Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
Вслед за стадией пре-В-клеток, но до наступления полной зрелости, В-клетки проходят через стадию развития, в течение которой они бывают восприимчивы к антигенной или митогенной стимуляции, но при этом не способны, видимо, давать клоны, плюрипотентные в плане экспрессии изотипов. Такие незрелые В-клетки при стимуляции в культуре фрагментов могут образовать IgM и (или) IgA, но не могут продуцировать ни один из подклассов IgG [12]. Хотя приобретение клетками способности синтезировать IgM на очень ранних стадиях развития не вызывает удивления, кажется парадоксальным, что они могут продуцировать IgA, кодируемый самым дистальным локусом тяжелой цепи, раньше, чем все другие классы Ig. Тем не менее неспособность таких клеток давать IgG-ответ говорит о связи по крайней мере некоторых аспектов экспрессии и переключения изотипов со стадией развития В-клеток. Очень интересно, что В-клетки не в состоянии синтезировать IgG в тот период своего развития, когда они наиболее подвержены индукции толерантности [17] (см. гл. 20). Имеется ли связь между приобретением способности синтезировать IgG и возникновением устойчивости к индукции толерантности, пока еще неизвестно. Стимуляция соответствующим антигеном, особенно при наличии помощи со стороны Т-клеток, приводит не только к появлению клеток, продуцирующих антитела, но и к образованию новых популяций предшественников, которые по ряду признаков можно отнести ко вторичным В-клеткам [10] (см. гл. 3).
Вторичные В-клетки, как и незрелые В-клетки, могут обладать более ограниченным изотипным потенциалом, чем подавляющее большинство первичных В-клеток [12]. Например, в то время как некоторые вторичные В-клетки экспрессируют поверхностные IgM и, несомненно, могут давать начало клонам, продуцирующим антитела любого изотипа, остальные, очевидно, потеряли способность к образованию IgM или других изотипов. Любопытно, что изотипный потенциал вторичных клеток может быть связан с изотипом их мембранных рецепторов; этому вопросу посвящен следующий раздел данной главы.
19.4.2. Связь образования изотипов с экспрессией поверхностных Ig
С увеличением количества данных, подтверждающих гетерогенность В-клеток, становится очевидным, что разделение пула В-клеток на субпопуляции поможет изучить потенциальную способность В-клеток к синтезу различных классов Ig. Один из подходов, примененный несколькими исследователями, сводится к разделению В-клеток в зависимости от изотипа поверхностных Ig (s-Ig, nig). Результаты работ с использованием положительной и отрицательной селекции достоверно показали, что экспрессирующие s-IgM или s-IgD непростимулированные В-клетки, составляющие большинство В-клеточного пула, дают в системе адоптивного переноса IgM-ответ, за которым следует IgG-ответ. С другой стороны, s-IgG+-^eTKH давали в первую очередь IgG-ответ (см. обзор [18]).
Поскольку в приведенных исследованиях использовали систему адоптивного переноса, а не клонированные В-клетки, трудно было учесть роль таких факторов, как регуляция активации В-клеток in vivo (отрицательная обратная связь у клеток s-IgG+ и s-IgM+ или различная способность к пролиферации у разных подгрупп В-клеток). Поэтому, а также для того, чтобы выявить все минорные популяции клеток (что очень важно, так как на долю клеток, четко коммити-рованных к какому-либо изотипу, приходится 5% В-клеточного пула), аналогичные эксперименты были проведены с использованием фрагментов селезенки для получения клонов, секретирующих антитела [12]. Полученные результаты
Таблица 19.1. Соотношение клонов из подгрупп В-клеток, секретирующих определенные изотипы *) (по [12])
Подгруппа В-клегок Приблизи- % клонов, секретирующих
тельный
ответ от IgM IgG3 IgGl IgG2b IgG2a IgE IgA
общего, %
Первичные В-клетки
Нефракционированные 100 41 6 53 18 4 0 88
s-n+ 88,7 31 8 69 23 8 0 77
S-JA- 11,3 69 8 8 8 0 0 77
В-клетки памяти
Нефракционированные 100 33 24 96 41 33 22 63
S-(i+ 56,7 25 3 88 16 38 3 38
s-fi-?- 12,5 50 0 50 0 0 0 50
s-(i_Y+ 30,5 4 4 83 13 30 17 48
1) Клоны, полученные из различных фракционированных субпопуляций клеток селезенки, были проанализированы на наличие изотипа(ов) с помощью соответствующей сыворотки против тяжелых цепей.
говорят о том, что почти 90% от общего клонального ответа первичных В-клеток может быть отнесено за счет В-клеток s-fi+ (табл. 19.1). 60% этих стимулированных антигеном клеток s-fi+ дают клоны, секретирующие один или более подклассов Ig. Более чем основная часть первичных В-клеток секретировала более одного изотипа, причем значительная их часть — 3, 4, 5 различных изотипов (табл. 19.2). Эти данные подтверждают то, что образование IgG —
