Высшие съедобные базидиомицеты в чистой культуре - Бухало А.С.
ISBN 5-12-000267-6
Скачать (прямая ссылка):
грибы, которые не выделяются в культуру, могут быть разделены на 3 категории. У грибов 1-й категории на перевивочном кусочке ткани плодового тела появляется только пушок воздушного мицелий высотой 1—2 мм, который быстро прекращает рост, не переходя на питательную среду. Грибы 2-й категории не имеют мице-лиального роста на тканевом инокуляте. У грибов 3-й категории отмечается обильное инфицирование инокулята посторонней микрофлорой, от которой не удается избавиться. Среди грибов, которые многими исследователями не изолированы в культуру, наиболее часто встречаются виды родов Russula, Lactarius, Cortinarius, Gomphidius, Cantharellus. Трудности и неудачи при выделении милели альных культур из тканей плодовых тел объясняют (Modess, 1941; Шемаханова, 1962; Semerdzieva, 1965) неблагоприятным физиологическим состоянием мицелия плодового тела в момент выделения или непригодностью, токсичностью каких-либо компонентов питательной среды. Относительно того, какую часть плодового тела предпочтительнее брать для получения инокулята (шляпку, ножку, гниений, место перехода шляпки в ножку и тл.), существуют различные мнения (Mikola, 1955; Мозер, 1963; Бухало, 1966, 19736; Watling, 1971, 1977),что,очевидно, можно объяснить разнообразием строения, размеров консистенции плодовых тел у высших базидиомицетов, а также личным опытом исследователей. Е.Мелин (Melin, 1922а) считает, что вообще не имеет значения из какой части плодового тела берут инокулирующую ткань. Большинство авторов обращает внимание на тот факт, что рост культуры происходит значительно лучше, если тканевой изолят берется из молодого^ не начавшего даже образовывать споры, плодового тела. А.СоВоткГ (Sobotka, 1955) выделял культуры из плодовых тел разного возраста, даже подвергшихся воздействию мороза. МЛантиду (Pantidou, 1961а) отмечает, что культуры, выделенные как из молодых, так и из старых плодовых тел болетальных грибов, растут хорошо, но в последнем случае гораздодаще-на-блю дается бактериальное ^загрязнение.
Для дезинфекции плодовызг тея используют различные антисептические жидкости, как, например, формальдегид (1:100), 0,1 %-ный раствор сулемы, 3 %-ный раствор перекиси водорода, этиловый спирт и другие вещества, а также обжигание плодового тела над пламенем горилки. Имеются существенные расхождения во взглядах различных авторов относительно оптимальных размеров кусочка иноку-лирующей ткани.
Успехи в получении культур некоторых высших базидиальных грибов были достигнуты в связи с использованием антибиотиков и фунгицидов, которые стали добавлять в питательную среду для подавления рюста посторонних микроорганизмов, загрязняющих тканевой инокулят и растущий мицелий (Шемаханова, 1962, Бухало, 1966,19826; Waiting, 1971).
Значительное внимание многими исследователями уделяется получению культур высших базидиомицетов из базидиоспор. Монокариотические культуры, выделенные из одной базидиоспоры, применяются в экспериментах, связанных с гибридизацией культивируемых видов, изучением таксономии, генетики, половой дифференциации, морфологии бесполых спороношений и других вопросов у высших базидиомицетов.
Проращиванием базидиоспор различных видов высших съедобных базидиомицетов занимается шведский миколог Н.Фриз (Fries, 1949, 1977, 1979а, Ь, 1981, 1983а, Ь). Из базидиоспор он получил мицелиальные культуры некоторых видов из родов Boletus, Leccinum, Amanita, Mycena, Laccaria, Paxillus, Cantharellus и др., что не удавалось другим исследователям. Успех работ Н.Фриза можно объяснить тем, что он использовал широкий спектр питательных сред, для стимуляции применил культуры дрожжей Torula sanguinea и Rhodotorula glutinans. Прорастание базидиоспор видов рода Leccinum он получил лишь в присутствии мицелия тех же видов грибов (Fries, 1981).
Положительных результатов в проращивании базидиоспор добились М.НЛИема-ханова (1962), В.Я.Частухин, М.АНиколаевская (1969) и др. Отмечены быстрая потеря способности прюрастания и снижение процента прорастания у базидиоспор даже при непродолжительном их хранении, а способность к прорастанию сохраняется лучше при низких температурах (Fries, 1943, 1949; G itlieb, 1950; Шемах&-
нова. 1962 ). Некоторым видам для прорастания базилиоспор требуется определенный период покоя, например, Calvatia gigantea. Suillus luteus и S.granulatus (Ille-маханова, 1962; Bulmer, Beneke. 1962; Sussman. Haivorson, 1966). Однако метол выделения из базилиоспор остается пока неприемлемым для получения культур определенных экологических и таксономических групп грибов из-за значительных трудностей или вообше невозможности прорастить базидиоспоры.
После анализа литературных данных мы сделали заключение, что наиболее универсальным является метод выделения культур высших базидиомицетов из плодовых тел. Он особенно удобен для видов с карпофорами, которые имеют толстый слой ткани шляпки или ножки. Несомненное преимущество этого метода — непосредственное, без дополнительных скрещиваний гаплоидного мицелия получение дикариотической мицелиальной культуры. Выделение культур из субстратов и микоризных окончаний требует их дополнительной идентификации путем получения в культуре плодовых тел, в большинстве случаев это невозможно.
