Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Билай В.И. -> "Методы экспериментальной микологии " -> 157

Методы экспериментальной микологии - Билай В.И.

Билай В.И. Методы экспериментальной микологии — К.: Наукова думка, 1982. — 552 c.
Скачать (прямая ссылка): metodiexpirementalnoymikologii1982.djvu
Предыдущая << 1 .. 151 152 153 154 155 156 < 157 > 158 159 160 161 162 163 .. 279 >> Следующая

замачивают в воде и стерильной питательной среде. В зависимости от целей
опыта используют семена разных растений. Для первичного отбора грибов -
продуцентов фитотоксинов - чаще всего используют семена пшеницы и гороха.
Мелкие семена ряда растений (редис, капуста и др.) в опыт брать не
следует, так как чистая питательная среда сама по себе тормозит их
прорастание. После суточного замачивания семена раскладывают на влажную
фильтровальную бумагу в чашки Петри, увлажняют равным количеством
водопроводной воды и проращивают в течение 5-7 дней при постоянной
температуре. Наличие в культуральной жидкости фитотоксинов определяют по
ростовым эффектам: количеству проросших семян и длине проростков и
корней. Токсичными считают культуры, вызывающие снижение всхожести семян
или угнетение роста проростков и корней не менее чем на 30% по сравнению
с контролем.
XII.1.2. БИОПРОБА НА ПРОРОСТКАХ КУКУРУЗЫ [41]
Семена кукурузы промывают и замачивают в течение 5 ч в теплой воде. Затем
их раскладывают в кюветы на влажную фильтровальную бумагу зародышем вверх
и проращивают 1,5-2 сут в термостате при температуре 25-26° С. Для опытов
используют проростки с длиной корней 1-2 см.
Для определения фитотоксической активности гриба кончики корней (точку
роста и меристематическую зону) проростков кукурузы помещают на 1 ч в
культуральную жидкость. Контрольные проростки помещают в воду и
стерильную питательную среду. После этого проростки раскладывают в кюветы
на влажную фильтровальную бумагу, кюветы помещают в термостат (25-26° С).
Через 24 ч измеряют длину корней в опыте и контроле и рассчитывают
фитотоксическую активность ингибирования роста корней (%) по формуле
где Дх - средняя длина корней проростков через 24 ч в опыте (мм); Дк -
средняя длина корней проростков через 24 ч в контроле (мм); Дн -
начальная длина корней проростков (мм).
В качестве биотестов (в зависимости от целей опыта) могут быть
использованы и проростки других однолетних растений. Но наиболее
пригодными, особенно для первичного отбора грибов - продуцентов
фитотоксинов, и чувствительными являются проростки кукурузы, благодаря
значительной скорости прорастания и роста (за сутки прирост достигает до
5 см) и четкой зависимости роста от наличия в культуральной жидкости
фитотоксинов.

322
XII.1.3. БИ0ПР06А НА ПРОРОСТКАХ ПЛОДОВЫХ И ДРЕВЕСНЫХ РАСТЕНИЙ [39г 40]
Для получения проростков стратифицированные семена промывают и замачивают
в водопроводной воде в течение 3-х сут. Удаляют верхнюю и внутреннюю
семенные оболочки, семена раскладывают в чашки Петри на увлажненную вату
и ставят в термостат для проращивания во влажной камере при температуре
24-25° С и периодической аэрации.
В опытах используют проростки с корнями и гипокотилями одинаковой длины.
Проростки помещают в культуральную жидкость, разлитую в пробирки емкостью
20 мл, и выращивают при комнатной температуре в течение 7-10 дней. В
пробирках проростки поддерживаются капроновой сеткой. Для опытов берут не
менее 10 проростков. Контрольные проростки выращивают в воде и стерильной
питательной среде. Следует отметить, что чистая питательная среда может
вызвать угнетение роста проростков некоторых растений, особенно если
источником углерода служит сахароза. В таких случаях применяют разведение
среды и культуральной жидкости 1 : 10. В конце опыта измеряют длину
корней проростков и рассчитывают фитотоксическую активность по формуле
(1).
XII.1.4. БИОПРОБА НА ЛИСТОВЫХ И СТЕБЛЕВЫХ
ТКАНЯХ ПРОРОСТКОВ И ВЕГЕТИРУЮЩИХ РАСТЕНИЙ
[46, 235, 297]
Культуральную жидкость с помощью ватного тампона, кружков фильтровальной
бумаги или стеклянной палочки наносят на стебель, листовую пластинку или
центральную жилку листа. Контролем служит стерильная питательная среда.
Наличие токсина определяют по появлению и характеру некрозов, ожогов,
обесцвечиванию, засыханию пораженной ткани, скручиванию листьев,
отставанию развития растения по сравнению с контролем и другим
изменениям.
XII.1.5. БИОПРОБА НА ДИСКАХ ИЗ ЛИСТЬЕВ И ИЗОЛИРОВАННЫХ ЛИСТЬЯХ
Из листьев или семядолей растений одного возраста вырезают пробочным
сверлом диски диаметром 1-2 см и опрыскивают или смачивают их
культуральной жидкостью. Можно также использовать целые, изолированные
листья и семядоли. Диски или листья помещают в чашки Петри на увлажненную
водой фильтровальную бумагу и выдерживают несколько дней при температуре
20-22° С. Через определенные промежутки времени отмечают появление
некротических пятен, ожогов, изменение цвета и другие изменения. В конце
опыта определяют сырую массу листьев или дисков.
XII.1.6. БИОПРОБА НА ЧЕРЕНКАХ И СРЕЗАННЫХ ПОБЕГАХ РАСТЕНИЙ
В культуральную жидкость, налитую в химические стаканы, помещают побеги
или черенки растений. Контролем служит вода и стерильная питательная
среда. О наличии токсина судят по степени увядания побегов, развития
корней и распускания листьев у черенков.
11*
323
XII.1.7. БИОПРОБЛ НА ХЛОРЕЛЛЕ
(CHLORELLA VULGARIS L.) [311]
Предыдущая << 1 .. 151 152 153 154 155 156 < 157 > 158 159 160 161 162 163 .. 279 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed