Методы экспериментальной микологии - Билай В.И.
Скачать (прямая ссылка):
физиологическому раствору антибиотиков благоприятствует получению чистых
культур патогенных грибов.
Очаги поражения предварительно обрабатывают сначала губкой, смоченной
70%-ным спиртом, затем водой с мылом для удаления грязи и медикаментов,
препятствующих микроскопии патологического материала. Кожные чешуйки
берут с периферии очагов поражения как более свежие и богатые
мицелиальными элементами.
По методике Биттинга и Биссерта на очаг поражения, обработанный ацетоном,
наносят несколько капель гамма-цианакрилового контактного цемента и
плотно покрывают стеклом. Приблизительно через 30 с стекло снимают, на
нем остается несколько пластинок клеток рогового слоя, иногда и плотно
приставшие волоски. Препарат исследуют в капле 10%-ного раствора щелочи
или окрашивают синим лактофенолом. Волосы извлекают пинцетом, чешуйки
кожи собирают скальпелем, ногтевые чешуйки - ланцетом и препаровальными
иглами. Для взятия, окраски и микроскопии грибов применяют прозрачную
липкую ленту. Препараты пригодны для длительного хранения.
Для отбора пораженных волос с успехом используют лампу Вуда, в лучах
которой в темном помещении легко выделяются даже при бессимптомных
поражениях светящиеся волоски - наиболее подходящий материал для
исследования [51, 201]. Яркое свечение волос человека шерсти и когтей
домашних животных наблюдается при поражении микроспоридиями, слабое
свечение беловато-зеленоватого цвета - при фа-вусе, золотисто-желтое -
при разноцветном лишае, розовато-красноватое - при эритразме. Возбудители
трихофитии не дают свечения ни в культурах, ни в патологическом
материале.
При заборе патологического материала с поверхности кожи прикладывают или
протирают очаги поражения волосяной щеткой, небольшим лоскутом вельвета
или ковровой материи с последующим прикосновением их к поверхности
питательных плотных сред в чашках Петри. При этом используют стерильную
щетку для мытья рук, на которую нанизывают кусочек марли на глубине 0,3-
0,4 см в качестве своеобразного фильтра для патологического материала.
После прикосновения к поверхности очагов поражения щеткой делают легкие
отпечатки на агаровой среде в чашках Петри. Снятый после этого марлевый
слой прикладывают к поверхности агаровой среды в другой чашке Петри
[364]. Модифицированной щеткой пользуются для забора материала не только
с кожных покровов человека и животных, но и с предметов внешней среды.
Кровь асептично собирают в пробирки с раствором лимонно-кислого натрия
или со стеклянными бусами и встряхивают для предохранения от свертывания.
Асептично взятую посредством поясничного прокола (пункции) спинномозговую
жидкость центрифугируют; осадок используют для
№
посева и микроскопии в окрашенных тушью и неокрашенных препаратах.
Гной собирают ватным тампоном на палочке или петлей, из свищей -
пастеровской пипеткой, из закрытых очагов и абсцессов - шприцем, из
глубоких очагов - посредством биопсии (вырезывания небольшого кусочка
ткани). Взятие материала из бронхов осуществляют с помощью бронхоскопии,
путем аспирации или посредством биопсии очагов поражения.
Промывные воды бронхов, желудка, желчь и мочу предварительно
центрифугируют. Разведенный физиологическим раствором с антибиотиками
(1:1) осадок микроскопируют непосредственно или в окрашенных по Граму и
тушью препаратах.
XVII.2.2. ХРАНЕНИЕ И ПЕРЕСЫЛКА ПАТОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА И КУЛЬТУР
Патологический материал и культуры грибов пересылают в другие
лаборатории, соблюдая меры предосторожности для предотвращения заражения
грибами соприкасающихся с ними лиц и сохранения материала пригодным для
исследований. Чешуйки и волосы могут долго храниться и пересылаться без
повреждения в чистой бумаге, свернутой в конвертики аптечного типа.
Жидкий материал (кровь, спинномозговую жидкость, осадок мочи, мокроту,
испражнения и т. д.) консервируют раствором антибиотиков и пересылают в
запаянных ампулах. Испражнения предварительно разводят физиологическим
раствором (1 : 10), содержащим помимо 500 ед. пенициллина 500 мкг
стрептомицина и 500 мкг хлоромицетина на 1 мл взвеси испражнений.
Биопсированные ткани и трупный материал для посева пересылают в растворах
антибиотиков, а для гистологического исследования - в 10%-ном растворе
формалина во флаконах, закрытых резиновыми пробками. Дефибринированную
кровь направляют для посева в стерильных ампулах, а для микроскопии - в
тонких мазках или в виде толстой капли на стекле, зафиксированных 96%-ным
этанолом до высыхания. Гной из свищей, отделяемое язв и т. п. собирают
стерильным ватным тампоном на палочке, увлажненным раствором
антибиотиков, и направляют в стерильных пробирках, плотно закрытых
ватными пробками.
Культуры грибов пересылают на агаровых средах в пробирках или флаконах,
на целлофане или замороженные лиофильно в ампулах. Из-за опасности
быстрого высыхания, почти постоянного боя и возможности заражения нельзя
пересылать культуры на жидких средах и в чашках Петри.
Сопроводительная надпись к патологическому материалу должна содержать
