Методы экспериментальной микологии - Билай В.И.
Скачать (прямая ссылка):
[157, 173, 255, 257, 492, 499, 604, 742]. Выживаемость устойчивых к
действию УФ- или ионизирующей радиации видов грибов описывается кривыми
сигмоидного типа (плечо различной ширины, переходящее в относительно
прямолинейный участок кривой), чувстви-
Доза излучения, Р
Рис. 124. Дозные кривые выживаемости после у-облучения:
1 - экспоненциальная; 2 - сложная экспоненциальная с резистентным
участком; 3 - сигмоидная.
Рис. 125. Дозные кривые выживаемости после УФ-облучения:
1 - трехкомпонентная (сложная сигмоидная); 2 - многокомпонентная.
I.
<§
1
Jt26 2J 4,2 ВУ'Щ 25,2 50,Г15Д 100,8 126,0 151,2 176,4-
доза УФ-облучения, ю*Дж/м2
226,6
тельных видов - кривыми экспоненциального типа (прямая в
полулогарифмической системе координат) и видов, занимающих промежуточное
положение по устойчивости,- сложными экспоненциальными кривыми,
состоящими из двух кривых, расположенных под определенным углом друг к
другу (рис. 124). Выживаемость высокоустойчивых к УФ-лучам конидий грибов
семейства Dematiaceae описывается кривыми трехкомпонентного типа [155,
673]. Правильнее было бы назы-
13*
387
вать такую кривую сложной сигмоидной кривой выживаемости (по аналогии со
сложной экспоненциальной кривой). В последнее время под действием света
высокой интенсивности получены кривые выживаемости многокомпонентного
типа (рис. 125), у которых выявлены 2-3 плато резистентности на
последовательно уменьшающихся уровнях выживаемости, не обнаруживаемые
ранее у микроорганизмов и грибов [155].
Наиболее общие сведения о дозах кривых выживаемости (их построении,
интерпретации и пр.) приведены в работах [173, 478, 486].
XVI.5. ИЗУЧЕНИЕ ПРОЦЕССА ПОСТРАДИАЦИОННОГО ВОССТАНОВЛЕНИЯ
При изучении влияния ионизирующих излучений на биологические объекты
необходимо учитывать явление пострадиационного восстановления от
полученных организмом повреждений. Это сложный, многоступенчатый процесс,
осуществляющийся на всех уровнях биологической организации [161, 230,
343].
XVI.5.1. МЕТОД ОДНОКРАТНОГО ОБЛУЧЕНИЯ
Способность клеток к пострадиационному восстановлению от полученных
повреждений определяют после однократного облучения методом, предложенным
В. И. Корогодиным [230], который заключается в том,
Доза г-облучения, крад
Рис. 126. Кривые выживаемости и пострадиационного восстановления
Cladosporium cladosporioides:
1 _ дознан кривая выживаемости после v-облучения; 2 - восстановление
после фракционированного облучения дозами 200 + 200 крад; 3 -
восстановление после однократного облучения дозой 400 крад; j -
доверительные интервалы.
388
что суспензию клеток после однократного облучения заданной дозой
выдерживают в воде при комнатной температуре (или инкубируют при
определенной температуре в термостате) с последующим высевом на сусловый
агар через разные промежутки времени. Как правило, для этого по известной
для данного вида дозной кривой выживаемости определяют дозу,
соответствующую ЛД90 пли ЛД99, и облучают ею 10-20 пробирок
стандартизированной водной суспензии конидий. Посев обычно ведут
немедленно после облучения и затем после выдерживания в воде в течение 1,
2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 16,20, 24, 48 и 72 ч. Посев можно производить и в
другие сроки. Если пострадиационное восстановление имеет место, уже через
1-2 ч выдерживания в воде выживаемость облученных конидий увеличивается и
по мере дальнейшего выдерживания продолжает расти до определенного для
каждого вида уровня,а затем переходит в стационарное состояние.
Графически в полулогарифмическом масштабе этот процесс описывается кривой
восстановления (рис. 126). При оценке способности к пострадиационному
восстановлению клетки не должны прорастать и сбиваться в комочки
(конгломераты). Поэтому необходим постоянный микроскопический контроль
конидий.
XVI.5.2. МЕТОД ФРАКЦИОНИРОВАННОГО ОБЛУЧЕНИЯ
Этот метод применяют в том случае, когда известно, что зависимость
выживаемости клеток от дозы облучения описывается кривой сигмоидного типа
[279]. В основе метода лежит фракционирование дозы на две полудозы с
разной экспозицией (от 1 мин до 48-72 ч) клеток в воде до облучения
второй полудозой [279]. Экспозицию подбирают для каждой культуры
индивидуально [88, 153]. Приготовление взвеси спор для облучения
источниками ионизирующего излучения не отличается от описанного в разделе
XVI.2.3.5. Критерием пострадиационного восстановления является
способность спор образовывать макроколонии, выраженная в процентах к
контролю.
XVII. МЕТОДЫ
МЕДИЦИНСКОЙ МИКОЛОГИИ
XVII.1. ЗАДАЧИ И УСЛОВИЯ РАБОТЫ
Основными задачами медицинской микологии являются: изучение морфологии и
биологии патогенных грибов, их идентификация; диагностика, эпидемиология
и профилактика грибковых заболеваний (микозов).
XVII.1.1. ХАРАКТЕРИСТИКА МИКОЗОВ И ИХ КЛИНИЧЕСКОГО ПРОЯВЛЕНИЯ
Среди микозов человека различают поверхностные заболевания (кожи, ногтей,
волос и слизистых покровов) и заболевания внутренних органов (селезенки и
печени, легких, головного мозга, костей и суставов, лимфатической и
