Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Дэвид Г. -> "Иммунология. Том 2" -> 46

Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.

Дэвид Г., Томас Дж. Иммунология. Том 2 — М.: Мир, 1987. — 456 c.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка): immunologiyat21988.djvu
Предыдущая << 1 .. 40 41 42 43 44 45 < 46 > 47 48 49 50 51 52 .. 283 >> Следующая

14.2.3. Антигены класса I мыши [2, 6, 12]
Изучению структуры мышиных антигенов класса I в большой степени способствовала возможность получения аллоантисывороток против частных специфичностей этих антигенов. Наличие таких антисывороток давало возможность, вводя радиоактивную метку в линии клеток или в культивируемые клетки селезенки, получать из клеточных лизатов путем одно- или двухэтапной процедуры белковые молекулы определенной антигенной специфичности. Такие методы специфической иммунопреципитации использовались в ранних исследованиях, в которых сравнение различных антигенов класса I проводилось методом пептидных карт [76]. В этих работах впервые были выявлены большие структурные различия как между продуктами разных аллелей Н-2, так и между продуктами разных сцепленных локусов. Эти наблюдения расширили представления о полиморфизме в данной системе, поскольку оказалось, что речь идет не только о наличии большого числа различных аллельных продуктов, но и о значительных структурных различиях между ними.
Антиген Н-2КЬ, определяемый антисывороткой Н-2.33, стал первым антигеном класса I мыши, структура которого была полностью расшифрована. Хотя определение структуры было проведено радиохимическими методами, положение и выделение пептидов включало в себя стандартные технологические приемы химии белка. На рис. 14.4 представлены первичные структуры Кь и р2т мыши. Отметим, что тяжелая цепь строится из трех доменов, расположенных на наружной стороне плазматической мембраны, и четвертого домена, проходящего сквозь цитоплазматическую мембрану и включающего в себя цитоплазматический участок значительных размеров.
Внеклеточные домены представляют собой три отрезка цепи одинаковой длины. Их последовательность можно сравнивать, зная расположение двух углеводных остатков в доменах N и С1. В доменах С1 и С2 имеются образованные дисульфидными мостиками петли, аналогичные петлям в цепях HLA. Наличие углеводного остатка в домене G1 является характерным отличием мышиной молекулы от молекул человека. Следует отметить, что некоторые цепи класса I у мыши имеют третий углеводный остаток; наличие не менее двух углеводных остатков присуще всем этим цепям. В пользу постулированного разделения, цепей класса I на домены свидетельствует тот факт, что папаин расщепляет нативную молекулу в двух точках: в основном расщепление происходит на границе между С2 и трансмембранным участком молекулы; «минорная» точка расщепления расположена между доменами С1 и С2. Трансмембранная область образована гидрофобными остатками, она заканчивается последовательностью из пяти остатков, три из которых — остатки аргинина и один — лизина. Предполагают, что эта сильно заряженная последовательность служит для пространственной фиксации трансмембранного участка и предотвращает «скольжение» молекулы сквозь толщу клеточной мембраны. У других мембранных белков, таких, как гликофорин и цитохром Ь6, гидрофобные последовательности также заканчиваются «щелочными» остатками. Остальная часть молекулы, вплоть до С-конца, состоит из сравнительно гидрофильной последовательности, которая, по-видимому, располагается на цитоплазматической (внутренней) стороне мембраны и может взаимодействовать с внутриклеточными компонентами.
14.2.3.1. Сравнение структур класса I мыши
К настоящему времени установлена полная первичная структура некоторых антигенов класса I мыши; кроме того, получено много данных о структуре целого ряда других белков этого класса. В одних случаях последовательности были определены в результате непосредственного анализа белков, в других — косвенным путем, по данным секвенирования соответствующих клонов ДНК.
В табл. 14.2, представлены первичные структуры молекул Н-2КЬ, H-2Ld и HLA-B7. Структура Ld была определена сразу двумя путями — в результате секвенирования белка и на основе секвенирования ДНК. Если сравнивать цепи по гомологии доменов, наибольшая степень идентичности как между двумя разными продуктами мыши, так и между белками мыши и человека характерна для третьего внеклеточного домена, а наименьшая степень гомологии — для трансмембранного участка. Заметим, что две мышиные цепи, изображенные в таблице, отличаются друг от друга по длине (на 9 остатков с С-конца); кроме того, цепь Ld имеет делецию остатка метионина в положении 309. При сравнении цепей HLA-B7 и Н-2КЬ выявляется 43% гомологии по остаткам, доступным для сравнения при сегодняшнем уровне знаний. Следует, однако, отметить, что полная («перекрывающая» неизвестные участки) последовательность этого участка в случае белков человека до сих пор не установлена. Любая ошибка в оценке длины молекулы может сильно повлиять на определение степени гомологии. За исключением С-концевого участка, общий характер выявляемых различий между цепями человека и мыши указывает на тесную гомологию между этими антигенами класса I. Различия по большей части рассредоточены по всей цепи, и различающиеся кластеры остатков сконцентрированы главным образом в N-концевой области.
В табл. 14.3 приведены N-концевые последовательности (каждая длиной
Предыдущая << 1 .. 40 41 42 43 44 45 < 46 > 47 48 49 50 51 52 .. 283 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed