Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
Маргулис и др. [33] и Квист и др. [29], осуществив анализ различных линий мышей методом блоттинга по Саузерну, показали, что примерно 10— 15 генов обнаруживают достаточную гомологию с зондами класса I. При использовании этого метода полученное значение числа гомологичных генов оказы-
вается минимальным, поскольку любой большой фрагмент ДНК, дающий положительную реакцию, на самом деле может содержать сразу несколько генов в виде тандемных повторов. В проведенном недавно исследовании, в котором ДНК спермы мышей BALB/c клонировали в виде крупных фрагментов в космидах, было показано, что число генов класса I может быть больше 15. Если обычная геномная библиотека создается из фрагментов размером 10— 20 т.п.н., для успешной «упаковки» в космиду требуются фрагменты величиной не менее 32 т.п.н. При анализе космидной библиотеки было выявлено примерно ! 13 кластеров, содержавших гены класса I, причем в пределах кластера содер- [ жалось от 1 до 7 генов. Результаты рестрикционного картирования различных клонов космид указывают на то, что геном BALB/c содержит по меньшей мере 36 генов класса I.
Трудно согласовать наличие 36 генов класса I с числом продуктов этого класса, определяемых серологическим путем и методами структурного анализа белков. Такое несоответствие имеет несколько объяснений, первое из которых связано с наличием псевдогенов. Псевдогены — это гены, которые имеются [ в геноме, но не транскрибируются в нормальных условиях, поскольку они • содержат дефекты в виде нонсенс- или стоп-кодонов, локализованных в пре- ' делах нормальной кодирующей последовательности. Ряд других дефектов } (например, ошибка в сигналах сплайсинга) может привести к тому, что транс-1 крибируемый ген не будет транслирован и соответственно экспрессирован в данном организме. Поэтому, хотя имеются данные о существовании в преде- = лах комплекса Н-2 многочисленных генов класса I, нет никаких доказательств, ! что каждый из этих генов экспрессируется в организме. :
Наличие большого числа генов можно объяснить и тем, что некоторые продукты класса I до сих пор не удавалось идентифицировать. Проведенное недавно Космэном и др. [27] исследование клонов кДНК из печени взрослой мыши свидетельствует о реальной возможности существования дополнитель-1 ных, не выявленных до настоящего времени продуктов класса I. Эти исследова-1 тели обнаружили клон кДНК, содержавший кодирующую последовательность, | на 88% гомологичную отрезку положений 198—279 аминокислотной последова-1 тельности Н-2КЬ. Однако в отличие от «нормальных» молекул Н-2 вместо [ продолжения в виде гидрофобного участка клон содержал вставки, кодирую ! щие гидрофильные аминокислотные остатки. Весь транскрипт имел длину \ около 301 аминокислотного остатка и мог бы представлять укороченную форму | молекулы Н-2. Было высказано предположение, что продукт является секрети-руемой формой молекулы Н-2, поскольку в нем отсутствовала последовательность, необходимая для закрепления в плазматической мембране. В свете таких наблюдений величина 36 кажется вполне приемлемой для оценки числа генов класса I. Она может отражать существование почти идентичных друг другу генов класса I.
14.3 Антигены класса И
Было показано, что гены, кодируемые в области H-2I, играют решающую роль в осуществлении множества иммунных функций, в том числе в способности реагировать на антиген и осуществлять супрессию иммунного ответа; эти гены определяют целый ряд взаимодействий Т-лимфоцитов с В-лимфоцитами и макрофагами. Кроме того, было установлено, что генетический контроль реакции в смешанной культуре лимфоцитов (СКЛ) и реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ) осуществляется у мыши генами области I. Сходные функции были картированы в гомологичной области HLA-D/DR человека. Оказалось
также, что эта область связана с предрасположенностью к некоторым заболеваниям и патологическим состояниям. Очевидно, что генетическая гетерогенность человеческих популяций и этические ограничения экспериментов на человеке создают трудности для получения такой детальной информации об области HLA-DIDR, которая имеется для области / у мыши.
Единственные продукты областей H-2I и HLA-D/DR, охарактеризованные иммунохимическими методами, — это соответственно антигены 1а и HLA-DR, которые относят к антигенам класса II. Антигены класса II — крайне полиморфные семейства молекул, имеющих сходную структуру: они построены из двух гликопротеиновых цепей. В отличие от ситуации с молекулами класса I обе цепи антигенов класса II у мыши кодированы в пределах МНС. Знание тонкой структуры антигенов класса II представляет большой интерес, поскольку результаты функциональных и генетических исследований говорят о том, что именно с участием антигенов класса II реализуются по крайней мере некоторые иммунологические феномены, контролируемые генами областей H-2I и HLA-DIDR.
14.3.1. Антигены 1а комплекса Я-2 у мыши [42—51}
Хотя с помощью рекомбинантного анализа область I можно разделить на пять субобластей I-А, I-В, I-J, I-Е и I-С, только для субобластей I-А и 1-Е показано, что они контролируют синтез биохимически определяемых продуктов. Антитела против продуктов субобластей I-А и I-Е прецшштируют молекулы, состоящие из двух гликопротеиновых цепей (альфа и бета), характерных для молекул класса II. Имеются сообщения, что ряд растворимых факторов супрессии или стимуляции иммунного ответа имеют антигенные детерминанты класса I, но структурная взаимосвязь между этими факторами и продуктами класса II пока еще неясна.
