Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
13.4.3. Локусы класса II
13.4.3.1. Компоненты
Локусы класса II обнаружены лишь в двух /-областях, А и Е. Продукты этих локусов у мышей называются антигенами 1а. Название 1а отражает тот факт, что гены, кодирующие эти антигены, картированы в одной области с генами /г (отсюда Ir-associated или 1а-антигены) [42]. В настоящее время ясно, что эти антигены имеют много других одинаковых свойств; в то же время в области есть другие локусы, не кодирующие молекулы класса II. Поэтому применительно к мышам термин «антигены 1а» стал синонимом понятия «продукты локусов класса II», и мы будем использовать оба этих термина как равнозначные.
13.4.3.2. Химическое строение
Каждая молекула 1а состоит из двух нековалентно связанных гликопротеинов. Более тяжелая цепь (альфа-цепь) имеет мол. массу около 35 ООО Да, а более легкая (бета-цепь) — около 28 ООО Да. В отличие от ситуации с антигенами класса I, где только тяжелая цепь кодируется генами МНС, обе цепи класса II кодируются в областях I. Антигенные специфичности, картированные в области А, называют антигенами I-А, а картированные в области Е — антигенами I-Е. Однако недавно выяснилось^ что бета-цепи обоих антигенов кодируются в области А, в то время как альфа-цепи кодируются в областях, имеющих соответствующие буквенные обозначения [43, 44]. Такая ситуация изображена на рис. 13.10. Кроме того, полиморфизм альфа-цепей, по-видимому, крайне ограничен; в то же время бета-цепи очень полиморфны, так что алло-антигенные специфичности определяются, вероятно, в основном бета-цепями.
Положение еще больше осложняется тем обстоятельством, что не все гаплотипы Н-2 экспрессируют антигены области Е [43, 45]. Например, антигены Е не определяются в гаплотипах Н-2Ь, H-2su H-2q. Тем не менее у гибридов Fx, полученных скрещиванием этих гаплотипов с экспрессирующими гаплотипами, наблюдается экспрессия новых, гибридных антигенных специфичностей, включающих компонент от неэкспрессирующих родителей. Исходя из этого, можно предположить, что неэкспрессирующие гаплотипы имеют ген Е$ в области А, но экспрессия соответствующих антигенов не происходит потому, что эти гаплотипы не способны продуцировать молекулы Еа. Таким образом признак,
(Разведение антител?
Рис. 13.10. Формирование молекул класса 11 путем альфа-бета-комплементации.
Как показано на рисунке, в !результате образования связей между альфа- и бета-цепями разных гаплотипов у животных F: могут экспрессироваться гибридные молекулы, не имеющиеся ни у одного из родителей (продукты траке-комплементации) Это явление легче всего обнаружить в случае антигенов I-Е; некоторые гаплотипы, как, например, Н-2Ь, вообще не экспрессируют I-Е, поскольку не происходит образования альфа-цепи. Поэтому животные Fj, у которых может происходить транс-комплементация, экспрессируют полный набор детерминант I-Е, закодированных в ¦ соответствующей бета-цепи.
Рис. 13.11. Пример выявления траис-комплементации с помощью моноклональных антител 17-3-3S. Эти антитела выявляют специфичность 1а.22, являющуюся продуктом т р акс-комп лементации бета-цепи гаплотипа Н-2Ь и альфа-цепи гаплотипа H-2d I - В6, II - (В6 X X DBA/2) Flt III — DBA/2. Знак 4, соответствует А-ТН-анти-А-TL, знак • — 17-3-3. ([47]; печатается с разрешения.)
детерминируемый в области Е, представляет собой экспрессию (или отсутствие экспрессии) молекул I-Е в зависимости от образования (или нарушения образования) ос-цепи. Феномен экспрессии «новых» антигенов у гибридов получил название транскомплементации [46, 47]; пример транскомплементации в случае гетерозиготы Н-2а X Н-2Ь приведен на рис. 13.10. Пример выявления транскомплементации в цитотоксическом тесте проиллюстрирован на рис. 13.11.
13.4.3.3. Распределение по тканям
В отличие от кодируемых в областях К и D антигенов класса I, которые представлены практически во всех тканях, антигены 1а имеют более ограниченное распределение. В периферических лимфоидных тканях, которые в целом
являются самым богатым источником антигенов МНС, антигены 1а экспрессируются главным образом на В-клетках и некоторых макрофагах. Такое ограниченное распределение, видимо, объясняет, почему антигены 1э не были обнаружены с помощью анти-Н-2-сывороток в ранних исследованиях серологии Н-2. Пример цитотоксического теста, выявляющего в аллоиммунной сыворотке антитела против Н-2К и 1а, представлен на рис. 13.12. В то время как антитела против Н-2 убивают практически все лимфоидные клетки-мишени, антитела
Рис. 13.12. Определение цитотоксиче-ской активности аллоиммунной сыворотки в тесте комплементзависимой цитотоксичн ости.
Мишени — клетки селезенки. Тестируемая сыворотка (B10.A-aHTH-B10.D2) выявляет на мишенях B10.D2 как антигены Н-2, так и антигены 1а; на мишенях С57В1/10 сыворотка выявляет лишь антигены la. I — B10.D2, II — C57Bl/10Sn.
j______I____I_____I____I_____I_____I____I I
2 4 8 16 32 64 128 256 512
(Разведение антисыворотки)
против 1а убивают в основном В-клетки; в результате в кривой цитотоксичности появляется плато неполного лизиса мишеней. В этом конкретном опыте-была использована популяция клеток селезенки, где В-клетки составляют 50% всех лимфоидных клеток. Если в качестве мишеней использовать лимфоциты периферической крови или клетки лимфатических узлов, плато кривой цитотоксичности будет располагаться на более низком уровне — соответственно около 25 и 15%. В ранних работах по анализу цитотоксических антител такие реакции неполного лизиса наблюдались часто, но их объясняли «слабой перекрестной реактивностью» или вообще игнорировали. Поскольку антигены 1а не экспрессировались на эритроцитах, они не обнаруживались при серологическом типировании в реакции гемагглютинации. Лишь в результате анализа соответствующих рекомбинантных линий, когда удалось картировать ответственные за неполный лизис антигены в области I, стало ясно, что реакции, неполного лизиса отражают существование отдельной группы антигенов клеточной поверхности.
