Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
Критическая проверка концепции МНС-рестрикции проводилась во многих лабораториях. Для устранения проблемы аллогенного эффекта использовалось несколько методов, с помощью которых можно предотвратить развитие аллореактивных клеток или удалить уже имеющиеся. Один из подходов заключается в следующем. Получают костномозговые химеры при введении летально облученным гибридам FX(A X В) стволовых клеток костного мозга линии с генотипом А или В [А или В Fj (А X В) химеры] или смеси клеток с генотипом А и В [(А + В) Fx (А X В)]. Исследовалась способность селезеночных Т-лимфоцитов таких химер взаимодействовать с В-клетками каждый из родительских линий и индуцировать антительный ответ. Дифференцировка стволовых клеток линии А или В в химерном микроокружении делает эти клетки взаимно толерантными. После обработки селезеночных клеток химер антисывороткой против антигенов динии А или В и комплементом определялась способность оставшихся Т-лимфоцитов генотипа В или А взаимодействовать с В-лимфоцитами второй линии, несовместимой по Н-2. Результаты, полученные в разных лабораториях, указывали, что химерные Т-клетки типа А, дифференцирующиеся в реципиенте Flt могут одинаково хорошо взаимодействовать с В-лимфоцитами линий А и В [61—65]. То же самое справедливо и в отношении Т-клеток типа В, дифференцирующихся в микроокружении Fx (А X В). Это свидетельствует о том, что специфичность рестрикции формируется во время антиген-независимой дифференцировки Т-клеток в Fj-микроокру-
Сходные результаты получены в экспериментах с аллофенными (allo-phenic — от allogenic phenotype) мышами (агрегационными химерами) [66, 671. Эти мыши были получены в результате слияния in vitro эмбрионов мышей двух различных линий на стадии 8 бластомеров и последующего созревания в матке самки любой из родительских линий. Мыши, полученные таким способом, являются естественными химерами двух различных линий, в которых Т- и В-лимфо-циты обеих линий являются взаимно толерантными. Было четко показано, что несовместимые по локусу Н-2 Т- и В-лимфоциты таких аллофенных химер могут взаимодействовать даже в том случае, когда Т-клетки происходят от линий с низкой иммунореактивностью [66]. Таким образом, возникло предположение, что истинной генетической рестрикции нет, а существует лишь проявление эффектов, возникающих при смешивании аллогенных клеток, которые могут быть устранены при взаимной толерантности Т- и В-лимфоцитов.
Основываясь на данных о способности Т-клеток костномозговых химер кооперировать с В-лимфоцитами каждой из родительских линий, когда Т-клетки толерантны к МНС второй линии, Спрент и фон Бёмер [68] получили хелперные Т-клетки от летально облученных мышей FX(A X В), которым вводили иммунные к БЭ клетки лимфоузлов родительской линии А или В. Такие хелперные Т-клетки, прошедшие «фильтрацию» в реципиенте Flt в основном лишены аллореактивных клеток, которые специфичны к гаплотипу МНС другой родительской линии и могут вызывать отрицательный аллогенный эффект. Клетки, прошедшие фильтрацию, переносили другим облученным реципиентам Fx вместе с сингенными, семиаллогенными (Fx) и полностью аллогенными В-лимфоцитами другой родительской линии, а затем определяли способность этих клеток давать вторичный ответ на БЭ. В отличие от Т-клеток химер такие селектированные клетки были способны взаимодействовать с сингенными и В-клет-ками Fx, но не с полностью аллогенными В-лимфоцитами другой родительской линии. Отсюда был сделан вывод, что удаления аллореактивных клеток недостаточно для кооперации аллогенных Т- и В-лимфоцитов. Чем объясняется такое расхождение результатов, полученных с Т-клетками химерных животных и «профильтрованными» Т-клетками, до конца еще не установлено. Предполагается, что генетическая рестрикция определяется первичной иммунизацией Т-клеток, поскольку Т-клетки активируются антигеном в контексте с молекулами МНС антиген-презентирующей клетки. Поскольку прошедшие фильтрацию Т-клетки были активированы в сингенном реципиенте до индукции толерантности к аллоантигенам, они приобрели специфичность рестрикции по сингенным молекулам МНС. В дальнейшем это подтвердили Канцлер и Мэррак [62], показав, что Fj-хелперные Т-клетки, цримированные in vivo введением нагруженных антигеном макрофагов родительской линии, преимущественно кооперировали с В-лимфоцитами той же самой, но не второй родительской линии. Эти результаты указывают, что специфичность рестрикции определяется не только во время антиген-независимого этапа дифференцировки, но также и во время примирования клеток антигеном.
У химер Т-клетки родительской линии А в реципиенте Fx (А X В) узнают антиген в ассоциации с молекулами МНС антиген-презентирующих клеток линий А и В. Следовательно, активируются клоны Т-хелперов, способные кооперировать с В-лимфоцитами гаплотипов и А, и В [69]. Спрент и сотрудники также исследовали влияние продуктов генов Н-2 на функцию хелперных Т-клеток нормальных и химерных мышей, в зависимости от влияния микроокружения в ходе дифференцировки и активации антигеном. Т-клетки нормальных и химерных мышей переносили облученным реципиентам вместе с антигеном (БЭ). Донорские клетки собирали из грудного лимфатического
