Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
Основная проблема, которую следует здесь рассмотреть, заключается в том, как антиген-специфические хелперные Т-клетки запускаются антигеном в сочетании с молекулой 1а. Хотя процесс дифференцировки Т-клеток, в результате которого формируется репертуар Т-клеточного распознавания, в настоящее время неясен, тем не менее известно, что Т-клетки, активные в отношении антигена в сочетании с собственными молекулами 1а, присутствуют в периферической популяции Т-лимфоцитов. Эрб и Фельдман [87], а также Эрб и др. [88] исследовали процесс взаимодействий макрофаг— Т-клетка в ходе генерации специфических хелперных Т-лимфоцитов. Они обнаружили, что макрофаги, инкубированные с антигеном, высвобождают растворимый фактор, названный GRF (от англ. genetically related factor), который индуцирует хелперные Т-клетки в отсутствие макрофагов. Активность GRF генетически рестрАктирована таким образом, что Т-хелперы индуцируются лишь при условии, что GRF получен от макрофагов, которые по субобласти I-А идентичны отвечающим Т-клеткам. Было показано, что GRF представляет собой родственную 1а-анти-гену молекулу макрофагального происхождения, нековалентно связанную с иммуногенным фрагментом антигена, и имеет мол. массу 55 000± 3000 Да. Однако в отношении GRF еще много неясности: не выяснены природа 1а-детер-минант, число цепей, способ ассоциации антигенного фрагмента и молекул 1а, структура антигенного фрагмента, ассоциированного с GRF.
В пользу предположения об индукции Т-хелперов под действием GRF свидетельствует следующее наблюдение. Клетки антиген-специфической Т-хелперной гибридомы, полученной Лонаи и др. [89], могут связывать антиген только в присутствии супернатанта культуры макрофагов. Лонаи и др. постулировали, что для связывания антигена с антигенсвязывающим рецептором Т-клеток необходима ассоциация антигена и молекулы 1а макрофагов, сходная с той, которую предложили Эрб и Фельдман. Поскольку природа антиген-специ-фического рецептора Т-хелперов неизвестна, запускающий Т-клетку сигнал, который передается ассоциированным с макрофагами антигеном, предстоит еще исследовать.
Кроме GRF существует ряд других неспецифических факторов макрофагального происхождения, влияющих на активацию Т-клеток. IL-1, ранее называемый «фактором, активирующим Т-лимфоциты» (TAF), является одним из факторов, стимулирующим активацию Т-хелперов [90]. Кроме того, активированные Т-клетки продуцируют факторы, которые в свою очередь помогают пролиферации, дифференцировке и созреванию других Т-клеток (IL-2). В дополнение к анализу сложной системы факторов, управляющих генерацией Т-хелперов, читателям следует учесть и влияние генов Ir на генерацию хелперных Т-лимфо-цитов (см. гл. 16).
18.5. Частота предшественников хелперных Т-лимфоцитов
Анализ методом лимитирующих разведений дает важную информацию о качестве и количестве хелперных Т-клеток, активированных в различных условиях; он позволяет не только оценить приблизительную частоту клеток-
предшественников, которые под действием различных стимулов дифференцируются в хелперные Т-клетки, но также и проанализировать разные типы хелперных Т-клеток на уровне одной клетки. Например, Мэррак и Капплер [38] исследовали методом лимитирующих разведений гетерогенность KLH-специфических Т-хелперов. Примированные KLH Т-клетки культивировали в условиях предельных разведений с избытком В-лимфоцитов, примированных БЭ или ТНФ-БСА. Смесь клеток стимулировали ТИФ-KLH (для индукции когнатной помощи) и БЭ, чтобы оценить поликлональный хелперный эффект, вызванный посторонними БЭ-специфическими В-лимфоцитами. Культуры оценивались как положительные или отрицательные в зависимости от их ответа на БЭ или ТНФ.
Рис. 18.5. Анализ методом лимитирующих разведений частоты специфичных к KLH CThl и CTh2, участвующих в хелперных взаимодействиях при антительном ответе на ТНФ-GLH и БЭ [38].
С увеличением числа добавленных Т-клеток, примированных KLH, число культур, неспособных к ответу, уменьшалось. С помощью статистического анализа линейной зависимости числа неспособных к ответу культур от числа добавленных KLH-специфических Т-клеток (оба значения выражены как logio) можно рассчитать частоты Т-хелперов для ТНФ-специфических В-лимфо-цитов (при когнатной помощи) и для БЭ-специфических В-лимфоцитов (при неспецифической помощи) (рис. 18.5). В результате такого анализа были сделаны два вывода. Во-первых, они установили, что примированные клетки селезенки содержат Т-хелперы, способные в присутствии KLH стимулировать ответ В-лимфоцитов и на ТИФ-KLH, и на БЭ, и б) во-вторых, с помощью метода предельных разведений они показали, что KLH-специфические хелперные Т-клетки, способные кооперировать с В-лимфоцитами в ответе на ТИФ-KLH (CThl), отличаются от KLH-специфических Т-клеток, способных кооперировать с В-лимфоцитами при ответе на БЭ (CTh2). Оценка частоты KLH-специфических CThl, которые помогают В-лимфоцитам отвечать на ТИФ-KLH, дала 7—15 клеток на 106 Т-клеток, примированных KLH. С другой стороны, частота KLH-специфических Т-клеток, кооперирующих в присутствии KLH с В-лимфоцита-дш, специфичными к постороннему антигену БЭ, составила от 12 до 29 на 10° Т-клеток, примированных KLH. Мэррак и Капплер [38] установили, что частота KLH-специфических CTh2 почти всегда была выше частоты Т-клеток (CThl), способных кооперировать с В-лимфоцитами при ответе на ТИФ-KLH.
