Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
Интересно, что при клонировании была выявлена третья субпопуляция антиген-специфических Т-клеток гибридов Fx. Эта популяция оказалась специфичной к антигену в ассоциации с уникальными молекулами гистосовместимости гибридов Ft. Как следует из табл. 15.12, Т-клоны этого вида можно было стимулировать ГАТ только в ассоциации с АПК мышей Fx. АПК ни одной из родительских линий, даже будучи смешанными, не были способны индуцировать ответ. Чтобы объяснить такую Fj-специфическую рестрикцию, необходимо знать структуру молекул гистосовместимости, распознаваемых Т-клеточными клонами. Как было сказано в гл. 14, молекулы а-антигенов состоят из двух белковых субъединиц, а- и p-цепей, кодируемых разными генами. Существование уникальных антигенов гистосовместимости гибридов Ft можно объяснить тем, что а- и P-цепи молекулы данного 1а-белка случайно ассоциируются в цитоплазме, т. е. a-цепь, кодируемая аллельным вариантом одного родительского гаплотипа, может соединяться с P-цепью, кодируемой аллельным вариантом другого родительского гаплотипа МНС. Таким образом, возможны четыре комбинации: а^, aip2, oc2$i и a2p2; aipi и a2p2 представляют формы, выявляемые в двух родительских линиях, а молекулы и а2рх встречаются только у гибридов Fx. Следовательно, клоны Т-клеток, распознающие антиген в ассоциации с молекулами ахр2 или а2Р15 характеризуются Fi-специфическим фенотипом. Существование таких клонов служит еще одним доводом в пользу предположения о том, что МНС-рестрикция представляет собой характерную особенность распознавания молекул МНС Т-клетками.
15.2.8. Рестриктирующими элементами распознавания
пролиферирующих Т-лимфоцитов являются МНС-молекулы класса II
Существование трех разных субпопуляций Т-лимфоцитов гибридов Flt рестриктированных по области I и специфичных к одному антигену, свидетельствует в пользу модели Т-клеточного рецептора, распознающего «свое». Однако предположение о существовании аллельного исключения CI-молекул хелперных клеток делает вероятной модель взаимодействия подобных структур, что оказалось столь же трудно опровергнуть, как и в случае цитотоксических Т-лимфоцитов. Первые доказательства заключались в том, что антисыворотки и моноклональные антитела, направленные против молекул класса II (антитела к 1а-белкам), ингибируют пролиферативный ответ Т-лимфоцитов на антиген. Как отмечалось выше, возражения против этих доказательств основываются на факте существования близко сцепленных генов, кодирующих структуры клеточных взаимодействий. Такая возможность согласуется с тем, что у некоторых видов, в частности у мышей, молекулы 1а не выявляются на отвечающих Т-клет-ках.
Сравнительно недавно Мэлволд и Кон (Melvold, Kohn) получили мутантную линию мышей, названную B6.C-H-2bm12. Эта линия, по данным Мак-Кина (МсКеап), несет мутацию гена, кодирующего Ая-полипептидную цепь молекулы I-А. Кроме того, как показали Кимото и др. [19], некоторые клоны Т-лимфоцитов, полученные от мышей Fx (В6 X А), отвечают на антиген в ассоциации с макрофагами Fx (В6 X А), но не Fi (bml2 х А). Для активации этих клонов необходима нормальная молекула Ар- В противоположной комбинации линий подобные эксперименты пока не проводили, т. е. не были получены клоны Т-клеток Fx (bml2 х А). Тем не менее из этих экспериментов очевидно, что именно la-молекулы, экспрессированные на поверхности макрофага, являются структурами, непосредственно участвующими в МНС-рестриктированных взаимодействиях пролиферирующих Т-лимфоцитов и макрофагов.
Исходя из этого, можно сделать вывод о несостоятельности модели взаимодействия подобных структур, поскольку la-молекулы на мышиных Т-клетках не определяются. Т-клетка должна обладать другими молекулами — распознающими структурами, комплементарными 1а-молекулам макрофага.
15.2.9. Повторное обсуждение вопроса о МНС-рестрикции взаимодействий’Т- и В-клеток
В этом месте нашего обсуждения следует заново рассмотреть поднятый ранее вопрос: существует ли рестрикция взаимодействия Т- и В-лимфоцитов? Читатель помнит, что бесспорное доказательство генетической рестрикции взаимодействий Т-клеток и макрофагов, одного из самых ранних событий в ходе иммунного ответа, оставляет открытой возможность нерестриктированных взаимодействий на последующих этапах ответа. Все эксперименты, направленные на изучение этого вопроса, построены сходным образом с использованием суб- ; популяций Т-лимфоцитов одной антигенной специфичности г ибрида Fx. В этих опытах Т-лимфоциты Fj (А X Q) стимулировали антигеном в присутствии макрофагов линии А. Затем определяли, будут ли полученные Т-клетки, которые должны быть специфичны к антигену в сочетании с молекулами МНС линии А, взаимодействовать только с В-лимфоцитами линии А (рестриктиро-рованное взаимодействие) или с В-лимфоцитами каждой из родительских линий А и Q (нерестриктированное взаимодействие). Хотя этот эксперимент и несложен, но, к сожалению, однозначного ответа получено не было.
В зависимости от использованной схемы эксперимента исследователи обнаруживали то рестриктированные, то нерестриктированные взаимодействия. Например, Мак-Дугал и Корт [20] иммунизировали in vitro Т-лимфоциты Fi (А X Q) нагруженными антигеном макрофагами и затем испо л ьзовали эти к Т-клетки для кооперации с иммунными к гаптену В-лимфоцитами и макрофагами родительских линий (табл. 15.13). Такие Т-клетки взаимодействовали преимущественно с макрофагами родительской линии, использованной для п ри-мирования. Однако эта генетическая рестрикция распространялась только на взаимодействия между макрофагами и Т-клетками. Если при определении способности Т-клеток гибридов Fl5 примированных к антигену в сочетании с макрофагами линии А, взаимодействовать с В-лимфоцитами линии Q, во вторичную культуру добавляли макрофаги линии А, то наблюдался антительный ответ В-лимфоцитов линии Q (989 БОК с макрофагами А и 349 БОК с макрофагами Q). Следовательно, взаимодействие Т- и В-лимфоцитов является нерестриктирован-ным. Сходные результаты были получены при иммунизации Т-клеток гибридов Fx макрофагами линии Q (табл. 15.13, вторая строчка).
