Высшие съедобные базидиомицеты в чистой культуре - Бухало А.С.
ISBN 5-12-000267-6
Скачать (прямая ссылка):
В отдельных экспериментах в конце фазы экспоненциального роста отбиралась половина культуральной жидкости и биомассы, добавлялась свежая питательная среда до исходного объема. Культивирование продолжалось при тех же условиях. В этом случае после добавления свежей среды лаг-фаза полностью отсутствует. В течение 5—6 ч наблюдается экспоненциальный рост со скоростью 0,14 ч"1 (Соломко и др., 1981; Высшие съедобные базидиомицеты ..., 1983). Это максимальная скорость роста, полученная для P.ostreatus 1300 в условиях глубинного культивирования. Независимо от способа подготовки инокулята при выращивании мицелия в ферментере, где обеспечивается более интенсивный массообмен, скорость роста культуры составляет 0,07—0,08 ч"1, что вдвое выше, чем скорость роста этого же штамма в колбах на качалке (табл. 10). Сокращение лаг-фазы и общего времени культивирования имеет большое значение для разработки экономически выгодного процесса, так как позволяет за одно и то же время полуадть больше продукта и уменьшает вероятность загрязнения культуры посторонней микрофлорой. Последнее чрезвычайно важно, особенно в том случае, если мицелий предполагается использовать как источник пищевого белка.
При исследовании P.ostreatus 1300 в глубинной культуре показано, что на качалках и в ферментере мицелий гриба растет в виде шаровидных мицелиальных агломератов. В колбах на качалке, как правило, образуются рыхлые клубочки мицелия, значительно варьирующие в размерах (диаметром 0,1—5 км). 99
С изменением режима перемешивания изменяется и морфология глубинных колоний. При 250 об/мин культура растет в виде пушистых, рыхлых клубочков с длинными миыелиальными тяжами.! При увеличении скорости перемешивания до 500 об/мин наблюдается рост в виде более гладких плотных шариков с короткими гифами на наружной поверхности, пряжки при этом сохраняются.
В процессе культивирования P.ostreatus 1300 как в ферментере, так и на качалке шарики мицелия становятся более гладкими и плотными в период замедления скорости роста, после 5 сут культивирования в колбах на качалке или после 3 сут выращивания в ферментерах. При увеличении времени культивирования наблюдается образование шариков с плотной гладкой поверхностью и пустым центром.
Глубинный мицелий P.ostreatus 1300, вырашенный на качалках и в ферментере, а также культуральная жидкость обладают приятным грибным ароматом, который ошушается сильнее после промывания мицелия водой.
Проводилась апробация селектированного штамма P.ostreatus 1300 в опытно-промышленных условиях. Штамм культивировали в ферментерах емкостью 100-300 л, перемешивание осуществляли с помощью барботажа воздухом. В качестве источника углерода использовали глюкозу, мелассу, источника азота — пептон, аммоний сернокислый, КЭ. Длительность отдельных ферментаций равна 72—96 ч. Максимальный выход биомассы составляет 10—12 г/л, содержание в ней сырого протеина достигает 47 %. Биомасса имеет приятный грибной аромат. Существующее в условиях завода оборудование обеспечивает проведение ферментаций при отсутствии посторонней микрофлоры, условия для хорошего роста испытанного штамма. При опытно-промышленном культивировании показано, что в результате скрининга получен штамм P.ostreatus 1300, обладающий рядом ценных свойств продуцента биомассы (Краснобрыжжий и др., 1985).
Работы некоторых авторов (Sakamoto et al., 1978а, b; Zadrazil, 1978; Qui-mio, Sardsud, 1981; Zetelaki, 1981) подтверждают наши данные о перспективности глубинного культивирования P.ostreatus с целью получения биомассы.
5.2. Культивирование Flammulina velutipes 112
F. velutipes (опенок зимний, зимний гриб) — ценный съедобный гриб, объект промышленного культивирования в ряде стран мира. Промышленная культура плодовых тел F. velutipes развивается в Японии, на Тайване, в последние годы гриб экспериментально культивируется в Европе и СССР (Singer, 1961; Shiio et al, 1974; Промышленное культивирование ..., 1978, Tonomura, 1978; Гаврилова, 1981). Глубинное культивирование F. velutipes может быть использовано для получения биомассы пищевого назначения, биологически активных веществ, инокулюма при производстве плодовых тел. Т.Сугихара и Г.Хумфельд (Sugihara, Humfeld, 1954) отмечают, что урожай мицелия F. velutipes по сухой массе в глубинной культуре на качалке составляет около 30—40 г на 100 г использованной глюкозы. Однако полученный ими культуральный мицелий был лишен грибного аромата, что, по мнению авторов, не позволяет использовать F. velutipes в качестве продуцента пищевой биомассы. Продукция глубинного мицелия у этого вида по данным разных авторов составляет 5—20 г/л по сухой массе, протеин в культуральном мицелии достигает 25-31 %, ЭК по углероду - 40-50 % (Eddy, 1958; Falanghe, 1962; Фалина, 1978; Вечер и.др., 19826, Псурцева, 1983). У этого гриба установлено наличие комплекса протеолитических ферментов (Гаврилова, Фалина, 1975; Фалина, 1978; Гаврилова и др., 1980).
В процессе первичного отбора показано, что для F. velutipes 112 характерны быстрый рост и зна<гательная продукция биомассы в глубинной культуре, способность использовать субстраты, пригодные для промышленного производства пищевого мицелия, установлена специфичность в отношении некоторых источников питания.
