Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
пическое исследование при гриппе.
Основным недостатком микроскопического метода является сложность
идентификации обнаруженных микробов, а в некоторых случаях невозможность
их дифференциации (например, кишечной палочки от сальмонелл или шигелл).
При некоторых бактериальных инфекциях и микозах диагностическая ценность
микроскопического исследования весьма велика и является основанием для
постановки окончательного диагноза заболевания, например лептоспироза,
возвратного тифа, первичного сифилиса, гонореи, дерматомикозов,
кандидозов, глубоких микозов. Преимущество микроскопического исследования
состоит в том, что для его проведения требуется всего не более 30-60 мин.
Достоверность микроскопического метода значительно повышается при
проведении иммунофлюоресцентного исследования, которое придает ему
специфичность. В настоящее время иммунофлюоресцентный метод (ИФМ) широко
применяется для обнаружения разнообразных микроорганизмов в
патологическом материале.
Микробиологические (бактериологический, микологический, вирусологический)
методы. Основаны на выделении чистой культуры возбудителя и ее
последующей идентификации на основании морфологических, культуральных,
биохимических, антигенных (серологических) и других признаков.
Микробиологическая диагностика осложняется в случае выделения не одной, а
двух и более культур патогенных или условно-патогенных бактерий.
Располагая чистой культурой бактерий, можно определить ее патогенные
признаки в опытах на животных или in vitro, а также чувствительность к
антибиотикам.
Микологические исследования осуществляются реже, чем бактериологические,
поскольку микроскопическая диагностика микозов достаточно надежна.
Микологические исследования проводят при диагностике кандидозов путем
определения нарастания количества клеток дрожжеподобных грибов рода
Candida, а также глубоких микозов.
Вирусологический метод является наиболее достоверным в диагностике
вирусных инфекций. Однако его трудоемкость,
6-639
129
связанная с приготовлением клеточных культур, обработкой исследуемого
материала, а также со сравнительно частым получением отрицательных
результатов, органичивает применение данного метода. Кроме того, он
требует затраты сравнительно большого времени, особенно при проведении
"слепых" пассажей. Во многих случаях вирусологический метод используют
для ретроспективной диагностики вирусных инфекций.
Все микробиологические исследования наиболее информативны и достоверны,
особенно если они подтверждены дополнительными серологическими данными
(выявление антител к выделенному возбудителю или возбудителям).
Для эпидемиологического анализа вспышек бактериальных инфекций проводят
типирование культур, выделенных от разных больных и из других источников
(вода, пищевые продукты и т.д.) с целью установления их биовара,
серовара, фаговара на основании изучения биохимических, антигенных
особенностей или чувствительности к фагам соответственно.
Кроме того, микробиологические исследования проводят для выявления
бактерионосителей среди детей и взрослых, в том числе работников
медицинских и пищевых учреждений.
Биопробы. Основаны на неодинаковой чувствительности разных лабораторных
животных к определенным микроорганизмам. Данный метод заключается в
заражении животных определенного вида, возраста и массы тела чистыми
культурами микробов или исследуемым материалом. В первом случае биопробы
используются для дифференциации патогенных микроорганизмов, одни из
которых вызывают заболевание или гибель этих животных, другие не
оказывают подобного действия. Во втором случае биопробы применяют для
выделения чистой культуры возбудителя из патологического материала,
загрязненного посторонними микроорганизмами, в результате чего посевы
данного материала на питательные среды не дают положительного результата.
Кроме того, биопробы применяются для изучения вирулентности выделенной
чистой культуры.
Иммунологические методы. Включают серодиагностику, кожно-аллергические
пробы, методы оценки клеточного (Т-системы) и гуморального (В-системы)
иммунитета.
Серодиагностика основана на обнаружении специфических антител в сыворотке
крови больного человека и определении накопления их в процессе
заболевания. В последнем случае сроки исследования значительно удлиняются
и ответ может быть получен из серологической лаборатории в период
130
реконвалесценции, что придает данному методу ретроспективный характер.
Особое значение серологическое исследование имеет в лабораторной
диагностике вирусных заболеваний в связи с серьезными трудностями,
возникающими при выделении многих вирусов из организма человека и их
последующей идентификации. Серологические исследования часто проводятся и
для эпидемиологического анализа инфекционной заболеваемости. С этой целью
определяется наличие специфических антител у здоровых лиц, что
свидетельствует о перенесении ими соответствующей инфекции или во всяком
случае о контакте с ее возбудителем.
