Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
по включению *Н-тимидина. Как следует из табл. 15.10, если Т-клетки гибридов Fx стимулировали нагруженными ОА макрофагами линии 2 до и после освещения и обработки БУдР, во вторичной культуре не наблюдалось пролиферативного ответа. Это свидетельствует об удалении всех Т-клеток, специфичных к ОА в ассоциации с макрофагами линии 2. Если же во вторичной культуре использовались макрофаги линии 13, то наблюдался выраженный ответ на тот же самый антиген ОА. Следовательно, должна существовать вторая популяция Т-лимфоцитов гибридов Fj, специфичная к О А в ассоциации с макрофагами линии 13. На Т-клетки, специфичные к другому антигену (PPD) в ассоциации с макрофагами обеих родительских линий, отрицательная селекция не влияла. В обратной постановке опыта с использованием нагруженных ОА макрофагов линии 13 в первичной культуре удалялись Т-клетки, специфичные к О А + макрофаги линии 13, но сохранялись Т-лимфоциты, специфичные к О А + макрофаги линии 2 (табл. 15.10). Такой отрицательной селекции препятствовали антитела, направленные против la-молекул морских свинок, что свидетельствует о необходимости распознавания Т-лимфоцитами антигена в сочетании с молекулами гистосовместимости класса II.
Две субпопуляции хелперных Т-лимфоцитов гибридов Ft, специфичные к одному антигену, были выявлены Спрентом [17] с использованием положительной и отрицательной селекции клеток методом фильтрации in vivo. При этом Т-лимфоциты лимфоузлов мышей-доноров вводили вместе с антигеном
в облученных мышей родительских линий или гибридов Fx. На различные сроки после введения донорские клетки собирали с помощью дренирования грудного лимфатического протока. В нескольких лабораториях было установлено, что в течение первых двух дней после переноса антиген-специфические отвечающие Т-лимфоциты задерживаются в лимфоидных органах (например, селезенке) облученного реципиента и не входят в состав популяции рециркулирующих лимфоцитов (рис. 15.3). Если на этом этапе собирать клетки лимфы грудного протока, то в такой популяции не будет антиген-реактивных клеток (отрицательная селекция). В отличие от этого на 3—5-й день после переноса антиген-реактивные клетки активно пролиферируют в лимфоидных органах и появляются среди рециркулирующих лимфоцитов. Если в это время собирать клетки из
15.2.5.2. Хелперные Т-лимфоциты
Рис. 15.3. Положительная и отрицательная селекция антиген-специфических Т-клеток при избирательном дренировании лимфоцитов грудного лимфатического протока. В течение первых суток после введения антигена специфические Т-клетки исчезают из центральной лимфы и задерживаются в лимфоидной ткани. После интенсивной пролиферации в лимфоидных органах активированное потомство этих клеток в большом количестве выходит в кровоток. (По [17}; печатается с разрешения.)
Время после введения антигена, дни
грудного лимфатического протока, то полученная популяция окажется высокообогащенной антиген-реактивными клетками (положительная селекция). Таким образом, одна и та же экспериментальная процедура может быть использована ря положительной и отрицательной селекции в зависимости от срока взятия лимфы из грудного протока.
С помощью такой процедуры Спрент [17] исследовал хелперную активность Т-лимфоцитов гибридов Fx, положительно и отрицательно селектированных в реципиентах родительских линий. Эти Т-лимфоциты вводили облученным Fj мышам вместе с антигеном (бараньи эритроциты — БЭ), а также В-лимфоцитами и макрофагами (обработанные антителами к Thy-1 и комплементом клетки селезенки) доноров, иммунных к этому антигену. Спустя неделю определяли количество бляшкообразующих клеток, специфичных к БЭ. Если Т-лимфоциты гибридов Fx (А х Q) подвергали отрицательной селекции с антигеном в облученном реципиенте линии А, то хелперные Т-клетки, взаимодействующие с макрофагами и В-лимфоцитами линии А, специфически выводились из популяции клеток грудного протока (табл. 15.11). Эта популяция кооперирует с макрофагами и В-лимфоцитами мышей линии Q и Fj (А X Q) при ответе на БЭ. Кроме того, эта популяция кооперирует с макрофагами и В-лимфоцитами линии А при ответе на другой антиген (эритроциты лошади). При исследовании Т-лимфоцитов, положительно селектированных на 5-й день, обнаружена высокая степень обогащения хелперной активности по отношению к В-лимфоцитам и макрофагам линии А (табл. 15.11). Было обнаружено также обогащение хелперной активности этой популяции клеток по отношению к В-лимфоцитам и макрофагам гибридов Fj, но не к клеткам мышей линии Q.
Таблица 15.11. Положительная и отрицательная селекции хелперных лимфоцитов гибридов Ft в реципиенте одной из родительских линий1) (по [91, 92])
Селекция в реципиенте линии А В-лимфоциты и МФ Количество IgG-
БОК на селезенку
Отрицательная А 0
Q 10 500
(AxQ) 18100
Положительная А 275 400
