Методы экспериментальной микологии - Билай В.И.
Скачать (прямая ссылка):
содержанием РНК, белка, отдельных ферментов. Клетки предапикальной зоны
содержат большое количество вакуолей, в которых сосредоточены- резервные
субстраты и ферменты, участвующие в их превращениях. Каждая клетка гифы
способна к прорастанию и образованию новой гифы и систем гиф, т. е.
мицелия.
Возрастная разнокачественность клеток гиф наиболее четко проявляется при
поверхностном культивировании колонии на агаризо-ванных питательных
средах, в меньшей степени - при периодическом погруженном
культивировании; наиболее однотипны клетки гиф, выращенные в непрерывной
культуре. Несмотря на то что мицелиальные грибы были первыми организмами,
выращенными методом погруженного культивирования, качественные и
количественные критерии оценки ростовых процессов и связанной с ними
биосинтетической активности разработаны для них в значительно меньшей
мере, чем для бактерий и дрожжей [51, 280, 347].
IV.2. МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ РОСТА ГИФАЛЬНЫХ ГРИБОВ
Спора - орган полового и бесполого размножения грибов. Хламидоспоры,
гемы, клетки хламидоспорового типа, склероции (до прорастания) относятся
к покоящимся формам жизненного цикла грибов. В этих структурах почти
отсутствуют ростовые процессы, и им свойственна очень низкая
метаболическая активность. При прорастании спор (конидий, спор ангиоспор,
сумкоспор, базидиоспор) определяют:
Рис. 72. Прорастание микроконидии Fusarium moniliforme (/); образование
ростковой трубки (2); начало роста гифы (3),
1) степень увеличения их объема; 2) интенсивность прорастания, т. е.
время появления первой ростковой трубки и числа ростковых трубок (в
пропетых; на основании изучения не менее чем 100 спор); 3) размеры
ростковой трубки, т. е. длину ее до первой перегородки (рис. 72).
При росте гиф определяют длину главной гифы, число и скорость образования
перегородок до появления ветвления первого порядка [532], размеры гиф и
число клеток ветвлений второго, третьего и т. д. порядков (рис. 73).
Систему гиф - мицелий изучают при поверхностном культивировании гриба на
агаризованных питательных средах (в виде колоний) [741] или при
периодическом погруженном культивировании (в виде в разной степени
агрегированных "шариков" или разрозненных гиф - "нитчатый" рост - в
зависимости от густоты посева и других факторов).
139
Дифференциация клеток мицелия с возрастом и истощением отдельных
источников питания и энергии заключается в изменении размеров клеток гиф
и образования фрагментов "эвакуированного" мицелия, т. е.
нежизнеспособных клеток, из которых содержимое через поры перегородок
переместилось в другие клетки, и обычно интеркаляр-ных хламидоспор и
клеток хламидоспорового типа.
Рис. 73. Ветвление гиф при прорастании макроконидий Fusarium solani:
1 - набухшие и прорастающие клетки макроконидий главной гифы; 2 -
ростковая трубка; 3 - ветвление первого порядка.
Репродуктивная фаза роста грибов представляет собой специфические
процессы морфогенеза, связанные с генетическими признаками гриба и
морфогенетическим влиянием продуктов метаболизма. При росте колонии
образуются репродуктивные органы, специфичные для представителей каждого
таксона. У одних видов грибов при погружен-
Рис. 74. Дрожжеподобные клетки F. oxysporum (a); F. moniliforme v. lactis
(б); F. moniliforme v. subglutinans (в).
. 140
ном периодическом культивировании формируются репродуктивные структуры,
аналогичные образуемым при поверхностном культивировании на агаризованных
средах, у других - интенсивность репродуктивных процессов значительно
снижена или отсутствует.
Цикл развития грибов при культивировании - от прорастания споры до
образования репродуктивных органов - у разных видов не одинаков и зависит
от многих факторов. При поверхностном культивировании колонии споры
обычно прорастают не сразу; при погруженном периодическом - споры
(особенно видов Aspergillus, Penicillium, Trichoderma, Fusarium и др.)
нередко сразу прорастают мицелием и дают одну или несколько
репродуктивных генераций. При этом размеры, число спор и
продолжительность цикла развития разных генераций различны. Соотношение
мицелиального и спорового типов роста в культуре зависит от условий
культивирования и свойств гриба.
Многим видам грибов свойствен диморфизм, т. е. способность роста в
гифальной или дрожжеподобной форме. В зависимости от условий
культивирования мицелиальные грибы могут образовывать дрожжеподобные
клетки, а дрожжеподобные грибы - гифальные клетки. Кроме того, многие
виды грибов при погруженном культивировании образуют клетки, подобные
клеткам оболочек склероциев, т. е. проявляют более или менее выраженную
морфологическую дифференциацию, которую необходимо учитывать при
характеристике роста грибов (рис. 74).
IV.3. ФАЗЫ РОСТА ГРИБОВ
1. Прорастание спор: а) набухание - увеличение объема спор
вследствие превращений эндогенных и экзогенных субстратов и начальных
процессов метаболизма, т. е. синтеза НК, белков (обычно продолжительность
