Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
14.3.2.3. Полиморфизм альфа- и бета-цепей DR
Сравнительное изучение альфа- и бета-цепей класса II у человека путем анализа триптических пептидов проводили в нескольких лабораториях. В этих исследованиях использовали разные методы разделения пептидов и разные радиоактивно меченные аминокислоты. Во всех случаях для получения препаратов альфа- и бета-цепей молекулы фракционировали по размерам в ДСН-ЭПАГ. Хотя, согласно большинству работ, бета-цепь более полиморфна, была выявлена также гетерогенность пептидов альфа-цепей. Поскольку в гомозиготной линии клеток было обнаружено семь вариантов бета-цепей (табл. 14.9), то вполне возможно, что использование для разделения цепей других методов, основанных не на различии размеров, приведет к иным результатам.
Антигены класса II клеточных линий, гомозиготных по HLA-DR, исследовали с помощью двумерного электрофореза в геле. Как и в случае антигенов класса II мыши, распределение имело сложный характер и состояло из нескольких «пятен» альфа- и бета-цепей. Две независимые группы исследователей изу-
чили большое количество гомозиготных по HLA-DR клеточных линий, проводя преципитацию молекул класса II моноклональными антителами против моно-морфных детерминант. Применяя разные модификации двумерного электрофореза в геле, обе группы обнаружили, что бета-цепь более полиморфна; распределение пятен, соответствующих альфа-цепям, было сходным для всех линий клеток, в то время как распределение бета-цепей разных линий значительно различалось.
14.3.2.4. Серологический анализ продуктов HLA-D/DR
Субпопуляции молекул класса II идентифицировали с помощью аллоантисывороток и моноклональных антител. В некоторых случаях анализ включал в себя последовательную иммунопреципитацию, в других — сравнивали результаты двумерного электрофореза в геле молекул, преципитированных аллоантисыворотками или моноклональными антителами разной специфичности. Большинство молекул класса II можно осадить из лизата клеток с помощью [ аллоантисывороток против HLA-DR. [
Первые сведения о молекулах класса II, отличных от HLA-DR, были | получены при использовании антисывороток против специфичности, обозна- f ченной DC1. Впоследствии оказалось, что антисыворотки МВ1, МТ1 и LB12 j проявляют такой же характер цитотоксичности и осаждают из клеточных лиза- j тов такие же молекулы, как и антисыворотка DC1. Преципитируемые этими | сыворотками альфа- и бета-цепи отличаются от цепей, преципитируемых анти- i DR-сыворотками. Кроме того, было показано, что молекулы, реагирующие 1 с сывороткой DC1, чувствительны к ограниченному протеолизу папаином, что также отличает их от молекул HLA-DR.
Субпопуляции молекул класса II, отличающиеся друг от друга характерными альфа- и бета-цепями, были обнаружены также с помощью 1) аллоантисывороток различной специфичности, 2) ксеноантисыворотки против полиморфных детерминант, и 3) моноклональных антител против мономорфных структур. Использованные в работах клеточные линии имеют разные аллели HLA-DR и связанные с ними специфичности MB и МТ. По некоторым данным антигены SB, которые экспрессированы на В-лимфоцитах и определяются в тесте при- * мированных лимфоцитов (ТПЛ), являются молекулами класса II. Антигены SB были картированы в хромосоме 6, между HLA-DR и GLO. Моноклональные антитела, подавляющие реакцию ТПЛ против специфических аллелей SB, способны также осаждать молекулы класса II. [
Несмотря на значительный объем сведений, подклассы антигенов HLA 5 класса II изучены недостаточно полно. Одно из возможных затруднений состоит | в том, что молекулярные взаимосвязи между разными продуктами класса II i могут быть неодинаковыми в клетках разных линий. Кроме" того, антитела, I используемые для выделения антигенов, способны реагировать с общими или } перекрестно-реактивными детерминантами, присущими молекулам разных под- [ классов. Дополнительная трудность связана с отсутствием четких представ- | лений о генотипе клеток, используемых для характеристики разных подклассов j антигенов. Гетерогенность альфа- или бета-цепей из клеток, не являющихся * истинными гомозиготами, может просто отражать аллельные вариации одного ! и того же подкласса молекул. 1
Многие данные свидетельствуют о существовании нескольких разных под- \ классов молекул класса II у человека; приблизительная оценка указывает на [ три таких подкласса. Можно предполагать, что заболевания, связанные с опре- [ деленными аллелями HLA-D или DR, имеют гораздо более тесную ассоциацию {
с.подклассами молекул класса II. Характеристика молекул этих подклассов является первым шагом на пути подробного анализа области HLA-DIDR и картируемых в этой области функций.
14.3.3. Гены, кодирующие антигены класса II
В последнее время начинают появляться работы, посвященные описанию генов класса II, и сейчас мы уже имеем некоторые сведения о генах DR человека [73—75]. По всей вероятности, в изучении генов, кодирующих антигены класса II мыши и человека, в ближайшем будущем произойдет «информационный взрыв».
