Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Билай В.И. -> "Методы экспериментальной микологии " -> 219

Методы экспериментальной микологии - Билай В.И.

Билай В.И. Методы экспериментальной микологии — К.: Наукова думка, 1982. — 552 c.
Скачать (прямая ссылка): metodiexpirementalnoymikologii1982.djvu
Предыдущая << 1 .. 213 214 215 216 217 218 < 219 > 220 221 222 223 224 225 .. 279 >> Следующая

плодовые тела лишены отверстия.
437
Для проведения опыта необходимо брать свежие образцы со зрелыми плодовыми
телами. Поверхность образцов (корни, листья или другие объекты) осторожно
очищают от растительных остатков и частичек почвы стерильным пинцетом. На
дно стерильных чашек Петри или Коха диаметром 10-18 см ставят несколько
маленьких чашечек для тканевых культур диаметром 4-5 см, сняв
предварительно с них крышки (крышки маленьких чашечек можно разместить в
других больших чашках). Маленьких чашечек ставят столько, сколько может
поместиться в больших. Исследуемые образцы с плодоношениями грибов
(корни, листья, стебли растений) кладут так, чтобы каждый образец лежал
на краях маленьких чашечек, не дотрагиваясь до дна, для предохранения его
от
Рис. 130. Расположение чашек Петри при получении спор сухоспоровых
сумчатых грибов:
а - с маленькими чашечками; б - с предметными стеклами и стеклянными
палочками.
засорения (рис. 130). При этом плодовые тела аскомицетов обязательно
должны располагаться отверстиями вниз. Экскременты животных следует
раскладывать на стерильную сетку с крупными отверстиями - металлическую
или лучше волосяную, положенную на чашечки. Образцы накрывают 2-3 слоями
кружков или полосок стерильной фильтровальной бумаги, увлажненной
стерильной водой из пипетки. Чашку Коха или Петри накрывают крышкой.
Параллельно закладывают опыт без увлажнения фильтровальной бумаги, но для
повышения относительной влажности воздуха в одну из чашечек наливают
стерильную воду. Если маленьких чашечек для тканевых культур нет,можно
использовать стерильные предметные стекла. В этом случае на дно больших
чашек кладут предметные стекла, на которые помещают стерильные палочки, а
на них - исследуемые образцы. Рекомендуется использовать стеклянные
палочки. Наносить тонкий слой питательной среды на дно маленьких чашечек
или на предметные стекла нежелательно, потому что на нее могут попасть
споры быстрорастущих грибов, засоряющие поверхность.
Через определенный промежуток времени (3-48 ч, в зависимости от целей
опыта) снимают крышку чашки Коха или Петри, вынимают маленькие чашечки,
ставят их на столик микроскопа и под малым увеличением находят одиночные
споры. Под эти же образцы можно помещать другие маленькие чашечки,
повторяя процесс несколько раз, если нас
438
интересует продолжительность высыпания спор с плодовых тел. Затем иглу
прокаливают над огнем, охлаждают, погружая в питательную среду, и под
контролем микроскопа, коснувшись увлажненным кончиком иглы поверхности
споры, переносят ее на питательную среду в пробирку или чашку Петри.
Вокруг спор часто образуются капли воды, которые необходимо удалить, так
как взять споры на кончик иглы с капли воды трудно. Для этого чашки со
спорами на несколько минут оставляют открытыми под стеклянным колпаком.
При выделении спор базидиальных грибов с открытым гименофором плодовые
тела или частички плодовых тел кладут гименофором вниз на края маленьких
чашечек, а в одну из чашечек наливают воду. Если плодовые тела
базидиальных грибов большие, то чашки Петри или Коха накрывают не
крышками, а стеклянным колпаком или цилиндром. Маленькие плодовые тела
раскладывают на сетку. Гименофор мягких плодовых тел не должен сминаться.
Ножку плодовых тел перед закладыванием опыта необходимо удалить.
Предложенный метод можно использовать для получения односпоровых культур
гифальных грибов, у которых споры опадают пассивно, особенно видов
Penicillium, Aspergillus и др. Грибы выращивают на питательных средах в
чашках Петри крышкой вниз. На дно крышки ставят открытые маленькие
чашечки или предметные стекла. После того как образуются колонии и
спороношение грибов, чашку необходимо слегка встряхнуть, чтобы споры
упали в чашечки. Споры стерильно иглой переносят на питательную среду,
под малым увеличением микроскопа.
XIX.1.4. УЧЕТ ГРИБОВ
Методы выделения грибов на питательные среды, в том числе и метод
разведения почвенных суспензий, не дают полного представления об истинном
составе грибных зародышей в почве, однако представляют значительный
интерес, особенно для учета видов, которые могут расти на питательных
средах. Более точные данные о количественном содержании грибных зародышей
в почве дают методы прямого микроскопирования.
Методы учета грибов при выделении на питательные среды. При выделении
грибов из почв методом разведения почвенной суспензии учет
количественного содержания грибных зародышей производят следующим
образом. В каждой чашке Петри, засеянной почвенной суспензией, вычисляют
общее количество колоний грибов и находят среднее арифметическое.
Количество грибных зародышей рассчитывают на 1 г абсолютно сухой почвы *
по формуле А = абв!г, где а - среднее количество колоний грибов в чашках
Петри; б - разведение, из которого сделан посев; в - масса влажной почвы;
г - масса сухой почвы. Частоту встречаемости отдельных видов определяют
по числу образцов, в которых встречается данный вид, выраженному в
Предыдущая << 1 .. 213 214 215 216 217 218 < 219 > 220 221 222 223 224 225 .. 279 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed