Витамины - Девятин В.А.
Скачать (прямая ссылка):
Поволоцкая (6), проверяя различные методы количественного определения витамина В2, пришла к заключению, что метод Эккелен и Эммери мало удовлетворителен: при одной адсорбции, как это делают авторы, определяется всего лишь 45—55% имеющегося количества флавина. Поэтому Поволоцкая рекомендует производить последовательно три адсорбции сернистым свинцом; при элюировании каждого осадка тремя порциями элюирующей смеси удается повысить количество определяемого флавина до 90—95% (7).
3. Колориметрический метод. В животных тканяи, где желтые пигменты представлены по преимуществу одним рибофлавином, оказалось возможным измерять естественную желтую окраску вытяжек путем сравнивания со стандартными растворами.
Животную ткань хорошо измельчают и отмывают водой до получения прозрачных промывных вод. Для извлечения флавина измельченные и промытые ткани экстрагируют 10-кратным объемом 75%-ного метанола в течение 36—48 час. при температуре 20—36°. После центрифугирования полученного экстракта, содержащего все- фла~ вины данной ткани, прозрачную жидкость сливают и обрабатывают равным объемом хлороформа для удаления загрязняющих веществ (метаноловая фракция должна быть совершенно прозрачной). Слои разделяют в делительной воронке: хлороформенный—удаляют, а Желтый метаноловый—сравнивают в колориметре со стандартным раствором К2Сг04; окраска раствора, содержащего 0,1 мг К2Сг04 в 1 мл, соответствует по окраске содержанию 2,37 у рибофлавина в 1 мл испытуемого раствора. Этот метод применен Кравчиной для анализа драже и других изделий с витамином В2.
1 Этот метод в последнее время используется в ряде лабораторий при определении витамина в разных продуктах растительного и животного происхождения.
Наибольшее распространение в практике лабораторий в настоящее время получают микробиологические методы определения рибофлавина; по этому вопросу см. соответствующую литературу (8). Биологические методы определения рибофлавина (на крысах) практического интереса не представляют.
РАСПРОСТРАНЕНИЕ РИБОФЛАВИНА В ПРИРОДЕ И ЕГО ЗНАЧЕНИЕ
ДЛЯ РАСТЕНИЙ
Рибофлавин, относящийся к группе водорастворимых пигментов, так называемых лиохромов, широко распространен в растительном и животном мире.
Сопоставляя водорастворимые пигменты—лиохромы с жирорастворимыми—лип ох ромами, мы усматриваем между ними следующие различия.
Таблица 20
Свойства лиохромов и липохромов
Свойства Лиохромы Липохромы
Содержание азота +
Растворимость в воде + ---
» » жире --- +
Цвет раствора желто-оранжевый желто-красный
Флуоресценция зеленая, сильная желтая, слабая
Отношение к кислотам стабильны
» » щелочам не стабильны стабильны
» » окислителям стабильны не стабильны
» » свету не стабильны не стабильны
Окисленное вещество бесцветно бесцветно
Представители флавины каротиноиды
Синтезируются растением растением
Биологические свойства ферменты, витамин В2 провитамин А
Физиологически активный аггрегация с фосфор упрощение молекулы
вид ной кислотой и бел
ком
Активность (в y на крысу) 5 f рибофлавина 5 т а-каротина
2,5 y [i-каротина,
У животных и растений флавин содержится и в виде свободного рибофлавина, и в виде различных комплексов более или менее сложной структуры; причем большая часть флавина представлена в форме фермента.
Участие рибофлавина в окислительно-восстановительных процессах живой клетки, повидимому, чрезвычайно широко и разнообразно; это можно заключить хотя бы из того, что рибофлавин участвует не только в построении молекулы желтого дыхательного фермента^ осуществляющего дыхание клетки без геминовой системы, но и в построении молекулы диафоразы, которая является ферментом,
окисляющим дигидропиридин в дифосфопиридиннуклеотиде осуществляющем дегидрирование с помощью пиридинового основания1. Предложена следующая формула диафоразы:
Как видно, в состав этого фермента входит молекула флавина. Ферменты представленного типа, содержащие в своеи молекуле указанные группировки в качестве простетической группы, но различающиеся по характеру белкового носителя, различаются также и по своим энзиматическим свойствам. Отсюда следует, что ферментов типа диафоразы имеется несколько, и роль флавина, таким образом, значительно расширяется; из дрожжей, в частности, был выделен еще один фермент, несколько отличающийся в строении своей простетической группы, но также содержащий флавин.
