Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
используют при кишечных вирусных инфекциях для эпидемиологического
анализа вспышек заболеваний, вызываемых энтеровирусами, вирусами ящура.
Для лабораторной диагностики гепатита применяют серологические методы
исследования сывороток крови больных, контактировавших с ними лиц,
переболевших, доноров с целью выявления специфических антигенов и антител
вируса гепатита В.
Тема 36. ВИРУСОЛОГИЧЕСКАЯ И СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ
ДИАГНОСТИКА ЭНТЕРОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ И ВИРУСНОГО
ГЕПАТИТА
Программа занятия.
1. Изучение схемы диагностики энтеровирусных инфекций.
2. Вирусологическая диагностика.
3. Серодиагностика вирусного гепатита В.
4. Диагностические, профилактические и лечебные препараты, применяемые
при этих заболеваниях. *
Демонстрация
1. Реакция преципитации в агаре (двойная диффузия в геле по Оухтерлони)
для обнаружения антител (анти-HBg) в сыворогке крови больного вирусным
гепатитом В. ,
2. Метод встречного электрофореза для выявления антигенов- и антител в
сыворотке больных вирусным гепатитом В.
3. Иммуноглобулины, диагностикумы, диагностические моно- и поливалент.
ные сыворотки.
Задание для выполнения лабораторной работы
1. Учесть результаты выявления специфических антигенов и антител в
сыворотке больного гепатитом В методом преципитации в агаре.
2. Оценить результаты серодиагностики вирусного гепатита В.
Методические указания
Вирусологические и серологические методы диагностики энтеровирусных
инфекций (вирусы Коксаки и ECHO) описаны в разделе "Возбудители
нейровирусных инфекций". В сыворотке крови людей, заболевших гепатитом В,
через 3-5 нед после
247
инфицирования обнаруживается HBS-антиген (австралийский антиген).
Исчезновение этого антигена совпадает с началом выздоровления или
предшествует ему; персистирование вируса в большинстве случаев
сопутствует хроническому течению гепатита. Антитела к HBS-антигену
значительно реже выявляются при остром вирусном гепатите В.
Самым распространенным методом определения антигена и антител является
преципитация в агаре (реакция двойной диффузии в геле по Оухтерлони).
Преимуществами данной реакции являются относительная простота, высокая
специфичность, отсутствие ложноположительных и ложноотрицательных
ответов, небольшой расход материалов и возможность определения полноты
антигенной идентичности. Недостатками реакции являются низкая
чувствительность, длительность; получение предварительного ответа через
24 ч, а окончательного-лишь спустя 48-72 ч. Для исследования берут кровь
больного в количестве, необходимом для получения 0,3 мл сыворотки.
Реакции ставят на пластинах, в 1% агаре, в котором вырезают лунки для
ингредиентов реакции. В качестве тест-системы используют стандартный
австралийский антиген и соответствующую специфическую антисыворотку. Учет
реакции проводят через 1-3 дня по появлении дуг преципитации между
лунками.
Реакция встречного электрофореза в агаровом геле по чувствительности не
отличается от реакции преципитации, но несколько уступает ей по
специфичности, однако значительно превосходит ее по скорости получения
результатов: в течение 2 ч можно одновременно исследовать около 200
сывороток.
РСК обладает сравнительно более высокой чувствительностью, но ее
использование ограничивается часто встречающейся антикомплементарной
активностью сывороток крови больных.
Для серодиагностики вирусного гепатита В наиболее чувствительной и
специфичной является РПГА, однако эта реакция требует затраты больших
количеств тест-системы.
Диагностические, профилактические и лечебные
препараты
Тест-система для серодиагностики гепатита В; стандартный австралийский
антиген и соответствующая специфическая антисыворотка.
Иммуноглобулин нормальный человеческий. Получается из крови человека
(донорской, плацентарной) путем фракционирования. Применяется для
профилактики и лечения вирусного гепатита.
248
ОБЩАЯ И МЕДИЦИНСКАЯ МИКОЛОГИЯ
Тема 37. МОРФОЛОГИЯ ГРИБОВ
Программа занятия
1. Морфология плесневых грибов, дрожжеподобных грибов.
2. Методы изучения морфологии грибов.
Грибы -растительные организмы, имеющие как макро-, так и микроскопические
размеры и характеризующиеся следующими основными свойствами: наличием
дифференцированного ядра, отсутствием хлорофилла, размножением спорами,
наличием у большинства видов вегетативных органов - гифов, которые,
переплетаясь, образуют мицелий. У грибов различают субстратный мицелий,
погруженный в питательную среду, и мицелий воздушный, растущий на ее
поверхности. Многие грибы имеют септированный (многоклеточный) мицелий,
гифы которого разделены внутренними перегородками - септами; для других
грибов характерен несептированный мицелий.
Споры грибов располагаются внутри мицелия (эндоспоры) или вне его
(экзоспоры). Среди гифов выделяют так называемые плодоносящие
(спороносные) гифы. Так, например, у мукоровой плесени (Мисог)
плодоносящие гифы -споран-гиеносцы, на конце имеют расширение: спорангии,
внутри которых находятся эндоспоры (рис. 88). Плодоносящие гифы грибов
