Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Билай В.И. -> "Методы экспериментальной микологии " -> 226

Методы экспериментальной микологии - Билай В.И.

Билай В.И. Методы экспериментальной микологии — К.: Наукова думка, 1982. — 552 c.
Скачать (прямая ссылка): metodiexpirementalnoymikologii1982.djvu
Предыдущая << 1 .. 220 221 222 223 224 225 < 226 > 227 228 229 230 231 232 .. 279 >> Следующая

переносят на питательную среду. Таким же образом выделяют и
дереворазрушающие грибы. Во влажную камеру помещают тщательно отмытые,
разрезанные плодовые тела или же кусочки древесины, пронизанные мицелием
гриба. Чашки с инокулюмом помещают в термостат при температуре 20-25е С.
При более высоких температурах (26- 28° С и выше) скорость выделения
может замедляться. В жаркое время года чашки с инокулюмом на 1-2 дня
помещают в холодильник при
5-10° С, а затем переносят в термостат. Желательно, чтобы относительная
влажность воздуха была не ниже 80%, для чего в термостат помещают сосуд с
водой.
Молодой растущий мицелий появляется на кусочках плодовых тел у разных
видов в разные сроки: от нескольких дней до 3-4 нед. В последнем случае
кусочек плодового тела для предохранения от высыхания лучше помещать
сразу в пробирку или же заклеивать чашки лейкопластырем.
Выделение культур производят обычно на твердую среду: сусло-агар,
солодовый агар, картофельно-глюкозный агар, мальц-агар и т. д. Если
выделение идет плохо и мицелий не образует колонию вокруг инокулированной
ткани, в состав среды следует добавить дрожжевой автолизат, отвар коры,
хвои или листьев различных высших растений (обычно 0,1-5% по объему),
экстракт плодовых тел грибов. Грибные экстракты готовят следующим
образом: плодовые тела грибов измельчают, заливают холодной водой так,
чтобы они были полностью покрыты, и сутки выдерживают на холоду. После
этого жидкость отфильтровывают, трижды стерилизуют текучим паром и
добавляют к среде в количестве 4-5%.
В чашке Петри вместе с колониями базидиальных грибов могут расти колонии
плесневых грибов, дрожжей, бактерий, что обычно
15 2-66
449
легко заметить. В таких случаях предполагаемые колонии базидиомицетов
нужно последовательно пересеять с обязательным последующим
микроскопическим контролем и избавиться от посторонней флоры с помощью
обычных методов микробиологической техники. Для подавления роста
бактерий, загрязняющих грибные культуры, при выделении рекомендуется
использовать подкисленный агар (pH 4,5- 5,0), антибиотики, лучше их
комбинации (200 ед. пенициллина, 100 ед. стрептомицина в 1 мл среды и
др.). Для ингибирования роста плесневых грибов в среду добавляют 5 мг/л
фундазола или беномила. Чистые культуры базидиомицетов можно выделять
также на жидких средах с набором витаминов и слабой концентрацией
питательных веществ, на раствор мальц-экстракта (0,8%-ный). Жидкие среды
эффективны в тех случаях, когда на агаризованную среду культуру выделить
не удается [708].
Легко выделяется культура таких грибов, как Pleurotus ostreatus (Fr.)
Kummer, Armillariella mellea (Vahl.) Fr., Coprinus comatus (Fr).
S. F. Gray, Lepista nuda (Fr.) W. L. Smith, Clitocybe nebularis (Fr.)
Quel., Macrolepiota procera (Fr.) Sing., Pholiota squarrosa (Fr.) Quel.,
многих афиллофоральных и гастеромицетов. Кусочки плодовых тел таких
грибов, помещенные на питательную среду или во влажную камеру, быстро
покрываются растущим мицелием; бактериальное загрязнение незначительно.
Кусочки плодовых тел Cantharellus ciba-riusFr., видов рода Gomphidius
обычно обильно зарастают бактериями.
Некоторые грибы, особенно представители родов Lactarius и Russula, с
трудом выделяются в культуру, несмотря на отсутствие бактериального
загрязнения. О. Модесс [708] и П. Микола [705] приводят списки грибов,
которые не растут в культуре. Однако все дело, очевидно, в умелом подборе
оптимальных условий для их роста. Трудно выделяются и скудно растут на
обычных средах многие виды родов Amanita, Cortinarius, Clitocybe
vibescina, Pluteus stricapillus (Seer.) Sing., Tricholoma vaccinum (Pers.
ex Fr.) Kumm., Tricholomopsis pla-typhylla и др. Выделяют группу так
называемых приспособительных видов [766], у которых наблюдается медленный
рост колонии вокруг инокулюма. К ним относятся Agaricus silvaticus Sesr.,
Calocybe gam-bosa (Fr.) Donk, Tricholoma georgii Fr., Mycena polygrama
(Bull, ex Fr.) S. F. Gray и др.
Следует иметь в виду, что разные штаммы одного и того же вида могут
значительно отличаться скоростью роста и требованиями к питательной
среде. Культуральные признаки изолятов, выделенных в разное время года
или из плодовых тел грибов неодинакового возраста, часто различаются.
Штаммы, выделенные из разных экологических и географических зон, также
могут отличаться интенсивностью роста в культуре.
XIX.3.1.2. ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР ИЗ БАЗИДИОСПОР
В тех случаях, когда размеры, строение или консистенция плодовых тел не
позволяют выделить из них мицелиальную культуру, ее получают из
базидиоспор. Последние используют также для получения чистых культур при
проведении специальных биологических, в частности генетических,
исследований. Базидиоспоры большинства подстилочных сапрофитов,
копрофильных, лигнофильных и других немикоризных грибов прорастают обычно
легко. Проращивание же базидиоспор многих микоризообразователей
представляет значительные трудности, Удалось прорастить споры
Предыдущая << 1 .. 220 221 222 223 224 225 < 226 > 227 228 229 230 231 232 .. 279 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed