Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
Особое значение вирусологических и серологических исследований состоит в
том, что только на основании полученных данных можно провести
эпидемиологический анализ вспышек вирусных заболеваний для установления
источников инфекции и путей циркуляции вируса среди людей и животных как
в эпидемическом, так и в межэпидемическом периодах.
ВОЗБУДИТЕЛИ РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ
ИНФЕКЦИЙ
Возбудители респираторных вирусных инфекций относятся к разным семействам
РНК- и ДНК-co держащих вирусов (табл. 49). Они объединены в одну группу
на основании способности проникать в организм преимущественно через
слизистую оболочку верхних дыхательных путей, а также общих принципов
лабораторной диагностики. Приведенные в табл. 49 вирусы
230
вызывают главным образом поражения респираторного тракта. Однако
некоторые из них могут поражать другие ткани и органы ¦человеческого
организма. Так, ряд вирусов, например вирус паротита, преимущественно
поражает слюнные железы, ткани яичек у мальчиков и другие органы, а вирус
краснухи вызывает системное поражение лимфатических узлов, эмбриональных
тканей у беременных (см. на с. 229, табл. 49).
Для респираторного тракта наиболее характерны смешанные инфекции,
вызванные вирусными, вирусно-бактериальными, вирусно-микоплазменными
ассоциациями, что необходимо учитывать при лабораторной диагностике. При
всех респираторных инфекциях возбудитель локализуется в верхних
дыхательных путях, поэтому материалом для исследования служат мазки и
смывы из носоглотки, а при поражении легких - мокрота и промывные воды
бронхов. При герпесе и ветряной оспе вирусы также обнаруживаются в
высыпаниях на слизистой оболочке полости рта и на коже. Вирусемия
наблюдается лишь при самых тяжелых формах заболеваний, вызванных
перечисленными вирусами, а также при детских инфекциях: кори, паротите,
краснухе, ветряной оспе.
В лабораторной диагностике ОРЗ наиболее широкое применение нашли
экспресс-методы: иммунофлюоресценция и рино-цитоскопия, позволяющие в
течение 2-3 ч поставить ориентировочный диагноз. Вирусологические методы
с выделением Й идентификацией возбудителя используются преимущественно
для эпидемиологического анализа вспышек заболеваний, вызываемых данными
вирусами. Серологическая диагностика при гриппе и других ОРЗ носит
ретроспективный характер, так как накопление антител происходит в период
реконвалесценции (через 2-3 нед после начала заболевания). Несколько
более раннее накопление антител характерно для детских инфекций. Для
серодиагностики используют РТГА, РСК и реакцию нейтрализации вируса.
Тема 34. ВИРУСОЛОГИЧЕСКАЯ И СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ
ДИАГНОСТИКА ГРИППА, ПАРАГРИППА И АДЕНОВИРУСНОЙ
ИНФЕКЦИИ
Программа занятия
1. Изучение схемы диагностики респираторных вирусных инфекций.
2. Экспресс-методы диагностики.
3. Вирусологическая диагностика гриппа и других респираторных вирусных
инфекций. ч
4. Серодиагностика гриппа и других респираторных вирусных инфекций.
5. Диагностические, профилактические и лечебные препараты, применяемые
при указанных заболеваниях.
231
о
сх
о
§
л
и
о
Е
ев
S
п
&-
14
" и О. Кой
Ё я с й Н к о й S
Рнбя
к
о
**>
S
"
о> (0 "
a s
К я " ?
II
m п
яО §•
кк 8
?
Он
п
X
К
к
О
§
О
S ->е
"а
Я
Я
а
к
к
Он
а
аг е*"
" &
5 & .
3
а
I
s
Е
I
§
Е Г Е
232
Демонстрация
1. Иммунофлюоресцентный метод экспресс-диагностики гриппа и ОРЗ.
2. Риноцитоскопия при гриппе и аденовирусной инфекции.
3. Вакцины, иммуноглобулины, лечебные сыворотки, диагностикумы,
диагностические моно- и поливалентные сыворотки.
Задание для выполнения лабораторной работы
1. Исследовать полученную из зараженных куриных эмбрионов амниотическую и
аллантоисную жидкость на присутствие вируса гриппа в реакции
гемагглютинации.
2. Учесть результаты идентификации выделенного вируса гриппа в РТГА.
Сделать заключение.
3. Учесть результаты идентификации аденовирусов, выделенных в культуре
клеток, в РСК. Сделать заключение.
4. Оценить результаты серодиагностики разных респираторных вирусных
инфекций в PIT А и РСК.
Методические указания
Материал для исследования: смывы из носоглотки, мокрота, мазки из зева.
Риноцитоскопическое исследование является ориентировочным экспресс-
методом лабораторной диагностики гриппа. С поверхности нижней носовор
раковины больных берут мазки-отпечатки (с помощью узких стекол со
шлифованным краем или пластинок из плексигласа). Препараты окрашивают
смесью основного фуксина и метиленового синего. В цитоплазме
цилиндрического эпителия, а также в цитоплазме дегенерированных
макрофагов, в лейкоцитах располагаются ширококонтурированные включения,
окрашенные в красный цвет. Риноцитоскопическое исследование не является
специфическим методом диагностики гриппа, однако данный метод позволяет
дифференцировать грипп от аденовирусных инфекций, при которых наблюдаются
деструкция клеток, вакуолизация ядер и образование внутриядерных
включений.
При репродукции аденовирусов в эпителиальных клетках наблюдаются
