Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Бич Г. -> "Биотехнология. принципы и применение " -> 130

Биотехнология. принципы и применение - Бич Г.

Бич Г., Бест Д., Брайерли К., Кумбс Дж. Биотехнология. принципы и применение — М: Мир, 1988. — 480 c.
ISBN 5-03-000058-5
Скачать (прямая ссылка): biotehnologiyaprincipiiprimeneniya1988.djvu
Предыдущая << 1 .. 124 125 126 127 128 129 < 130 > 131 132 133 134 135 136 .. 210 >> Следующая

У других грамотрицательных бактерий (помимо Streptomy-¦ces)
конъюгационные плазмиды встречаются относительно редко. Отметим, что
недавно система скрещивания была обнаружена у бактерий такого важного в
промышленном отношении рода, как Bacillus. Существенно, что эти бактерии
способны .легко акцептировать "голую" ДНК, и поэтому рекомбинантные формы
несложно получить путем трансформации. Такая возможность была
использована при создании штаммов Bacillus, у которых около 50%
синтезируемого ими белка составляет гидролизующий крахмал фермент а-
амилаза. При этом были отобраны несколько мутантов по разным генам с
повышенной способностью к образованию фермента. Эти разные мутации были
затем сведены воедино у одного штамма путем последовательной
трансформации хромосомной ДНК и отбора на повышенную способность
гидролизовать крахмал.
Системы скрещивания у грибов
У грибов существуют разнообразные типы скрещивания, которые используются
в генетических исследованиях. Многие гри-бы-аскомицеты и базидиомицеты
обладают сложноорганизованными системами скрещивания, препятствующими
самооплодотворению и другими формами инбридинга. Половой процесс
.контролируется системой несовместимости. У некоторых грибов 'Система
несовместимости биполярна; при этом процесс скрещивания контролируется
всего одним локусом, который существует в двух альтернативных аллельных
формах. Это дает два тина спаривания, например а и а у Saccharomyces
cerevisiae, причем разрешена лишь комбинация а/а. У других грибов
(например, Schizophyllum commune) система несовместимости тетраполярна. У
них тип спаривания определяется двумя генами, каждый из которых имеет
множество аллельных форм. Для успешного скрещивания два партнера должны
обладать разными аллелями каждого из двух локусов типа спаривания
(например, АхВуХАуВх- это полностью совместимое спаривание, а комбинации
АхВуХАхВх или же АхВуХАуВу и АхВуХ ХАхВу невозможны, так как приводят к
гибели клеток на разных стадиях процесса скрещивания).
302
Глава 7
Парасексуальный цикл у грибов
Многие мицелиальные формы грибов, применяющиеся в промышленности, не
имеют истинного полового цикла, во времж которого можно было бы провести
скрещивание с целью конструирования более продуктивных штаммов. Однако в
этом случае для осуществления рекомбинации можно использовать-
парасексуальный цикл. Именно этот подход применялся при-работе с1 грибами
таких промышленно важных родов, как Aspergillus, Penicillium,
Cephalosporium и Fusarium. Суть- пара-сексуального цикла отражена на рис.
7.2.
Рис. 7.2. Обычный парасексуальный цикл. [С. Е. Caten (1981) Parasexual
processes in. fungi. In: The Fungal Nucleus (eds. K. Gull, S. G. Oliver),
pp. 191- 214. Cambridge University Press.] Тонкие линии--гаплоидные или
анеуплоид-ные ядра; жирные линии - диплоидные ядра.
Гетерокарионы, у которых в одной клетке сосуществуют генетически рйзные
ядра, могут быть получены либо путем слияния ' (анастомоза) гиф разных
мицелиев, либо в результате образования мутантного ядра в мицелии.
Слияние ядер в гете-рокарионе происходит с низкой частотой (10-5-10~4),
но этот процесс1 ускоряется под действием (+) -камфоры или УФ-све-та.
Митотическую рекомбинацию в диплоидном ядре можно индуцировать с помощью
химических и физических воздействий, которые либо вызывают мутации, либо
ингибируют синтез ДНК. Возврат к гаплоидному состоянию после
рекомбинации,, видимо, происходит в результате постепенной утраты
отдельных хромосом. Этому способствуют такие вещества, как "-фтор-
фенилаланин и карбаматы бензимидазола, препятствующие образованию
микротрубочек.
Генетика и биотехнология
303
По сравнению с истинными системами пола парасексуаль-цый цикл - это
малоэффективный механизм образования рекомбинантов. Впрочем, его
эффективность можно повысить, применяя интенсивный отбор и разнообразные
вещества. Эта •система была использована для повышения выхода
антибиотиков, синтезируемых Penicillum и Cephalosporium.
7.3. Генетические перестройки in vivo
7.3.1. Плазмиды
.Многие свойства бактерий, интересные с точки зрения биотехнологии,
кодируются плазмидами. Плазмиды - это кольцевые молекулы ДНК, которые
стабильно передаются потомству бактериальных клеток независимо от
хромосомной ДНК- В генетической инженерии плазмиды используются для
клонирования нужных генов. Мы опишем в этом разделе некоторые важнейшие
свойства.плазмид и обсудим те из них, которые особенно ценны для
биотехнологии.
Структура и репликация
Мцл. масса плазмид составляет от 1 -106 до 200-106. Таким образом, самые
мелкие плазмиды кодируют один-два белка среднего размера, тогда как более
крупные - 300 или более белков. Крупные плазмиды могут кодировать
множество фермер тов, необходимых для работы целой последовательности
биохимических реакций, например для превращения толуола в кате-хол.
Плазмиды с мол. массой более 100 -10б обнаружены только у
грамотрицательных бактерий, в частности у видов Pseudomonas и
Предыдущая << 1 .. 124 125 126 127 128 129 < 130 > 131 132 133 134 135 136 .. 210 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed