Методы экспериментальной микологии - Билай В.И.
Скачать (прямая ссылка):
обнаруживают спороносящие колонии гифальных грибов (порядок
Hyphomycetales), пикниды сферопсидальных грибов (порядок Sphaeropsidales)
или перитеции сумчатых грибов, из которых выходит споровая масса.
Простерилизованной в пламени горелки иглой собирают массу спор или
конидий л точками или полосами наносят ее на поверхность агаризованной
питательной среды, приготовленной для культивирования морских грибов,
развивающихся на древесине [265, 636, 637, 701, 748].
На панелях, высушенных перед выделением развивающихся на них сумчатых и
несовершенных грибов, споровая масса, выходящая из плодоношений грибов -
пикнид и перитециев,- отсутствует. Выделение этих грибов на питательную
среду производят несколько иначе. Пикниду или перитеций гриба протыкают в
одном-двух местах стерильной иглой, споры, выходящие из образовавшихся
отверстий, собирают и высевают на поверхность агаризованной питательной
среды.
Некоторые морские сумчатые и несовершенные грибы-сапрофиты образуют
перитеции и пикниды, в значительной степени погруженные в субстрат
(древесину). Для выделения этих грибов в чистую культуру из панели
стерильным ланцетом вырезают блок древесины не более 4 мм2, содержащий
единственный перитеций или пикниду гриба. Поверхность блока стерилизуют,
погружая его на 1,5 мин в 50%-ный раствор перекиси водорода. Затем блок
промывают в пяти сменах стерильной морской воды, помещают на сухое
стерильное предметное стекло и тщательно дробят на мелкие кусочки
стерильными препаровальными иглами, освобождая плодоношение гриба от
окру-
444
жающей древесины, после чего плодовое тело протыкают стерильной иглой и
выходящую массу спор высевают на агаризованную среду.
Метод погружения блоков и панелей древесины различных пород в качестве
приманки для обнаружения морских сумчатых и несовершенных грибов-
сапрофитов с последующим выделением этих грибов в чистую культуру на
различных питательных средах является весьма распространенным в настоящее
время и применяется многими исследователями, изучающими микофлору
океанов, морей и эстуариев.
XIX.2.4. ВЫДЕЛЕНИЕ И ПОЛУЧЕНИЕ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР СУМЧАТЫХ И НЕСОВЕРШЕННЫХ
ГРИБОВ, РАЗВИВАЮЩИХСЯ НА ГНИЮЩИХ ЛИСТЬЯХ ДРЕВЕСНЫХ ПОРОД
В качестве приманок для обнаружения встречающихся в морской воде сумчатых
и несовершенных грибов-сапрофитов кроме панелей и блоков древесины
используют также листья различных древесных пород, в частности лавровишни
и земляничного дерева. Листья отмывают в стерильной воде, заворачивают в
алюминиевую фольгу и помещают в стерильные полиэтиленовые бутыли с
продольными или округлыми отверстиями в стенках. Бутыли погружают в
открытом море или в зоне прилива-отлива на глубину около 2 м, закрепляя
их на нейлоновой веревке, верхний конец которой присоединен к буйку, а
нижний заякорен. Сосуды с листьями выдерживают в морской воде 1-4 нед.
После извлечения листья переносят в стерильную посуду и доставляют в
лабораторию, где их в течение 3 дней инкубируют в чашках Петри,
наполненных стерильной морской водой. Через 3 дня на листьях появляются
плодоношения и колонии сумчатых и несовершенных грибов, из которых
производят выделение на искусственные питательные среды способами,
аналогичными выделению грибов с панелей древесины [493].
XIX.2.5. ВЫДЕЛЕНИЕ И ПОЛУЧЕНИЕ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР СУМЧАТЫХ И НЕСОВЕРШЕННЫХ
ГРИБОВ, РАЗВИВАЮЩИХСЯ НА МОРСКИХ ВОДОРОСЛЯХ-МАКРОФИТАХ И ВЫСШИХ РАСТЕНИЯХ
Сумчатые и несовершенные грибы-сапрофиты встречаются в морях и океанах не
только на таких специфических субстратах, как погруженная древесина и
листья древесных пород, но также на поверхности водорослей-макрофитов и
высших растений. Некоторые представители последней группы не являются
истинными сапрофитами, а скорее могут быть отнесены к факультативным
паразитам, т. е. обычно они живут сапрофнтно, но нередко при особых
условиях переходят к паразитизму. Согласно данным Яна Кольмейера [656],
эти грибы образуют с водорослью и высшим растением, на которых они
обитают, своеобразную симбиотическую ассоциацию.
Для сбора и выделения сумчатых и несовершенных грибов, развивающихся на
поверхности талломов морских водорослей-макрофитов и стеблей и листьев
высших морских растений, применяют метод непосредственного сбора
водорослей Sargassum, Ascophyllum, Fucus, Laminaria, Lithophyllum,
Cystoseira, Epilithon, ВаШа'и многих других, высших травянистых растений
Zostera, Thalassia, Juncus, Posidonia, Spartina и других, корней,
ризофоров, пневматофоров древесных
445
растений мангровых зарослей: Rhizophora, Avicennia, Mangifera и других
растений мангров, нижняя часть которых постоянно погружена в морскую
воду.
Наиболее разработаны в настоящее время методы исследования сумчатых и
несовершенных грибов-сапрофитов, развивающихся на водорослях. Эти грибы
многие исследователи выделяют в самостоятельную так называемую
водорослевую группу (algicolous или phycophi-lous group [654]) в отличие
от грибов, развивающихся на погруженной древесине (lignicolous group
