Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
сыворотки, а затем соответствующие моновалентные сыворотки. Вначале
устанавливают принадлежность исследуемого агента к вирусам полиомиелита,
Коксаки или ECHO в реакциях нейтрализации с поливалентными сыворотками к
каждой из трех упомянутых групп вирусов. Так, если нейтрализация
исследуемого вируса произошла с поливалентной сывороткой Коксаки, то на
следующем этапе ставят реакцию нейтрализации с моновалентными сыворотками
к каждому серотипу данного вируса (табл. 55-57).
Некоторые серотипы вирусов ECHO (3, 6, 7), Коксаки А (20, 21), Коксаки В
(1-5), обладающие гемагглютинирующими
241
Таблица 55. Результаты реакции нейтрализации выделенных от больных
вирусов с моновалентными иммунными сыворотками к вирусам полиомиелита I-
III типов
Тип сыворотки к вирусам по- День учета
Контроль Тип выделенного вируса полиомиелита
лиомиелита 2-й 3-й 4-й 5-й 6-й 7-й
I II III - - + ++ +++ +++ - 1
Контроль вируса + ++ +++
Условные обозначения: -4-Н + выраженная дегенерация клеток с их
отслаиванием от стенок пробирки; +++ менее выраженная дегенерация клеток
с частичным отслаиванием от стенок пробирки; ++ наличие не более 50%
дегенерированных клеток; + наличие одиночных дегенерированных клеток; -
отсутствие ЦПД.
Таблица 56. Результаты реакции нейтрализации выделенных от больных
вирусов с моновалентными иммунными сыворотками к вирусам Коксаки
Сыворотка к вирусам Коксаки
День учета
3-й
5-й
6-й
Контроль
сыворотки
Тип выделен-' ного вируса
В,
в2
Вз
В"
В6
Be
+
++
+
++
+
++
-н-н-
-н-н-
-н-н-
-н-н-
++
++
++-Н-
++-Н-
-н-н-
-н-н-
+-Н I
-н-н-
Коксаки Вэ
Контроль
вируса
++
-R-H-
+-Н I
Условные обозначения те же, что и в табл. 55.
свойствами, типируют в РТГ А. Для выделения вирусов Коксаки А, которые
плохо репродуцируются в клеточных культурах, заражают новорожденных белых
мышей, у которых на 3-5-й день развиваются вялые параличи. Идентификацию
этих вирусов проводят в реакции нейтрализации на новорожденных мышах с
моновалентными диагностическими сыворотками против серотипов вирусов
Коксаки А.
242
Таблица 57. Результаты реакции нейтрализации вируса моновалептными
иммунными сыворотками против 9-16-го типов вирусов ECHO
Тип сыворотки к вирусам ECHO День учета
Контроль Тип выделенного вируса
2-й 3-й 4-й 5-й 6-й 7-й
9 11 12- 13 14 15 16 - - + ++ +++ +++ - 11
++ ++ +++ ++ +++ +++ +-Н- +++ +++ +++
+
+ + ++ +++
Контроль вируса +++ +++
Условные обозначения те же, что и в1 табл. 55.
Таблица 58. Результаты реакции нейтрализации с парными сыворотками крови
больного и антигенами - вирусами Коксаки Вз и Bs
Сроки
взятия
сыво- Вирус
ротки
крови
после
начала
заболе-
вания,
ДНИ
3 Коксаки Вз
20 То же
3 Коксаки Bs
20 То же
Разведение сыворотки
1:4 1:16 1:64 1:256 1512 1:1024
Конт-
роль
сыво-
ротки
Титр
антител
Крат-
ность
нарас-
тания
титра
++++
+-Н-+
++++
+++ +
++++
+-Н-+
-н-к
++++
-н-н-
++-Н-
++++
++++
++++
1:4 |
1 : 2561
1:161 1:16 |
64
Условные обозначения те же, что и в табл. 55.
Серодиагностика. Ретроспективный метод лабораторной диагностики,
поскольку ответ обычно дается после выздоровления или смерти больного.
Серодиагностика энтеровирусных инфекций основана не на абсолютных
показателях титра антител в исследуемой сыворотке, а на его увеличении не
менее чем в 4 раза в процессе заболевания. С этой целью кровь у больного
берут 2 раза: в первые дни болезни и вторично через 3-4 нед. Сыворотку
первой пробы крови сохраняют в
243
холодильнике, и реакцию ставят одновременно с обеими сыворотками.
Для серодиагностики применяют реакцию нейтрализации в культуре клеток с
эталонными штаммами тех типов энтеровирусов, которые чаще всего выделяют
от больных. Выбор эталонных штаммов зависит от эпидемиологической
обстановки и клинических симптомов заболевания. Эталонный вирус берут в
количестве 100 ЦПД. Парные сыворотки разводят с коэффициентом 4: от 1/4
до 1/1024 (табл. 58). Серодиагностику заболеваний, вызванных
гемагглютинирующими типами вирусов Коксаки и ECHO, проводят в РТГ А.
Серологическая диагностика клещевого энцефалита
и хронического менян гознцефа лита
Экспресс-диагностика. Для определения зараженности клещей используют
иммунофлюоресцентный метод (мазки-отпечатки) и РПГА со взвесью
исследуемого материала и эритроцитами, нагруженными антителами к вирусу
клещевого энцефалита. Предварительный ответ получают спустя 2-3 ч.
Серодиагностика. Проводится в реакции нейтрализации, РСК и РТГА со
стандартными вирусными антигенами и парными сыворотками больного, взятыми
в начале болезни и через 5-7 нед. Постановка реакции требует соблюдения
мер безопасности вследствие возможного присутствия вируса в исследуемых
пробах крови больного в острый период заболевания. Оценка результатов
серологических реакций производится с учетом анамнестических данных
(ревакцинация, введение противоэнце-фалитного иммуноглобулина).
