Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
В дополнение к особенностям аминокислотной последовательности молекулы антигенов класса I мыши можно дифференцировать по другому структурному параметру. Речь идет о числе углеводных групп в молекуле. Молекулы Кь и Dd имеют по два, а молекулы Db, Ld и Kd — по три участка гликозилирова-ния. Углеводные группы связаны с остатками Asn в положениях 86 и 176; третий углеводный остаток в тех случаях, когда он есть, связан с положением 256. Отсутствие каких-либо особенностей в первичной структуре или характере гликозилирования у продуктов локусов К и D кажется удивительным; возможно, индивидуальные черты будут найдены в ходе дальнейшего структурного анализа, в особенности при изучении С-концевых фрагментов.
14.2.3.2. Другие молекулы класса I [12, 16—19, 23]
Помимо продуктов класса I, кодируемых в локусах К, D, L и R мыши и локусах А, В и С человека, существует другая группа антигенов, удовлетворяющих определению молекул класса I. У мыши есть группа генов, локализованных в хромосоме 17 теломерно по отношению к комплексу Н-2\ эти гены кодируют продукты класса I, обозначенные Qa-1, Qa-2 и TL. Как было показано, продукты этой области, получившей название Т1а, сходны с продуктами класса I областей К и D в том отношении, что имеют такую же субъединичную структуру: р2т и тяжелую цепь — гликопротеин с мол. массой около 45 ООО. Продукты области Т1а имеют более ограниченное распределение по тканям, чем продукты генов областей К и D; функциональная роль этих продуктов не известна.
Данные о том, что молекулы класса I области Т1а по субъединичному составу в принципе аналогичны молекулам области К и D, были единственными сведениями о структуре этих молекул, пока Солоски и др. [19] не получили антигены Qa в количествах, достаточных для проведения детального структурного анализа. Эти исследователи выделяли молекулы Qa из стимулированных митогенами клеток селезенки (клетки селезенки в состоянии покоя экспрессируют незначительные количества Qa, недостаточные для осуществления структурного анализа). Степень аналогии между молекулами Qa-2 и молекулами областей К и D определяли с помощью метода пептидных карт. Анализ показал, что молекула Qa-2 имеет сходство с молекулами К и D по 21—43% триптических пептидов, что указывает на приблизительно 75—90%-ную гомологию аминокислотных последовательностей. Исходя из данных о сходстве первичных структур молекул К и D и результатов сопоставления их пептидных карт, можно предположить, что молекулы Qa-2 и Н-2К родственны друг другу в той же степени, что и молекулы Н-2К и H-2D.
Дальнейшие исследования были направлены на определение N-концевой последовательности Qa; в табл. 14.4 приведены сравнительные данные о N-koh-цевых последовательностях Qa-2 и Н-2КЬ. Чтобы получить максимальную гомологию между двумя последовательностями, необходимо было допустить существование в молекуле Н-2КЬ вставки из двух аминокислотных остатков, расположенных со стороны С-конца от положения 3 (т.е. между положениями 3 и 4 молекулы Н-2КЬ). Введение такой вставки в схему позволило сравнить
последовательности по 18 остаткам; 14 из этих 18 остатков оказались идентичными для обеих молекул. Интересно отметить, что, в то время как во всех продуктах Н-2К и H-2D в положениях 6 и 21 находятся остатки аргинина, у Qa
Таблица 14.4. Гомология N-концевых последовательностей аллоантигенов Н-2КЬ и Qa-2
1 2 3 4
-2Kb G Р Н [ ] []2) SLRYFVTAVSRPGLGEPRYMEVGYVDDTEFVRFDSDA
Qa-2 Н L1) Y F V R Ь 1)F VLYV FRF
1) Положения, в которых у всех известных антигенов класса I, за исключением Qa-2, находится Arg [19].
2) Вставки, необходимые для максимального совмещения последовательностей Qa-2 и Н-2К"•
в этих положениях находятся остатки других аминокислот. Эти данные указывают на то, что, несмотря на большое сходство цепей Qa с продуктами областей К и D, все же эти цепи могут иметь уникальные черты, характерные для про- : дуктов генов этой группы.
14.2.3.3. Тимус-лейкоаные антигены
Группа антигенов класса I, обозначаемая TL и кодируемая в локусе Tla, f обнаруживается на клетках тимуса мышей некоторых линий и на лейкозных клетках при некоторых формах лейкоза у мышей всех линий. Шесть специфичностей антигена TL (TL.1 — TL.6) были определены с помощью обычных алло- 5 иммунных сывороток.
Чтобы выяснить, связаны ли различные специфичности TL, с одной или несколькими разными молекулами, кодируемыми в Tla, был использован метод последовательных иммунопреципитаций. Согласно этому методу, экстракт I обрабатывают антисывороткой или моноклональными антителами для истоще- | ния (устранения) конкретной специфичности; истощенный таким образом | экстракт тестируют на наличие другой специфичности. Если после устранения | первой специфичности вторая остается, она, очевидно, расположена на другой г молекуле; наоборот, если вторая специфичность также исчезает, следует еде- ? лать вывод, что обе специфичности локализованы на одной и той же молекуле. % Эксперименты такого рода показали, что детерминируемые в конкретном локу- | се специфичности TL находятся на одной молекуле, т.е. на антигенах TL можно | выявить множественные эпитопы. [
