Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Борисов Л.Б. -> "Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии" -> 65

Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.

Борисов Л.Б. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии — М.: Медицина, 1984. — 256 c.
Скачать (прямая ссылка): rukovodstvoklabzadaniyampomikroekonomiki1984.djvu
Предыдущая << 1 .. 59 60 61 62 63 64 < 65 > 66 67 68 69 70 71 .. 96 >> Следующая

Возбудитель дифтерии - Corynebacterium diphtheriae - относится к порядку
Actinomycetales роду Corynebacterium, не включенному в какое-либо
семейство. Кроме дифтерийной палочки, к этому роду принадлежат
псевдодифтерийная палочка С. xerosis, а также дифтероиды - С.
pseudodiphtheriticum и др., являющиеся представителями нормальной
микрофлоры. Основной биологической особенностью возбудителя дифтерии
является способность продуцировать токсин, определяющий патогенез
заболевания. Местный патологический процесс обычно локализуется в зеве.
Лабораторная диагностика проводится путем бактериоскопи-ческого и
бактериологического исследований.
Программа занятия
1. Изучение схемы микробиологической диагностики дифтерии.
2. Бактериоскопическое и бактериологическое исследования при дифтерии.
3. Диагностические, профилактические и лечебные препараты, применяемые
при дифтерии.
Демонстрация
1. Мазки из чистых культур дифтерийных бактерий и дифтероидов, окрашенные
по Нейссеру и Граму.
2. Мазок дифтерийных бактерий, окрашенный корифосфином, в люминесцентном
микроскопе.
3. Рост дифтерийных бактерий и дифтероидов на свернутой сыворотке и
теллуритовой среде.
4. "Пестрые" ряды культур дифтерийной палочки и дифтероидов. Пробы на
цистиназу и уреазу.
5. Определение токсигенности дифтерийной культуры (в реакции преципитации
в агаре).
6. Ускоренный метод диагностики дифтерии.
7. Токсин Шика, дифтерийный анатоксин, противодифтерийная сыворотка.
Задание для выполнения лабораторной работы
1. Бактериоскопическое исследование: а) микроскопировать мазки,
приготовленные из материала, взятого из зева лиц с подозрением на
дифтерию или бактерионосительство; б) определить метод окраски и дать
предварительное заключение. Наметить ход дальнейшего исследования для
подтверждения бактериоскопического диагноза.
2. Бактериологическое исследование: а) описать рост культуры, полученной
на свернутой сыворотке, и колоний на теллуритовой среде; б) отметить
результаты готовых посевов исследуемых культур на средах "пестрого" ряда;
в) в случае обнаружения С. diphtheriae определить ее токсигенность.
Сопоставить данные бактериоскопического и бактериологического
исследований с целью идентификации выделенной культуры и поставить
окончательный микробиологический диагноз.
171
Схема 9. Микробиологическое исследование при дифтерии
Материал
1-йэтаи
2-й этап
3-й этап
Слизь из зева и носа, пленки миндалин и носоглотки и др.
I т
Бактериоскопическое исследование Бактериологическое исследование
I I
Мазки, окраска Мазки, окраска корифосфином по Г раму и (люминесцент-
Нейссеру ная микроскопия)
Посевы на свернутую сыворотку, кровяной агар или среду Клау-берга
Ответ
Характер культур и колоний
Мазки, окраска по Граму и Нейссеру
Посев на "пестрый" ряд Определение токсигенностит-1
Пересев на свернутую сыворотку (чистая культура)
i
Г емолиз > Проба на цис-тиназу
>Проба на уре-азу
J
Реакция агглютинации
Окончательный ответ
Методические указания
Бактериоскопическое исследование (схема 9). Материал берут двумя ватными
стерильными тампонами, один из которых используют для приготовления
мазков, другой - для посева. Мазки окрашивают по Нейссеру и Граму. Для
дифтерийной палочки характерно наличие полярно расположенных зерен
волютина и положение в виде буквы "V" (см. рис. 19). Диф-тероиды и
псевдодифтерийная палочка не имеют зерен волютина или содержат их не на
концах, а по длине палочки. Кроме того, сами бактерии располагаются в
виде "частокола".
Применение люминесцентной микроскопии позволяет повысить эффективность
исследования. При этом дифтерийные палочки можно отличить от
пседодифтерийных по коричневокрасному свечению зерен волютина, которое
они приобретают после окраски флюорохромом - корифосфином. Цитоплазма
этих бактерий дает зеленое или желтое свечение. Однако дифтерийные
палочки часто изменяют свою морфологию, в частности при санации зева
антибиотиками, поэтому для точной идентификации возбудителя проводят
бактериологическое исследование.
172
Таблица 32. Биологические свойства дифтерийной палочки и сходных с ней
коринебактернй
Вид Зер- на во- лю- тина Ге- мо- лиз Ферментация Ток- си-
ген- ность Цис- тн- наза Уре- аза тина- Аг- глю- тина- ция про-
тиво- диф- те- рий- ной сыво- рот- кой Пато- ген- ность для чело- века
саха- розы глю- козы крах- мала
С. diphtheriae:
биовар gravis + - - + + +/- + - + +
" mitis + + - + - +/- + - + +
С. xerosis -/ + - + + - - +/- - - -
С. pseudodiphthericum -/ + - - - ~ - - + ~
-
Условные обозначения те же, что и в табл. 31
Бактериологическое исследование. Материал засевают на элективные
питательные среды - свернутую сыворотку и теллури-товую среду Клауберга
(питательный агар с теллуритом натрия, глицерином и дефибринированной
кровью) для получения чистой культуры. На этих средах задерживается рост
кокков и другой микрофлоры зева, что способствует размножению бактерий
дифтерии. Дифтерийная палочка образует на свернутой сыворотке мелкие
Предыдущая << 1 .. 59 60 61 62 63 64 < 65 > 66 67 68 69 70 71 .. 96 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed