Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
готовят препарат "раздавленная" капля и в темном поле определяют
количество подвижных и неподвижных трепонем. Процент специфически
иммобилизованных спирохет определяют по формуле:
где Тк - число подвижных трепонем в контроле (с инактивированным
комплементом); Т0 - число подвижных трепонем в опыте (с активным
комплементом). Результат реакции считают положительным, если процент
иммобилизации выше 50, слабоположительным - от 31 до 50, сомнительным -от
21 до 30 и отрицательным - ниже 20.
9'
227
Таблица 48. Постановка реакции Закса - Витебского
N" пробирки
Ингредиенты, мл опытная контрольные
с антигеном с сывороткой
1 2 3
Испытуемая сыворотка 0,2 0,2
Антиген 0,1 0,1 -
Спирт 95%, разведенный 1 : 2 Изотонический раствор хлорида -
0,1
натрия - 0,2 -
Встряхивать 1 мин, затем оставить при комнатной температуре на 30 мин
Изотонический раствор хлорида
натрия 1,0 1,0 1,0
Результаты при положительной
реакции +++
Условные обозначения те же, что и в табл. 47.
Диагностические, профилактические и лечебные препараты
Гонококковый антиген. Взвесь убитой культуры гонококка. Применяется для
постановки РСК.
Гонококковая вакцина. Взвесь гонококков, убитых нагреванием. Используется
для вакцинотерапии хронической гонореи, а также для "провокации" при
диагностике этого заболевания.
Антигены для реакции Вассермана: № 1 - специфический из тканевых
трепонем, разрушенных ультразвуком; № 2 - спиртовой экстракт липоидов из
мышцы сердца быка с добавлением 0,3% холестерина (неспецифический) ; № 3-
кардиоли-пиновый (также неспецифический), - высокоочищенный экстракт
бычьего сердца, имеющий постоянный химический состав липоидов и смешанный
в определенной пропорции с лецитином и холестерином.' Антигены разводят
согласно инструкции и используют в рабочих дозах, указанных на этикетках.
Антигеи Кана. Для постановки осадочной реакции Кана разводят в
соответствии с указаниями на этикетке.
Антиген цитохолевый. Для постановки осадочной реакции
228
Закса-Витебского разводят по титру, указанному на этикетке. Этот антиген
более концентрированный по сравнению с антигеном Кана, что позволяет
быстрее учитывать поставленную с ним осадочную реакцию.
Антибиотики и химиотерапевтические Препараты: пенициллин, тетрациклины и
др.
Таблица 49. Возбудители вирусных респираторных инфекций
Наименование вирусов Вызываемые заболевания
днк-1 Семейство Adenoviridae Аденовирусы зирусы Риниты, ларингиты,
трахеобронхиты, GP3, пневмонии, отиты, острый конъюнктивит
Семейство Herpesviridae Вирус герпеса 1-го типа Вирус герпеса 2-го типа
Вирус ветряной оспы и опоясывающего лишая Острый гингивостоматит у
маленьких детей, герпетическая экзема, кератоконъюнктивит, герпетическая
лихорадка Герпес новорожденных (генерализованный, генитальный герпес)
Ветряная оспа у детей, опоясываю-ющий лишай у взрослых
РНК-i Семейство Orthoroyxoviridae Вирусы гриппа-А Вирусы гриппа В и С
ирусы Грипп (эпидемии, пандемии, спорадические случаи) Грипп
(спорадические случаи, эпидемии)
Семейство Paramyxoviridae Вирусы парагриппа, болезни Ньюкастла,
респираторно-синцитиальный вирус (РСВ) Вирус паротита Вирус кори ОРЗ
Паротит Корь
Семейство Coronaviridae Коронавирусы ОРЗ
Семейство Picomaviridae Риновирусы Вирусы Коксаки Arc, А21, А24, Вз, Аг,
А4, Аз и др. Вирус ЕСНО20 и др. Риниты, бронхиты, ОРЗ ОРЗ Герпангина
ОРЗ
Семейство Reoviridae Реовирусы ОРЗ, пневмонии (редко)
229
Лабораторная диагностика вирусных инфекций
Для лабораторной диагностики вирусных инфекций используют
вирусологические, серологические и биологические методы исследования.
Среди них наиболее трудоемкими являются нвирусологические, заключающиеся
в заражении исследуемым материалом клеточных культур или куриных
эмбрионов. В связи с различной чувствительностью клеточных культур к
вирусам приходится одновременно заражать несколько первичных или
перевиваемых культур. Некоторые вирусы могут быть обнаружены при
заражении лабораторных животных.
Идентификацию выделенных вирусов проводят с помощью серологических
реакций: нейтрализации, РСК, РТГА, преципитации в агаре и др. Выбор той
или другой реакции связан с особенностями антигенной структуры
исследуемого вируса. Выделение вируса и его идентификация требуют
сравнительно много времени: от 7-10 до 30 дней и более. Это объясняется
тем, что во многих случаях приходится 2-3 раза пассировать вирус в
культуре клеток для его накопления (слепые пассажи). Поэтому особое
значение для ускорения проведения анализов имеет иммунофлюоресцентный
метод, позволяющий в некоторых случаях обнаружить и идентифицировать
вирус в исследуемом материале в течение 30-60 мин.
Серодиагностика вирусных инфекций носит в основном ретроспективный
характер и применяется для подтверждения диагноза. Чаще всего ставят РСК
и РТГА, реже реакцию нейтрализации и др. не менее чем с двумя сыворотками
одного и того же больного, взятыми в разные сроки заболевания (парные,
сыворотки) для обнаружения нарастания титра антител.
