелочи.
Дальнейшую обработку стандартного раствора ведут в точности так же, как описано выше, и одновременно с обработкой испытуемого раствора.
Приготовление роданбромидного раствора. В эрленмейеровскую-колбочку отбирают 10 мл N раствора химически чистого KCNS, туда же добавляют 1 г кристаллического КВг, после полного растворения бромата прибавляют 1 мл НС1 (разведенной водой в отношении 1:1) и из бюретки или автоматической пипетки прибавляют по каплям 2,5 мл концентрированного брома (уд. в. 3,2) при постоянном помешивании содержимого колбочки.
Приготовленный раствор используют немедленно для реакции, не давая ему охладиться.
П р имечание. Приготовление раствора производят в вытяжном Шкафу с хорошей вентиляцией.
Биологическое испытание препаратов никотиновой кислоты на крысах не проводится по той причине, что эти животные могут обходиться без никотиновой кислоты. Проведение опытов на собаках представляет значительные трудности. Наиболее распространенными способами определения никотиновой кислоты являются микробиологические методы. Они постепенно заменяют трудоемкие и кропотливые химические методы и, повидимому, являются достаточно специфичными. По этому вопросу см. соответствующую литературу (11).
