Радиоиммунологические методы - Чард Т.
Скачать (прямая ссылка):
2) Система Centria (Union Carbide). В этой системе содержимое каждого реакционного сосуда переносится на отдельную колонку с сефадексом, укрепленную вместе с груп-
пой таких же колонок иа роторе центрифуги. При центрифугировании происходит разделение свободной и связанной фаз по принципу молекулярных сит (см. разд. 5.3.2.); первая выходящая с колонки фракция (комплекс лиганда с антителом) берется затем для измерения радиоактивности.
3) Система Technicon. Эта система основана на принципе непрерывного потока (см. выше) и на использовании иммобилизованных антител, причем в качестве твердой фазы применяются частицы железа, покрытые целлюлозой. После инкубации свободная фракция удаляется промыванием, в процессе которого частицы железа удерживаются магнитным полем. Затем частицы снимаются с магнита и переносятся (опять же по принципу непрерывного потока) в счетчик радиоактивности.
-4) Система ARIA II (Becton Dickinson). Эта система предусматривает применение камеры многократного использова* ния, содержащей иммобилизованные антитела, через которую непрерывно протекает анализируемый образец й другие реагенты. В камере происходит связывание антигена, после чего' осуществляется его элюция и регенерация антитела.
5) Гамма-проточная система (Squibb) (Brooker et al.,-1976). В этой системе используется колонка, заполненная анионообменной смолой (с добавкрй или без добавки акта-. вированного угля), адсорбирующей свободный антигйа» Авд-: лизируемый образец и другие реагенты проходят "через коДшг-ку непрерывным потоком.
6) Micromedic systems «Concept 4 Automatic Radioassay». В этой системе применяются пробирки с покрытой антитела* ми внутренней поверхностью (Johnson et al., 1976).
12.6, Измерение радиоактивиооти
В принципе этот этап осуществляется так же, как в обыч* ных методах определения радиоактивности, описанных в гл. 3. В системе Kemtek 3000 лента с фильтрами протягивается между парами кристаллических детекторов, расположенных друг против друга: всего имеется пять детекторных головок, что позволяет просчитывать одновременно пять точек. В системе Centria три обычные детекторные головки просчитывают одновременно три пробирки. В системе Technicon трубка, через которую непрерывным потоком.проходят магнитные частицы, несущие комплекс антитело — антиген, образует виток в сцинтилляционном кристалле, имеющем форму колодца^; при прохождении через этот виток просчитывается каждый сегмент потока магнитных частиц.
12.7. Раочет результатов
Большинство используемых и разрабатываемых в настоящее время автоматических систем радиоиммунологического анализа имеет встроенное компьютерное устройство типа описанного в разд. 7.3. Использование достаточно сложного компьютера в этих случаях вполне оправдано, поскольку он может выполнять и другие функции, в частности задавать рабочий ритм самому прибору и заменять электронные блоки в детекторной системе.
12.8. Резюме
Методы связывания с использованием полностью автоматизированных систем еще не получили широкого распространения, и пока что трудно предсказать, какая из разрабатываемых в настоящее время систем займет ведущее положение на рынке. Однако все растущее применение радиоиммуноло-гических методов анализа является залогом того, что раньше или позже такие приборы будут применяться очень широко.
Автоматические системы имеют следующие достоинства:
1) большую пропускную способность (20—60образцов в час), значительно снижающую стоимость анализов, поскольку приборы, как правило, обходятся дешевле, чем рабочая сила;
2) более высокую скорость анализа по сравнению с неавтоматическими системами, обусловленную тем, что автоматическое устройство не нуждается в отдыхе, а также возможность использования быстрого метода неравновесного анализа; 3) более высокую точность за счет исключения ошибок, обычно допускаемых оператором (см. разд. 10.2.2.).
В то же время использование автоматических систем связано с рядом недостатков: 1) если прибор загружен не полностью, то его стоимость не окупается его достоинствами; ни одна из описанных выше автоматических систем не может окупить своей стоимости, если в лаборатории анализируется меньше 50—100 образцов в день; 2) если прибор ломается (что время от времени может происходить), то при отсутствии в лаборатории достаточного числа операторов, способных проводить вручную все необходимые анализы, могут возникнуть серьезные трудности. Прежде чем принять решение о приобретении автоматической системы, на которое нередко может оказать влияние модное в настоящее время увлечение аппаратурой, следует тщательно взйесить все перечисленные выше преимущества и недостатки таких систем.
ОРГАНИЗАЦИЯ АНАЛИТИЧЕСКОЙ СЛУЖБЫ
Методы связывания, и в частности радиоиммунологический метод анализа, давно прошли ту стадию, когда их можно было рассматривать в качестве методов, предназначенных только для исследовательских целей. В настоящее время без этих методов не могли бы активно развиваться многие области клинической медицины. Важное значение имеет вопрос о том, как лучше и дешевле организовать обслуживание больных. В связи с этнм последняя глава посвящена проблемам организации аналитической службы, т. е. вопросу о том, кто должен проводить анализы и где они должны проводиться. Центральное место при обсуждении этого вопроса будет отведено радиоиммунологическому методу анализа, однако мы еще раз хотели бы подчеркнуть здесь, что использование изотопной метки не является определяющим признаком методов связывания и использование других, но по существу аналогичных вариантов этого метода ничего не меняет в приведенных ниже рассуждениях.
