Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
Время после введения клеток и антигена, дни
3456789 10
Рис. 15.6. Неонатально толерантные алло-генные клетки селезенки не восстанавливают иммунореактивность бестимусных мышей.
Бестимусным мышам линии Q вводили син-генные клетки селезенки линии Q (темные кружки) или аллогенные клетки селезенки линии А от доноров с неонатально индуцированной толерантностью к антигенам гисто-
совместимости линии Q (светлые кружки). Реципиентов иммунизировали (0-й день) и повторно стимулировали (7-й день) бараньими эритроцитами. Титр гемагглютинирую-щих антител определяли от 3-го до 10-го дня. А. Суммарный антительный ответ (IgM + IgG). В. Антительный ответ, устойчивый к действию 2-меркаптоэтанола (только IgG). (По [27]; печатается с разрешения.)
Ft(A X Q), чтобы индуцировать толерантность к антигенам гистосовместимости линии Q (классический эксперимент Брента и Медавара, см. гл. 20). Тимоциты и клетки селезенки таких мышей линии А, толерантных к антигенам гистосовместимости линии Q, не поддерживали антительного ответа бестимусных мышей линии Q на БЭ (рис. 15.6).Слабый ответ иногда наблюдался на 4—10-й
день, но почти полностью был представлен IgM-антителами. В отличие от этого сингенные клетки селезенки поддерживали нормальный ответ, который продолжал нарастать при вторичной иммунизации и был представлен IgG-антителами. Таким образом, удаление аллореактивных клеток не приводит к выявлению полностью аллогенных взаимодействий Т- и В-лимфоцитов (плюс макрофаги), при которых наблюдается выраженное образование IgG-антител.
Согласно гипотезе первичной иммунизации, тимоциты и клетки селезенки линии А должны содержать Т-клетки, специфичные к антигену в ассоциации с молекулами МНС линии Q. Поскольку эта клеточная популяция не была первично активирована, такие Т-клетки должны встречаться с той же частотой, что и Т-клетки, специфичные к антигену в ассоциации с молекулами МНС линии А, т.е. не должно быть избирательного распознавания. Более того, макрофаги и В-лимфоциты в этом эксперименте получены от бестимусных мышей и характеризуются фенотипом линии Q. Следовательно, первичная иммунизация должна приводить к избирательному размножению Т-клеток, рестриктиро-ванных по молекулам МНС линии Q и способных кооперировать с В-лимфоцита-ми линии Q. Однако наблюдался лишь слабый IgM-ответ.
Эти результаты не противоречат опытам Хебер-Кац и Вильсона [23] (рис. 15.5). И в тех и в других опытах исходный первичный IgM-ответ был сравним при сингенных и аллогенных взаимодействиях клеток. Только на поздних сроках (более 7 дней), и в особенности после вторичной иммунизации, появлялись различия между аллогенной и сингенной комбинацией клеток в опытах Киндред [27]. Хебер-Кац и Вильсон [23] не исследовали ответ на этих сроках. Итак, если рассматривать концепцию МНС-рестрикции как необходимость двойного распознавания антигена и молекул МНС рецептором Т-лимфоцитов, то результаты Киндред указывают на то, что в популяции Т-лимфоцитов линии А нет клеток, специфичных к молекулам МНС линии Q и при этом способных генерироваться после первичной иммунизации.
В дальнейших опытах Спрента [17], поставившего эксперимент по схеме, использованной Хебер-Кац и Вильсоном [23] (рис. 15.3 и 15.5), были получены результаты, сходные с данными Киндред [27]. Спрент исследовал популяцию Т-клеток лимфатических узлов непримированных мышей линии А, из которой в результате отрицательной селекции, осуществленной фильтрацией через мышей FX(A X Q), были удалены аллореактивные Т-клетки, специфичные к молекулам МНС линии Q. Однако в отличие от Хебер-Кац и Вильсона Спрент не определял первичный ответ in vitro. Вместо этого он переносил отрицательно селектированные Т-клетки облученным реципиентам FX(A X Q) и затем иммунизировал их бараньими эритроцитами (БЭ). У реципиентов Fx представлены были АПК, которые несут молекулы МНС каждого из родителей и которые, следовательно, должны вызывать стимуляцию антиген-специфических Т-клеток, рестриктированных по антигенам гистосовместимости линий А и Q. На 5-й день иммунные Т-лимфоциты собирали через грудной лимфатический проток (стадия положительной селекции) и затем определяли их способность к кооперативному ответу на БЭ с сингенными и аллогенными В-лимфоцитами и макрофагами при переносе третьему облученному реципиенту. Полученные результаты (представленные в табл. 15.19) были однозначны. Т-лимфоциты линии А, истощенные от аллореактивных клеток, специфичных к молекулам MHC-Q, и первично иммунизированные в реципиенте FX(A X Q), взаимодействовали только с В-лимфоцитами и макрофагами линии А, но не линии Q. В соответствии с данными ранних экспериментов по МНС-рестрикции эти Т-лимфоциты взаимодействовали с В-лимфоцитами и макрофагами FX(A X Q), что исключает возможность остаточных аллогенных эффектов, связанных с неполным удалением
аллореактивных клеток. В качестве контроля такой же опыт ставили на Т-клетках животных Fx, которые, как известно, содержат обе субпопуляции, рестриктированные по разным молекулам МНС. Как видно из табл. 15.19, обе субпопуляции сохраняются и при отрицательной, и при положительной
