Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Баранов В.С. -> "Внешняя среда и развивающийся организм " -> 132

Внешняя среда и развивающийся организм - Баранов В.С.

Баранов В.С., Божкова В.П., Граевский Э.Я., Гулидов М.В. Внешняя среда и развивающийся организм — М.: Наука , 1977. — 385 c.
Скачать (прямая ссылка): vneshnyayasredairazvorganizm1977.djvu
Предыдущая << 1 .. 126 127 128 129 130 131 < 132 > 133 134 135 136 137 138 .. 226 >> Следующая

Рис. 38. Измерение входного сопротивления и константы длины ('/.) (А) у перяных и мышечных волокон с помощью метода прямоугольных голчкое
«— гокоиый мнкроалектрод, 6 — гогсоиый макрсалектроя, 'i - отводящий мщфод.импрод, е' и «"—положение перемещающегося Микроолектрпдл е при шмеренпн хаиегаг.ты ятпны. г — огиодящий мякрозлектрод. Стрелки показывают иаприияение протекания тика вдоль воло;;иа п из ВОЛокил; Б — график изменения электротоикческого потенциала при увеличении расстояния между токовым ц отводящим гпектродпми. Остальные обозначения см. u тексте
лается обычный внутриклеточный микроэлектрод, кончик которого заполняется соот-коютпуюшд.м материалом. Затем такио электроды наполняются раствором с известной «ондоптраииий того попа, активность которого предполагается измерять к цитоплазме. При введении такого электрода в клетку им будет регистрироваться как мембранный потенциал клетки, так и потенциал на эталонной мембране, создающийся за счет разницы в активности исследуемого иона в электроде и в цитоплазме. Поэтому н таких измерениях необходимо введение второго вну три клеточного электрода (обычного) для определения величины мембранного потенциала.
Описанный метод является прямым для определения активности ионов в цитоплазме независимо от оценки межклеточного прострапстка и доли свободной воды в клетке. (Литературу об этом методе см. н разделе VI.2.1.)
Метод радиоактивных шотопое. Основные нрипципы этого метода коротко изложены у Никольского (1974). С помощью этого метода по кинетике выхода изотопа из клетки, выдержанной предварительно н радиоактивном растворе, судят о доле свободной н связанной фракции попа.
Наиболее четкие данные с помощью этого метода были получены па крупных клетках, в частности на гигантских аксонах (Hodgkin, Keynes, 1953). Каплю с радиоактивными попами К+ наносили на поверхность аксона п выдерживали около 2 ч. Затем ее смывали и исследовали подвижность и диффузию попантпих внутрь аксона ионов калия С помощью распределения активности вдоль аксона. Окапалось, что диффузия и подвижность ионов К+ в акооцлазме примерно такая же, как п в воде. Из этих же опытов следовало, что поверхностная мембрана при своей толщине к 100 А -замедляет диффузию ионов К+ между клеткой и наружной средой в десятки тысяч раз (см. Катц, 1908).
Метод внутриклеточных .чикроннъекций. Для решения некоторых вопросов важно искусственно вводить в клетку те или иные ионы. В этих случаях внутриклеточный
8 Внешняя среда
мпкроэлектрОд наполняется максимально концентрированным раствором соли, в состав которой входит итьсщгруемый ион. Для непосредственного введения лона в клетку н большинство случаен применяется электрофорез (микроялекчрод подключается* к такому полюсу источника тока, чтобы нужным ион ныходил ил плгктрода в клешу. В ряде случаев необходимо использовать метод механического выдавливания жидкости из внутриклеточного микроэлектрода н цитоплазму (Ходжкин, 1965; Катц, 1968).
VI.23. Методы измерения ионной проницаемости клеточных мембран
С принципе любой достаточно чувствительный метод по оценке концентрации данного иопа н цитоплазме может быи, использован для измерения проницаемости мембраны к атому нону (Никольский, 1974). Однако, здесь будут рассмотрены наиболее адекватные методы для измерения па одном и том Же объекте быстрых и кратковременных, изменений поппоп проницаемости-
Метод изя> ярения мембранных потенциалов я разных ионных средах- «Этот метод ос-нонан на использовании уранненмя (2) и его модификации. Из уравнения (2) следует* что и изменения проницаемости и изменения копцептрацин ионом отражаются па величине мембранною потенциала. Таким образом, непрерывная регистрация мембранного потенциала н разных ионных, средах позволяет получить серию уравнении типа (2), сонместное решение которых позволяет рассчитать отпошепия прошщаемосюи основных нотенпиалобразуюших ионов (Рк: Ра: /JNa) п измеиепие ни времени »гих от-пошеппи. Подобный анализ был применен в большом количестве работ для клоток и состоянии покои и при различных функциональных сдвигах. I’» покое для большинства Животных клеток ныпОлнлеп'Я условие Ррл ¦>:; Р^л Р% ^
При возбуждении или активации РСя~РNr> Рк {см. Ходжкин, 1965; Катц, 1908). Описанный метод в принципе правомочно использовазь для состояния покоя к чех случаях, когда в мембранном потенциале пет существенного вклада нлектрогенного. насоса.
Метод п рлмоугол ьких толчков тока.'.) гот метод уже описан (см. раздел V 1.2.1. )• в связи с измерением удельного сопротивления цитоплазмы. Выше отмечалось, что совместное решение уравнений (6) и (7) позволяет пайтн удельное сопротивление поверхностной мембраны Для сферической кленах при нахождении RM достаточно намерения /?пх,так как здесь /?м где S — плошадь исследуемой клетки. Ям.
или соответственно ^ клеточных мембран и покое определяется в основном су ммарной проводимостью попов К . Ка* и С1 .
Таким образом, gK -{- + g'.vja* ^ случае оценки gM с помошыо малых сдви-
гом мембранного потенциала (10 мВ) gyi gK + gcl, так как и ?'С1 близки к мембранному потенциалу в покое, а ?к<1 — далеки, кроме тот P$a<L ^сг Более ТШЧ>
Предыдущая << 1 .. 126 127 128 129 130 131 < 132 > 133 134 135 136 137 138 .. 226 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed