Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
щих только фактор роста В-клеток, IL-2 или фактор дифференцировки В-клеток, было обнаружено, что IL-2 не нужен ни для пролиферации В-клеток, ни для их дифференцировки в АОК [73]. Кроме того, абсорбция IL-2 активированными Т-клетками никак не сказывалась на пролиферации В-клеток, в то время как истощение супернатантов активированными анти-ц В-лимфоцитами приводило к исчезновению активности фактора роста В-клеток при сохранении активности фактора роста Т-клеток. Таким образом, было показано, что фактор роста В-клеток и IL-2 представляют собой разные структуры. Помимо этого была продемонстрирована абсорбция фактора роста В-клеток активированными В-лимфоцитами — факт, подтверждающий, что взаимодействие лимфокинов с клетками опосредуется высокоаффинными центрами связывания, которые отличаются очень высокой специфичностью по отношению к определенному лим-фокину. Рассмотренные данные в сочетании с данными о том, что IL-2 проявляет активность в очень низких концентрациях, объясняют полученные ранее результаты, согласно которым IL-2 необходим для развития В-клеточного ответа: IL-2 вызывает рост клонов оставшихся в В-клеточной популяции Т-лимфоцитов, а те в свою очередь способствуют образованию АОК путем секреции лимфокинов, специфичных к В-клеткам.
Клетки-продуценты фактора роста В-клеток не идентифицированы достоверно, хотя секреция фактора роста В-клеток тимусными лейкемическими клетками мыши [67], Т-клеточными гибридомами человека [73] и клонированными IL-2-зависимыми Т-клетками человека [74] служит веским доводом в пользу его Т-клеточного происхождения. Биохимическое изучение этого фактора еще только началось, но уже первые результаты показали заметное сходство в свойствах человеческого фактора роста В-клеток и IL-2 [74]. По данным гель-фильтрации оба лимфокина имеют мол. массу около 20 к Да. Кроме того, эти две активности не удается разделить хроматофокусированием. Подобное сходство говорит о том, что можно ожидать аминокислотной гомологии между этими двумя ростовыми факторами человека. Напротив, по данным Ховард и др. [67], мышиный фактор роста В-клеток удается отделить от IL-2 гель-фильтрацией: кажущаяся мол. масса фактора роста составляет 16,5—18,5, a IL-2 — 30—35кДа.
Недавно Йошидзаки и др. [74], а также Окада и др. [73] опубликовали данные о существовании двух различных факторов роста В-клеток у человека. Один из них, продуцируемый нормальными клонированными IL-2-зависимыми Т-клетками, по результатам гель-фильтрации имеет мол. массу 50 к Да. При рехроматографии в присутствии 4М мочевины мол. масса уменьшается до 19 кДа. Нормальные периферические мононуклеарные клетки крови при стимуляции ФГА и ФМА секретируют ту же самую молекулу с мол. массой 50 кДа, а также другой лимфокин, который элюируется в объеме, соответствующем
17 кДа. По-видимому, больший интерес, чем гетерогенность по размеру молекулы, представляет тот факт, что действие двух этих факторов на рост В-клеток синергично. Возможно, данное наблюдение поможет объяснить затруднения, с которыми столкнулось большинство исследователей при попытке поддержать длительный рост В-лимфоцитов. Поэтому дальнейшие работы, направленные на изучение молекулярных свойств В-клеточных факторов роста, механизма их взаимодействия с активированными В-клетками и механизмов, обеспечивающих митоз В-лимфоцитов, открывают возможность широкого изучения и применения антиген-специфических клонов нормальных В-клеток. Такие клетки будут очень полезным инструментом, облегчающим получение гибридом, а также будут использоваться в качестве клеток-мишеней для дальнейшего изучения регуляции и дифференцировки В-лимфоцитов на клеточном, молекулярном и генетическом уровнях.
21.2.3. В-клеточные факторы дифференцировки
С момента обнаружения в 1972 г. Шимпл и Беккером [56] «поздно действующего» ТЗФ считалось, что конечный этап дифференцировки пролиферирующих В-бластов в иммуноглобулин-секретирующие плазматические клетки протекает под воздействием продуцируемого Т-клетками лимфокина(ов). Однако исследование молекулярных характеристик ТЗФ и механизма его действия на пролиферирующие В-клетки развивались медленно. Заметный интерес к роли лимфокинов в дифференцировке В-лимфоцитов возник в последние годы. Возможность исследования этих молекул была обусловлена появлением более совершенных методов культивирования клеток, успехами в изучении генетических основ образования иммуноглобулинов и перегруппировки генов их тяжелых цепей и, наконец, правильной оценкой полученных ранее данных, в свое время неправильно интерпретированных из-за загрязнения культур Т-клетками.
Поскольку зрелые В-лимфоциты экспрессируют мембранный IgM, очевидно, что перегруппировка генов, необходимая для транскрипции и трансляции мембрано-связанной формы ji-цепей и легких цепей, уже произошла. Если справедливо предположение о том, что активация В-клеток обусловлена связыванием антигена с антигенсвязывающими участками мембранного IgM, и если активация приводит к экспрессии рецепторов фактора роста В-клеток, тогда ТЗФ или В-клеточные факторы дифференцировки должны контролировать процессы, которые в конце концов приводят к морфологическим изменениям, характерным для плазматических клеток, переключению биосинтеза с мембранной формы [i-цепи на секреторную форму и последующему переключению на биосинтез других классов и подклассов тяжелых цепей. Пока получены только предварительные данные, но похоже, что все эти процессы регулируются семейством близких по свойствам, но все-таки различных факторов дифференцировки В-клеток (ФДВК, BCDF). 1
