Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Чард Т. -> "Радиоиммунологические методы" -> 21

Радиоиммунологические методы - Чард Т.

Чард Т. Радиоиммунологические методы — М.: Мир, 1981. — 248 c.
Скачать (прямая ссылка): radioimunnologicheskiemetodi1981.djvu
Предыдущая << 1 .. 15 16 17 18 19 20 < 21 > 22 23 24 25 26 27 .. 100 >> Следующая

Энергия частиц /амплитуда импульсов)
Рис. 3.2. Энергетические спектры двух радиоактивных иаотопов—А н Б. Если окно счетчика установлено таким образом» что регистрируются только импульсы, энергия которых лежит в интервале между х и у, то будет просчитываться основная часть излучения изотопа А и лишь незначительная часть излучения изотопа В.
максимум которого является специфической характеристикой данного изотопа. Сцинтилляционный счетчик может быть настроен таким образом, чтобы он фиксировал импульсы в узком диапазоне амплитуд, что дает возможность определить данный изотоп путем амплитудного анализа при минимальных помехах, обусловленных влиянием других изотопов или фонового излучения (рис. 3.2).
Тип применяемого сцинтиллятора зависит от характера излучения, которое представляет собой обычно либо р-частицы (в случае таких изотопов, как 3Н или 14С), либо у-лучи (в случае таких изотопов, как 1251 или ,3,1). р-Частицы очень плохо проходят сквозь вещество, в связи с чем их можно обнаружить только в том случае, если изотоп находится в непосредственном контакте со сцинтиллятором. Поэтому изотоп растворяют в растворителе, содержащем ароматическое соединение, обладающее способностью флуоресцировать (т. е. испускать свет) под действием ионизирующей радиации. Наиболее широко в качестве такого соединения используется 2,5-дифенилоксазол (ППО). Эффективность счета жидкого сцинтиллятора может сильно снижаться в присутствии таких веществ, как, напрнмер, белки; это явление известно под названием «гашения». Поэтому в случаях, когда анализируемые при помощи счетчика растворы сильно различаются по составу (например, если стандарты приготовлены на простом буфере, а определяемый образец представляет собой цельную плазму), приходится вводить поправки на гашение. Использование метода жидкостной сцинтилляции для определения радиоактивности подробно обсуждается Фоксом в пятом томе настоящей серии.
В отличие от р-частиц \-лучи обладают высокой проникающей способностью, в связи с чем нет необходимости
в непосредственном контакте между изотопом и сцинтиллятором. В этом случае в качестве сцинтиллятора используют покрытый таллием кристалл иодистого натрия, которому придают обычно форму колодца. Под действием излучения моле' кулы, образующие кристаллическую решетку, подвергаются ионизации, сопровождающейся световой вспышкой, которая фиксируется фотоумножителем. Некоторые у-лучи могут частично поглощаться стеклом, поэтому для определения у-ак-тивных изотопов рекомендуется пользоваться кюветами из пластика.
Определение у-излучения представляет собой значительно более простую и более дешевую операцию, чем определение р-излучения методом жидкостной сцинтилляции. Оно не требует подготовки образцов, что позволяет экономить время и реактивы. Изотопы, излучающие у-лучи, характеризуются значительно более высокой удельной радиоактивностью, чем р-ак-тивные изотопы, что дает возможность сократить время счета или просчитывать за то же время меньшее количество радиоактивной метки. Характеристики р- и у-активных изотопов приведены в табл. 3.1.
Таблица 3.1
Сравнение основных характеристик обычно используемых Y-радиоактивных (1251) и ft-радиоактивных (14С и 3Н) изотопов
Изотоп Период Атомы/Ки Эффектив Число атомов, экви
полураспада ность счета. % валентное одному
определяемому атому
изотопа >251
125 J 60 дней 2,77 • 1017 80 1
UQ 5730 лет 9,65- 1021 85 37 010
Щ 12,26 лет 2,08 • 101» 68 51,в
3.3. Выбор счетчика
В продажу поступает большое число различных счетчиков, предназначенных для измерения радиоактивности методами как жидкостной, так и кристаллической сцинтилляции. На основании фирменных каталогов трудно сделать выбор между приборами, выпускаемыми разными фирмами, и в конечном счете выбор обычно определяется такими факторами, как стоимость и доступность обслуживания специалистами фирмы; последнее обстоятельство имеет большое значение для тех потребителей, которые работают вдали от больших городов. При покупке счетчика желательно продумать следующие вопросы. 1) Какой сцинтилляционный счегчик покупать — жидкостный или кристаллический? Выбор будет зависеть, есте-
ственно, от того, для каких целей он предназначается. Измерение ^-излучения дает целый ряд преимуществ, поэтому во всех случаях, когда это возможно, следует применять изотопы с у_излучением, а изотопы с p-излучением должны использоваться только тогда, когда нет другого выбора. До самого последнего времени для маркировки небольших молекул (например, стероидных гормонов) применяли главным образом р-радиоактивные изотопы, однако в настоящее, время для всех соединений, представляющих интерес с точки зрения биологин и медицины, становятся все более доступными метки с у-излу-чением, и недалек день, когда метод жидкостной сцинтилляции будет редко использоваться в стандартных анализах. 2) Какая смена проб должна быть у счетчика — ручная или автоматическая? Решение этого вопроса определяется компромиссом между количеством анализируемых проб и финансовыми возможностями. Если предполагается, что общее время счета не будет превышать 1 ч в день (например, ежедневно считается 60 проб по 1 мин), тогда можно обойтись без автоматического устройства для смены образцов. При большем количестве анализируемых образцов желательно иметь счетчик с автоматической сменой проб; хотя стоимость такого счетчика будет по меньшей мере в 5 раз выше, чем ручного, тем не менее экономия рабочего времени технического персонала и возможность работать 24 ч в сутки с избытком компенсируют более высокую стоимость счетчика с автоматической сменой проб. 3) Вместимость счетчика. В приборах с автоматической сменой проб одновременно умещается 100— 500 образцов. Счетчики, вмещающие большее число образцов, слишком громоздки, и их имеет смысл приобретать только в тех случаях, если время счета анализируемых проб очень мало. С практической точки зрения немаловажное значение имеет время, которое уходит на смену одной пробы (т. е. интервал между окончанием счета одной пробы и началом счета следующей пробы). Для большей оперативности это время должно быть как можно короче, поскольку от него зависит общее время счета (если, например, считают 500 проб по 10 с каждую, то при затрате 30 с на перемещение каждой пробы общее время счета составит 5,5 ч, а пря затрате 10 с — менее 3 ч). 4) Размер сцинтилляционного кристалла. Кристаллы большинства у-счетчиков имеют форму колодца диаметром 5—8 см. Хотя более крупные кристаллы обеспечивают большую эффективность счета при работе с изотопами, обладающими высокой проникающей способностью, однако они дорого стоят и могут давать высокую величину фона. Для большинства задач, и прежде всего для измерения 1251 (наиболее широко применяемого изотопа), нет надобности в кристалле большего размера. 5) Единичный или множественный детек-
Предыдущая << 1 .. 15 16 17 18 19 20 < 21 > 22 23 24 25 26 27 .. 100 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed