Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
найдены значительные различия в других иммунных функциях, осуществляемых антигенами класса I, например в способности антигенов функционировать в качестве мишеней для цитотоксических лимфоцитов. Хотя были получены моноклональные антитела, избирательно реагирующие с разными мутантами.
Таблица 14.5. Выявленные аминокислотные замены у мутантов Н-2КЬ (по [5])1
Мутант Бромциа- Положение Замена Мутант Бромциа- Положение Замена
новый аминокислоты аминокислоты НОВЫЙ аминокислоты аминокислоты
пептид пептид
bml 1а 155 Arg--- Туг 121 Cys---Arg
' 156 Leu---Туг bm8 IHn 23 Met---X
ЬтЗ Ib 77 Asp---X bm9 Ib 116 Туг---Phe
89 Lys---X 121 Cys-Arg
Ьт4 1а --- --- bmlO la 165 Val---Met
Ьт5 Ib 116 Туг---Phe la --- ---
Ьтб Ib 116 Туг---Phe bmll Ib 77 Asp---X
121 Cys---Arg bml 6 Ib 166 Tyr--- Phe
Ьт7 Ib 116 Туг---Phe
1) Локализация замен схематически изображена на рис. 14.8.
•следует подчеркнуть, что, как правило, мутантные варианты не удается дифференцировать стандартными серологическими реагентами, используемыми для типирования Н-2. Таким образом, минимальные изменения первичной структуры, не выявляемые обычными серологическими методами, могут вызывать значительные изменения биологической активности молекул.
14.2.4.2. Функциональные варианты антигенов класса I у человека
Варианты антигенов класса I у человека, по-видимому аналогичные мутантным формам класса I у мыши, были выявлены в функциональном тесте, основанном на цитотоксической реакции против инфицированных вирусом клеток. В этом тесте путем стимуляции in vitro аутологичными клетками, инфицированными вирусом, получают цитотоксические лимфоциты (ЦТЛ). Узнавание и лизис клеток-мишеней рестриктированы в такой системе двумя параметрами: используемой при иммунизации (примирующей) линией вируса и определенными антигенами HLA-A и HLA-В на клетках-респондерах. Иными словами, лизису будут подвержены лишь мишени, идентичные респондерам (ЦТЛ) по соответствующим антигенам HLA-A или HLA-В и инфицированные вирусом, использованным для примирования (т.е. тем же самым вирусом).
Щелочной pH
Кислотный pH
Рис. 14.6. Сравнительный анализ с помощью изоэлектрофокусирования вариантов молекул HLA-A2, определяемых по разной реакции цитолитических Т-лимфоцитов. Дорожки 1-4 соответствуют продуктам, полученным из клеточных линий JY, М7, S11
и UB17; дорожки 5-8 — тем же продуктам, но клетки выращивали в присутствии туни-камицина. В других работах показано, что ЦТЛ против HLA-A2 не, лизируют клетки М7 (дорожки 2 и 6). ([11]; печатается с разрешения.)
Цитотоксические лимфоциты против вируса гриппа, рестриктирован-ные по HLA-A2, лизировали все инфицированные этим вирусом мишени HLA-A2, за одним исключением [11]. Резистентные к действию ЦТЛ клетки несли аллель HLArA2, продукт которого по всем серологическим критериям не отличался от антигена HLA-A2 клеток, чувствительных к действию ЦТЛ. Однако когда молекулы HLA-A2 трех «ЦТЛ-чувствительных» доноров сравнили с молекулами «ЦТЛ-резистентного» донора методом изоэлектрофокусирования, было обнаружено четкое отличие молекул «резистентного» донора от аналогичных молекул «чувствительных» доноров (рис. 14.6). Дальнейший анализ показал, что различия зарядов этих молекул не связаны с различным содержанием сиаловых кислот, поскольку такие же различия наблюдались при изоэлектрофокусировании молекул, полученных из клеток, которые выращивали в присутствии туникамицина (ингибитор гликозилирования). По предварительным данным рассматриваемый вариант молекулы HLA-A2 отличается от других молекул по определенному триптическому пептиду, содержащему единичную аминокислотную замену.
Детальные исследования рестриктированных по HLA цитолитических реакций выявили аналогичную гетерогенность молекулы HLA-A3. Некоторые варианты этой серии имели также различия, определяемые аллогенными ЦТЛ. Как и в случае варианта антигена А2, функциональные различия антигенов АЗ не отражаются на их серологической реактивности.
Подробный анализ структуры мутантных антигенов класса I мыши и вариантов антигенов класса I человека принесет, по-видимому, много новой интересной информации. Возможность определять корреляции между минимальными изменениями первичной структуры и соответствующими функциональными изменениями, выявляемыми в различных тестах, представляет уникальную, не имеющую себе равных ситуацию для изучения структурно-функциональных взаимосвязей.
