Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Борисов Л.Б. -> "Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии" -> 55

Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.

Борисов Л.Б. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии — М.: Медицина, 1984. — 256 c.
Скачать (прямая ссылка): rukovodstvoklabzadaniyampomikroekonomiki1984.djvu
Предыдущая << 1 .. 49 50 51 52 53 54 < 55 > 56 57 58 59 60 61 .. 96 >> Следующая

Ьй С
+ 1 I + X х +
и К X *
к э* с; о
S SB
и: id с
? & и о о к S-co
о в) и
U 3
! I ! I + + I I + I I
s
и в ЕГ О
1"
5 О
I I + + 11(1111
О V)
о э
11+0 I + +| I + Н- I
ч -о
X _ S CD О
о н Ч с
О CJ
И*
1*5 ^ в S
о й *
о 2 3 к х с g се
в - 2 = я ? 3 " " ?
ю о. ев S о, Ч О цр,о
о с х <и ю
соово
ее
К о о X ч ж о се
SCD
3 "
* в
о "и X R Д СО
3 о
х g
Й * 2 о
&н S о о. s X се
s S к
5 X
55 ? 5 а
X о ? Й
J и 5 D.
Зо.о О* CQ L- О
Условные обозначения: + наличие признака;' - отсутствие признаха; х -
непостоянный признах; + отсутствие признаха у большинства штаммов; ±
наличие признака у большинства штаммов; с - слабая ферментация.
Piic. 64. Возбудители анаэробной раневой инфекции. а - Clostridium
perfringens; б - Cl. novyi; в - Cl. septicus; г - Cl. histolyticum.
агара. Посевы помещают в эксикатор или анаэростат, который заполняют
газовой бескислородной смесью (с палладиевым катализатором) и инкубируют
при 37°С в течение 24-48 ч. После просмотра выросшей культуры делают
мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Бактериоскопия дает
возможность установить однородность или неоднородность культуры, а по
морфологии клеток и отношению к окраске по Граму ориентировочно отнести
ее к определенному роду. Для получения чистой культуры делают пересевы на
сахарный кровяной агар в чашки Петри, которые инкубируют в анаэробных
условиях 3-4 сут до формирования изолированных колоний. После изучения
колоний их пересевают на среду Китта-Тароцци. Идентификацию выделенной
чистой культуры производят на основании присущих им дифференциальных
признаков, которые определяют в тех же строго анаэробных условиях (табл.
24).
Микробиологическая диагностика раневой анаэробной
инфекции (газовой гангрены)
Возбудителями раневой анаэробной инфекции являются бактерии рода
Clostridium (схема 4). К данному роду относятся Cl. perfringens, Cl.
novyi, Cl. septicum, Cl. sordellii, Cl. histolyticum. Чаще других
возбудителем является Cl. perfringens. Заражение происходит при попадании
в рану почвы или пыли, загрязненной спорами клостридий. В анаэробных
условиях (в глубине раны) они прорастают в вегетативные клетки,
продуцирующие разнообразные токсины, которые вызывают распад и
некротизацию мышечной ткани. В этом процессе участвуют стафилококки,
синегнойная палочка, протей и другие бактерии, в значительной мере
осложняющие течение заболевания.
Бактериоскопическое исследование. Проводится путем микроскопии мазков,
приготовленных из отечной жидкости или некротизированной ткани. Наличие в
препаратах крупных (1-1,5X3-10 мкм) грамположительных палочек (рис. 64),
часть
145
4;
¦§
о.
в
&
о
в
а
в
в
о
§
в
S
s х
5 5
О,
н * 'К Св
? к
в S к Н
> §°
§ в
<L> V О, г>
К
с " о к х к
К о О. Ч
Q) 0>
t *5
S 2
Й " *2 о. s I-I
о ч
с: ?
5
о
4
ее
в
а
0>
н
в
5

<N1
Окончательный ответ
Для уничтожения аэробной флоры половину засеянных пробирок прогревают на
водяной бане при 80°С в течение 20 мин.
из которых (Cl. perfringens) образует капсулу (рис. 65), позволяет
поставить предварительный диагноз.
Бактериологическое исследование. Исследуемый материал вносят в несколько
пробирок со средой Китта-Тароцци, железосульфитным агаром (среда
Вильсона-Блера) и молоком. Часть пробирок прогревают при 80°С в течение
30 мин для уничтожения неспорообразующих бактерий. Посевы инкубируют в
обычном термостате при 37°С. Cl. perfringens растет в глубине среды. В
молоке уже через 3-4 ч после посева образуется губкообразный сгусток,
содержащий пузырьки газа и отделившуюся прозрачную жидкость. На следующие
сутки на среде Китта-Тароцци отмечается помутнение и газообразование, а
на ЖСА несколько позднее появляются черные колонии в глубине агарового
столбика. Для получения культур других видов клостридий требуются более
строгие анаэробные условия. Из всех посевов делают мазки, окрашивают по
Граму и микро-
Таблица 25. Определение лецитиназной активности токсина CL perfringens
(форма протокола)
Ингредиенты, мл N" пробирки
1 1 3 4
Исследуемый материал оз 03 оз 03
Лецитин 0,1 0,1 0,1 -
Раствор хлорида натрия 0,1 - 0,2
Сыворотка анти-С1. perfringens - 0,1 -
Сыворотка анти-С1. novvi - 0,1 -
Инкубация при 37°С в течение 46-60 мин
Учет результатов
скопируют. При положительном результате обнаруживают крупные
грамположительные палочки Cl. perfringens. Для получения чистой культуры
делают пересевы на сахарный кровяной агар в чашки Петри, которые
инкубируют в строго анаэробных условиях при 37°С в течение 3-4 дней.
Выросшие колонии пересевают в пробирки со средой Китта-Тароцци.
Идентификацию чистой культуры производят на основании признаков,
перечисленных в табл. 24.
Для определения токсигенности исследуемую культуру, выращенную на среде
Китта - Тароцци, центрифугируют и надоса-дочную жидкость вводят морской
свинке, которая в положительном случае погибает.
147
Для быстрого обнаружения токсина Cl. perfringens в раневом отделяемом
Предыдущая << 1 .. 49 50 51 52 53 54 < 55 > 56 57 58 59 60 61 .. 96 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed