Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Борисов Л.Б. -> "Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии" -> 14

Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.

Борисов Л.Б. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии — М.: Медицина, 1984. — 256 c.
Скачать (прямая ссылка): rukovodstvoklabzadaniyampomikroekonomiki1984.djvu
Предыдущая << 1 .. 8 9 10 11 12 13 < 14 > 15 16 17 18 19 20 .. 96 >> Следующая

И ртутному манометру
Рве. Z8. Установка для фильтрования в условиях вакуума.
/.- фильтр Зейтца; 2 - колба Бунзена для сбора фильтрата; 3 - переходная
трубка с ватным -фильтром; 4,5 ~ вакуумные краны; б - ловушка.
пор. В лабораторной практике широко применяется фильтрация материала
через асбестовые и мембранные фильтры с разным диаметром пор. Эти фильтры
помещают в разъемную часть цилиндрической воронки Зейтца, обе части
которой скрепляются барашкообразными болтами. Трубчатый конец воронки
через резиновую пробку вставляют в колбу Бунзена. Перед фильтрацией вся
смонтированная система с асбестовым фильтром стерилизуется в автоклаве.
Мембранные фильтры стерилизуют отдельно кипячением, а потом вставляют в
стерильную воронку Зейтца. Фильтрация проводится с помощью вакуум-насоса,
к которому присоединяют колбу Бунзена (рис. 28).
Асбестовые фильтры выпускаются диаметром 35 и 140 мм; различают
фильтрующую марку (ф) и стерилизующую (сф). Мембранные фильтры
представляют собой пластинки толщиной около 0,1-0,5 мм и диаметром 35 мм
из нитроклетчатки или ацетилцеллюлозы. В зависимости от размеров пор эти
фильтры имеют номера 1-5 (размеры пор соответственно равны 350-1200 нм).
Оба типа фильтров рассчитаны на однократное применение. Фильтрование
используют для стерилизации жидких материалов, не выдерживающих
нагревания (сыворотка крови, антибиотики), для получения бактериальных
токсинов, фагов и разных продуктов жизнедеятельности бактерий.
Химические методы стерилизации. Используют различные химические вещества
(см. с. 37), обладающие бактерицидным свойством, но в лабораторной
практике применяют ограниченна.
40
Демонстрация
Аппаратура (автоклав, сушильный шкаф, фильтрационная установка),
используемая для стерилизации.
Задание для выполнения лабораторной работы
1. Учесть результаты опытов, поставленных с бактериальными тест-объектами
для контроля эффективности стерилизации, проведенной путем кипячения и
автоклавирования. Сделать заключение.
2. Определить по готовым посевам антибактериальное действие УФ-лучей на
стафилококк и кишечную палочку.
3. Учесть результаты опытов, поставленных для определения антимикробного
действия антисептических и дезинфицирующих веществ. Сделать заключение.
Методические указания
Изучение антибактериального действия высоких температур. В три пробирки с
питательным бульоном поместить шелковые нити, смоченные смесью споровой и
неспоровой культур. Первую пробирку подвергнуть автоклавированию, вторую
- кипячению; третью (контроль) никакому воздействию не подвергать. Посевы
выдержать в термостате при 37°С в течение 24 ч. Отметить результат
поставленного опыта и сделать заключение.
Изучение антибактериального действия Уф-лучей. Суспензию стафилококка или
Е. coii в изотоническом растворе хлорида натрия в объеме 1 мл поместить
на стерильное часовое стекло и облучить лампой БУВ-30 в течение 15 мин на
расстоянии 10-20 см от центра лампы. Облученную и не-облученную
(контроль) суспензии бактерий засеять в питательный бульон и инкубировать
при 37°С в течение 16-24 ч, после чего отметить результаты: отсутствие
помутнения среды связано с гибелью облученной культуры бактерий, в
контроле - наличие роста (помутнение).
Определение антимикробного действия антисептических и дезинфицирующих
веществ. 1. Приготовить два вида тест-объек-тов: а) шелковые нити,
смоченные культурой Е. coii; б) шелковые нити, смоченные спорообразующей
культурой (с большим содержанием спор). Нити поместить в растворы фенола
(5%), лизола (5%), хлорной извести (10%) на 5 и 60 мин, после чего отмыть
от исследуемых веществ, засеять в питательный бульон и поместить в
термостат до следующего дня. Контрольные тесты не подвергать действию
химических веществ. Отметить результат поставленного опыта и сделать
заключение.
2. Диски из фильтровальной бумаги смочить растворами исследуемых
веществ и поместить на поверхность питатель-
41
ного агара в чашке Петри, засеянной (газоном) тест-культурой стафилококка
или кишечной палочки. Чашки инкубировать в течение суток при 37°С. Об
антибактериальном действии исследуемых веществ судят по зонам задержки
роста бактерий, образующихся вокруг дисков.
ФИЗИОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ
В данном разделе изложены основные методы микробиологического
исследования: приготовление питательных сред, техника посевов и
пересевов, способы культивирования микроорганизмов в лабораторных
условиях и выделение чистых культур. Изучение физиологии бактерий
заключается в исследовании их пищевых потребностей, ферментов,
участвующих в пластическом и энергетическом метаболизме, характера роста
и размножения на плотных и жидких питательных средах. Наличие общих
закономерностей в метаболизме разных микроорганизмов сочетается с
существенными различиями в путях и способах превращения веществ и
энергии. На этом основаны их дифференцирование и идентификация -
важнейшие этапы в микробиологической диагностике инфекционных
заболеваний. Наряду с прикладным значением изучение метаболизма у
Предыдущая << 1 .. 8 9 10 11 12 13 < 14 > 15 16 17 18 19 20 .. 96 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed