Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
неагрегированной толерогенной фракции. Некоторые исследователи показали, что можно получить толерогенный препарат, удалив с помощью «биологической фильтрации» in vitro иммуногенный материал из образца антигена [78]. В случае разных линий эффективность «биологической фильтрации» in vitro различна. Таким образом, ясно, что удаление агрегированного материала из препарата антигена с помощью ультрацентрифугирования наиболее просто и практически доступно для получения высокотолерогенного материала. Не следует, однако, забывать, что препарат агрегированного антигена также может в некоторых случаях вызывать ареактивность под действием, возможно, других механизмов [79—80]. Кроме того, из правила «медленно фагоцитируемая фракция — лучший толероген» есть исключения. Малые количества пневмококкового полисахарида, все еще выявляющиеся в крови мыши через несколько недель после введения антигена, неотличимы от исходного антигенного препарата по способности вызывать иммунитет и толерантность [81].
Существует общая закономерность: уменьшение молекулярной массы антигена при сохранении антигенной специфичности приводит к снижению его способности индуцировать иммунный ответ и повышает его толерогенную активность. Полимеризованный флагеллин (10* кДа), мономерный флагеллин (40 кДа) и фрагмент А мономера флагеллина (18 кДа) представляют собой серию из трех компонентов, очевидно содержащих идентичные антигенные детерминанты. По мере уменьшения молекулярной массы наблюдается ослабление им-муногенных и усиление толерогенных свойств [82—$51. Влияние уменьшения длины полимерных молекул исследовано в случае левана [86, 87], полисахарида пневмококка типа III [88] и поливинилпирролидона [89]. В каждом случае иммуногенность падала с уменьшением молекулярной массы. При значениях меньше 10 кДа соединения переставали проявлять иммуногенные свойства. Низкомолекулярные неиммуногенные препараты левана и поливинилпирролидона сохраняли способность легко индуцировать толерантность. Напротив, уменьшение молекулярной массы SIII путем деградации приводило одновременно к потере и толерогенности, и иммуногенности. Это различие, вероятно, связано с различиями в механизмах индукции толерантности под действием данных антигенов.
Что касается минимальных размеров антигена, способного индуцировать толерантность, то Морено и Хэйл [87] установили, что способность линейного фруктозана ({32 —6) индуцировать толерантность теряется в интервале мол. массы 5000—1500. Химически инертные гаптены обычно неэффективны в качестве индукторов толерантности in vivo [30, 90], тем не менее существует предположение о возможности индуцировать толерантность такими гаптенами [91— 94]. Например, при введении новорожденным или взрослым морским свинкам моновалентного конъюгата азобензиларсоната с N-ацетилтирозином подавляется развитие гиперчувствительности замедленного типа, возникающей после введения поливалентного азобензилнарсоната, сшитого с политирозином в полном адъюванте Фрейнда (ПАФ). Аналогично толерантность к NNP может быть вызвана введением неактивного гаптена NNP, связанного с е-амино-м-капро-новой кислотой (ЕАКК). Интересно отметить, что, хотя мыши, получившие NNP — ЕАКК, и оказываются ареактивными, при разрешающем введении им NNP-лошадиных эритроцитов in vivo их спленоциты in vitro дают нормальный иммунный ответ. Создается впечатление, что состояние ареактивности легкообратимо. Следует отметить, что, когда толерантность индуцируется химически активной формой того же гаптена (NNP-азид), клетки селезенки остаются ареактивными in vitro что указывает на различия в механизмах этого явления. Таким образом, в некоторых исключительных случаях состояние ареактивности
может быть индуцировано низкомолекулярным моновалентным гаптеном, хотя и не известно, остается ли гаптен в моновалентном состоянии in vivo.
Было продемонстрировано решающее значение плотности эпитопов для способности Т-независимых антигенов индуцировать толерантность. Как правило, увеличение плотности эпитопов повышает толерогенность препарата антигена и в некоторых случаях уменьшает его иммуногенность. В случае использования конъюгатов пороговое значение плотности эпитопов для индукции толерантности выше, чем для стимуляции иммунного ответа. Можно получить конъюгаты с низкой плотностью эпитопов, обладающие исключительно имму-ногенными свойствами и не способные индуцировать толерантность. С другой стороны, некоторые очень высокозамещенные препараты оказались облигатными толерогенами, не способными индуцировать иммунный ответ. Сходные результаты были получены in vivo и in vitro с конъюгатами полимеризованного фла-геллина, левана, линейного декстрана В512, разветвленного декстрана В1299, SIII и D-CL [95—102].
Было показано, что химическая модификация некоторых антигенов изменяет их иммуногенность и толерогенность —- часто в противоположную сторону. Например, ацетоацетилирование мономера флагеллина уменьшает его иммуногенность для крыс, несмотря на то что препарат все еще сохраняет способность связывать антитела с нормальной аффинностью и остается толерогенным [103]. Денатурация мочевиной овальбумина (ОВА) и антигена Е амброзии приводит к утрате основных антигенных детерминант, взаимодействующих с В-клетками, о чем свидетельствует потеря способности реагировать с сывороточными антителами к соответствующим нативным белкам [104—105]. Тем не менее модифицированные антигены способны активировать хелперные Т-клетки, требующиеся для антительного ответа на нативный антиген, а также индуцировать толерантность у мышей, примированных нативным антигеном. Денатурированный мочевиной антиген подавляет IgE-ответ более эффективно, чем нативный антиген. Аналогичным образом ацетоацетилированный ОВА способен индуцировать специфическое подавление IgE-ответа на ОВА [106].
