Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
160 сероваров. Из них чаще всего встречаются L. icterohaemorragiae -
возбудитель желтушного лептоспироза (болезни Васильева - Вейля) и L.
grippotyp-hosa - возбудитель безжелтушного лептоспироза (водная
лихорадка).
Материалом для микробиологического исследования в разных стадиях болезни
служат кровь, ликвор и моча. В первые 5 дней заболевания проводят
бак'териоскопическое и бактериологическое исследования крови и биопробы,
с 10-го дня -бактериоскопию мочи, а с конца 1-й недели - серологическое
исследование (реакция агглютинации - лизиса).
Методические указания
Бактериоскопическое исследование (схема 18). Из исследуемого материала
готовят препарат в "раздавленной" капле и микроскопируют. его в темном
поле зрения. В положительном случае видны серебристые лептоспиры,
представляющие собой подвижные изогнутые нити длиной 6-9 мкм с первичными
и вторичными завитками (рис. 80), которые имеют вид загнутых
крючкообразных концов, придающих лептоспирам S-образную форму. Для живых
лептоспир характерны активное поступательное (прямолинейное) движение,
вращение
211
на месте и перемещение по кругу. Ввиду очень слабой восприимчивости
лептоспир к красителям исследуют только нативные препараты.
Бактериоскопия крови (а при* менингеальных явлениях и ликвора) позволяет
установить диагноз в ранней стадии заболевания. Однако отрицательные
результаты не исключают ле.птоспирозной природы заболевания.
Бактериологическое исследование. Культуры лептоспир выделяют на водно-
сывороточной или фосфатно-сывороточной среде с добавлением
инактивированной кроличьей сыворотки. Исследуемый материал засевают у
постели больного в 3-5 пробирок, заливают стерильным вазелиновым маслом
(для ограничения доступа кислорода воздуха) и инкубируют при температуре
28°С не менее 2 мес. Вследствие того что при росте лептоспир среда
остается прозрачной, через каждые 5-6 дней из среды готовят препараты для
микроскопии в темном поле. Серогруппу выделенной культуры устанавливают в
реакции агглютинации с набором диагностических сывороток.
Биопроба. Внутрибрюшинно или подкожно заражают морских свинок, крольчат
или золотистых хомячков. Животных держат под наблюдением в течение
месяца. При заболевании или гибели животного готовят препараты из крови,
мочи, материала вскрытия, микроскопируют в темном поле и делают посевы
для выделения чистой культуры лептоспир.
Серодиагностика. Ставится реакция агглютинации - лизиса с живыми
эталонными культурами лептоспир разных серогрупп и сероваров. Учет
результатов реакции проводят в препаратах "раздавленная" капля в темном
поле. В положительном случае отмечают агглютинацию и лизис лептоспир. При
этом в первых разведениях сыворотки наблюдается полное растворение
лептоспир, частичный лизис или зернистое набухание, в последующих
разведениях - агглютинация лептоспир и появление агломератов в виде
"паучков". Диагностический титр реакции равен 1: 100. Максимальный титр
антител (1:1000-1:10000 и выше) наблюдается на 15-30-й день болезни.
Ввиду того что у части переболевших антитела сохраняются в течение многих
лет, реакцию агглютинации рекомендуется ставить повторно для установления
нарастания титра антител.
Диагностические, профилактические и лечебные
препараты
Бруцеллезный диагностикум. Взвесь убитых бруцелл, окрашенных метиленовым
синим. Применяется для серологической
212
и
о
р еЗ
t я
" ?
§ •? гг I
" 5
о S Рч Ч
О <U
С
о
К
из
Я о ч s
- a&S-
Q. О Я а О а
Я *
3*о
Я С <и О ГГ " ^ S го о 1_
о о "я S & 5 s
S п О к X Я Я е§
(r) 5 & и е[ й> о
2 • fc ч
. с X ?5 а> ю SidJ "2 л о X Ж 5? Я
и
5
В
А
Е
s
? S
Ч а -
0 И
s S
о, Ч
CJ о
1 5
сЗ и
UQ X
Я
Ч
О
??
я я _
? 5*
2 " я
?н сз a s;
fcSxl
Й S8 g
¦ s 4 х о
3 I *Й Й gg § ? §? S
" § С S и а с •я 2 я
с
8 a
8 i
р. с
S
О
213
Окончательный ответ
диагностики бруцеллеза при постановке реакции агглютинации Райта и
Хеддлсона.
Туляремийный диагностику]". Взвесь убитых бактерий туляремии. Применяется
при постановке реакции агглютинации для серодиагностики туляремии.
Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка. Получена из крови кролика,
гйпериммунизированного культурой сибиреязвенных бацилл. Применяется для
постановки реакции термопреципитации по Асколи.
Чумиой бактериофаг. Используется для идентификации Y. pestis.
Сибиреязвенный бактериофаг. Применяется для идентификации Вас. anthracis.
Бруцеллин. Фильтрат 3-недельных бульонных культур Brucella melitensis,
Br. abortus, Br. suis, убитых нагреванием. Применяется для постановки
кожно-аллергической пробы Бюрне.
Тулярин. Взвесь туляремийных бактерий (вакцинного штамма), убитых
нагреванием. Используется для постановки кожно-аллергической пробы.
Антраксин. Белково-полисахаридно-нуклеиновый комплекс, извлеченный при
гидролизе сибиреязвенных бацилл. Применяется для постановки кожно-
аллергической пробы.
Чумная живая сухая вакцина. Высушенная живая культура Y. pestis
вакцинного штамма EV. Используется для профилактики чумы.
