Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
колоний на 1 СМ2.
Обсемененность предметов обихода золотистым стафилококком и фекальным
стрептококком устанавливают аналогичным способом, используя для этого
соответствующие питательные среды (см. методы исследования воды и
воздуха).
Санитарно-бактериологическое исследование молока н Молочных продуктов
О санитарно-бактериологическом состоянии молока и молочных продуктов
судят по микробному числу и коли-титру. Для определения микробного числа
пастеризованное молоко разводят стерильным изотоническим раствором
хлорида натрия (1:10, 1:100, 1:1000) и 1 мл каждого разведения выливают
на дно стерильной чашки Петри, которую затем заливают расплавленным и
остуженным агаром. Посевы инкубируют при 37°С в течение суток, после чего
подсчитывают количество выросших колоний.
Для определения коли-титра цельное пастеризованное молоко засевают в
шесть пробирок со средой Кесслера: в три пробирки вносят по 1 мл молока,
а в остальные три-по 0,1 мл (1 мл молока, разведенного в 10 раз
стерильной водой). Посевы инкубируют при 43°С в течение суток, после чего
из забродивших проб делают посевы на среду Эндо и инкубируют при 37°С. Из
выросших колоний красного цвета готовят мазки, окрашивают по Граму,
микроскопируют и делают посев на среду Козера, а также в пептонную воду с
1% глюкозы. Пробирки с посевами на среде Козера инкубируют при 37°С, а на
среде
91
с глюкозой -при 43° С в течение суток. При оценке результатов учитываются
бактерии, вызывающие брожение глюкозы с образованием кислоты и газа, но
не дающие роста на цитратной среде Козера.
Таблица 14. Определение коли-титра в пастеризованном молоке, сливках,
кефире и других молочных продуктах
Кишечная палочка обнаружена в следующих объемах, мл
1,0 1,0 1,0 0,1 0,1 0,1
_ _ Более 3,0
+ - - - - - 3,0 .
+ + - - - - Менее 3,0
+ + + - - - Более 0,3
+ + + + - - 0,3
+ + + + + - Менее 0,3
+ + + + + +
Коли-титр, мл
Таблица 1$. Санитарно-бактернологнческне нормативы для молока в молочных
продуктов
Продукт Документ, регламентирующий качество Допустимое количество
микробов в' I мл или 1 г, не более Коли-титр, не менее
Молоко пастеризованное: ГОСТ 13277-67
группа А 75 000 3
" Б 150 000 0,3
Молоко во флягах, цистернах 300 000 0,3
Сливки пастеризованные: группа А РТУ 50-69 100 000 3
" Б 300 000 0,3
Молоко сгущенное с сахаром ГОСТ 2903-65 50 000 03
Какао со сгущенным молоком и
сахаром ГОСТ 718-54 35 000 0,3
Кофе со сгущенным молоком и
сахаром ГОСТ 719-54 35 000 0,3
Молоко сухое: высший сорт ГОСТ 4495-74 50 000 0,1
первый " 70 000 0,1
Мороженое ОСТ 4973-74 100000 03
Детские молочные смеси пасте-
ризованные и вареные Инструкция ГСИ СССР 123-13/132 1963 г. 500 11,1
Молоко сухое для детей грудного
возраста ГОСТ 9873-61 500 11,1
92
Состав среды Козера: дистиллированная вода, 0,15% фосфата натрия-аммония,
0,1% фосфата калия однозамещенного, 0,02% сульфата магния, 0,25% цитрата
натрия.
Аналогичным образом исследуют сливки, молочнокислые продукты, мороженое.
Величину коли-титра устанавливают по таблицам ГОСТа (табл. 14 и 15).
Для обнаружения в молоке патогенных бактерий делают посевы на
соответствующие элективные и дифференциальнодиагностические среды с
последующим выделением чистых культур и их идентификацией.
Санитарно-бактериологическое исследование напитков
(лимонад, минеральные воды)
При исследовании лимонада и минеральных вод определяют микробное число и
коли-титр, используя при этом методы, применяемые для исследования
питьевой воды. Перед исследованием лимонад нейтрализуют 10% раствором
гидрокарбоната натрия, проверяя реакцию с помощью лакмусового индикатора.
Отобранные пробы минеральной воды выдерживают при 43°С в течение 1 ч для
удаления избытка газа. Коли-титр определяют методом мембранных фильтров.
С этой целью 500 мл воды фильтруют через мембранные фильтры (100 мл через
один фильтр), после чего их промывают стерильной водопроводной водой для
удаления остатков минеральных солей и помещают на поверхность среды Эндо.
Посевы инкубируют при37°С. После определения коли-индекса высчитывают
коли-титр.
Санитарно-бактериологические нормативы для лимонада и минеральных вод
соответствуют нормативам питьевой водопроводной воды. Такие же требования
предъявляются к воде, используемой для изготовления кваса и различных
фруктовоягодных безалкогольных напитков.
Санитарно-бактериологическое исследование мяса,
колбасных издений н мясных продуктов
При исследовании мяса определяют количество бактерий в мазках-отпечатках,
которые готовят из кусочков мяса размером 2 X1,5 X 2,5 см Мазки
окрашивают по Граму и микроскопируют. Мясо считается свежим, если в поле
зрения обнаружено не более 10 палочковидных бактериальных клеток, и
сомнительно свежим, если количество бактерий превышает 30. При выявлении
большего числа бактерий мясо оценивается как несвежее.
При исследовании колбасных изделий и мясных продуктов определяют
микробное число, а также устанавливают присутст-
