Методы экспериментальной микологии - Билай В.И.
Скачать (прямая ссылка):
Agaricus, Amanita. У некоторых видов пряжки многочисленны, у других -
единичны. За появлением пряжек нужно следить уже на самых ранних стадиях
выделения в культуру, когда на инокулюме и вокруг него на агаре начинает
расти молодой мицелий, так как в более старых культурах пряжек
453
иногда обнаружить не удается. В других случаях пряжки появляются лишь
после нескольких пересевов гриба на разные среды. Кроме пряжек имеется
целый ряд микроскопических признаков, характерных для высших
базидиомицетов, но встречающихся и у грибов из других систематических
групп: анастомозы, медальоны, вздутия, тяжи, ризо-морфы, инкрустированные
гифы и т. п. При идентификации культур эти признаки должны приниматься во
внимание в совокупности со всеми морфолого-культуральными особенностями
данного вида в условиях исскусственной культуры.
Рис. 131. Морфологические особенности культурального мицелия высших
базидиомицетов:
а - пряжки, характерные для диплоидного мицелия; б - оидии Gloeophyllum
seriarium (Fr.) Bond, et Sing.; в - конидиальное спороношение Laetiporus
sulphureus (Fr.) Bond, et Sing; г- конидиальное спороношение Pholiota
adiposa (Fr.) Kumm.; d - хламидоспоры Agaricus silvaticus Seer.; e -
хламидоспоры Cal-vaiia excipuliformis (Per<.) Perd.
Многие высшие базидиомицеты в условиях искусственной культуры образуют
бесполые спороношения - артроконидии, бластоконидии, хламидоспоры
(например, Flammulina velutipes, Cortinarius delibutus Fr., Pholiota
adiposa, Ph. aurivella (Fr.) Quel., Laetiporus sulphureus, Panus
tigrinus). Необходимо точно установить тип кони-диального спороношения,
если таковое имеется, и сравнить с описанным в литературе для данного
вида гр-иба. Простое указание на то, что гриб в культуре образует споры
или, как их в ряде работ неопределенно именуют "вторичные" или
"секундарные" ("secondary") споры, может привести к серьезным ошибкам.
При культивировании на агаровых средах конидиальные спороношения обычно
имеют выраженную видовую специфичность (рис. 131, б, в). Хламидоспоры же,
бластоконидии, как правило, сходны у многих видов и родов (рис. 131, г,
б, ё). Если в литературе отсутствует описание морфологических признаков
выделяемого в культуру гриба, то необходимо провести неоднократные
выделения из плодовых тел, собранных в разных местообитаниях, и убедиться
в идентичности полученных изолятов.
Важным признаком вида являются скорость и характер роста на разных
средах, окраска мицелия и субстрата, наличие тяжей, ризо-
454
морф, наличие экссудата, запах. В погруженной культуре мицелий высших
базидиомицетов, как и других мицелиальных грибов, растет в виде
мицелиальных клубочков или агломератов различных размеров; в
культуральной жидкости всегда наблюдается также значительное количество
обломков мицелиальных нитей. В тех случаях, когда мы говорим о дисперсном
росте, преобладают очень мелкие мицелиальные шарики или гифы разной
длины, часто трудно различимые невооруженным глазом. Размеры мицелиальных
шариков не являются постоянными для каждого вида гриба; они могут
значительно изменяться в зависимости от количества и дисперсности
посевного мицелия, аэрации, состава питательной среды и т. д.
При выращивании съедобных грибов на жидких средах постоянно следует
осуществлять также микробиологический контроль чистоты культуры. Сначала
устанавливают чистоту и морфологическую однородность посевного материала.
Чтобы убедиться в том, что посевной материал не загрязнен бактериями, его
высевают на бульон, агар Хоттингера или МПБ с 0,5% глюкозы и МПА.
Инкубацию проводят при температуре 37° С в течение 2-3 сут. Для выявления
возможного загрязнения дрожжами или другими грибами производят посев
гриба на сусловый агар или среду Чапека с последующей инкубацией при
температуре 25 и 37° С в течение не менее 5 сут. В конце каждой
ферментации необходимо высеять выросшую в культиваторе мицелиаль-ную
культуру на агаровую среду и сравнить ее морфолого-культу-ральные
признаки и микроскопическое строение с исходной культурой. В ряде случаев
в процессе погруженного культивирования могут произойти засорение и
вытеснение мицелиальной культуры базидиаль-ного гриба другим более
быстрорастущим мицелиальным грибом из несовершенных, фикомицетов и др.
В литературе имеется очень мало данных о морфологии базидиомицетов,
растущих в погруженной культуре. Конидии отмечены у Pholiota adiposa, Ph.
aurivella, Clitocybe nebularis, Russula decolorans, Lycoperdon pyriforme,
Laetiporus sulphureus, Sparassis crispa. Хламидоспоры - у видов рода
Agaricus, Coprinus ephemerus, Lepista nuda, Calvatia caelata, C.
excipuliformis, Fistulina hepatica, Laetiporus sulphureus [82]. В
большинстве случаев такие же образования отмечены у этих грибов при росте
на агаровых средах. Как правило, грибы, образующие при росте на
агаризованных средах пряжки, сохраняют эту способность и в погруженной
культуре при благоприятных условиях культивирования.
Индентификация вегетативного мицелия без пряжек. Наиболее сложной задачей
