Молекулярные механизмы морфогенеза - Банников Г.А.
Скачать (прямая ссылка):
тех. и других клеток L-CAM.no данным иммунофлуоресцентной микроскопии» концентрировался в области межклеточных контактов и сораспределялся с кортикальными пучками актшговых филаментов, в то время как в клетках S-180N-N-CAM равномерно распределялся по клеточной поверхности. При совместном культивировании клеток S-180L и клеток S-180 L/N, N-САМ не концентрировался в районах контактов между S-180L и S-180L/N. Такую .концентрацию N-САМ можно было наблюдать только в районах контактов клеток S-180L/N между собой. Fab * -фрагменты антител к L-САМ диссоциировали эшгтелиодные пласты клеток S-180L и S-180L/N на клетки, морфологически неотличимые^ от нетрансфицирован— ных, что является дополнительным контролем причинной связи между экспрессией L—САМ и образованием эпителиоидного пласта. Электронно-микроскопическое изучение ультраструктуры эпителиоидных пластов показало, что, в отличие от истинных эпителиальных структур, эпителиоидный пласт не имеет базо—апикальной полярности, а между клетками пласта отсутствуют десомосомы и плотные контакты, С другой стороны, в отличие от нетрансформированных клеток, между клетками пласта обнаружены многочисленные структуры щелевых и адгезионных контактов. Опыты по инъецированию красителя показали, что щелевые контакты между клетками эпителиоид-ного пласта функционально активны.
Морфологическое выражение результатов трансфекции L-САМ в мезенхимоподобные клетки зависит от каких-то неизвестных свойств трансфицируемой линии. Так, в отличие от клеток S-180, клетки линии L при трансфекции куриных генов L-САМ или N-CAM [172] или мышиного гена L-САМ [439] не образуют эпителиоидного пласта, но склеиваются в аггре-гаты. Отметим, что L -клетки одинаково реагируют аггрега-цией как на трансфекцию гена N—САМ, так и генаL-САМ [172], тогда как клетки S—180 меняют морфологию только при трансфекции геном L—САМ [423]. Трудно сказать, чем определяется различие в поведении двух линий клеток после их трансформации ДНК ММА. Образование либо эпителиоидного пласта, либо образование аггрегатов может зависеть от интенсивности взаимодействия клеток двух различных линий с молекулами внеклеточного матрикса подложки. Морфологическая реакция клеток на экспрессию ММА может зависеть также от организации цитоскелета и характера взаимодс/йсгвнй данной ММА с его элементами. Экспериментальным подтверждением этой точки зрения служит работа [440], в которой
53
бЫДО показано, что укорочение цитоплазматического домена L-САМ, предположительно несущего сайты взаимодействия с молекулами цитоскелета, блокирует аггрегацию клеток. Трудно себе представить, что изменение длины цитоплазматического домена L-СЛМ способно препятствовать взаимодействию N-концевых центров связывания этой молекулы друг с другом. Более вероятное объяснение состоит в том, что го-мофильное взаимодействия молекул L-САМ недостаточны для аггрегации, для которой, помимо этого, требуется взаимодействие цитоплазматического домена ММА с молекулами цитоскелета. О том, что такие взаимодействия реальны, говорят результаты работы, в которой обнаружено, что в ИШЬтках собаки МДСК L-САМ находится в ассоциации с цитоскелет^ыми белками - анкири-ном [444].
ванной выше работе [423 ] содержится важное состоящее в том, что между клетками эпите-паста, индуцированного трансфекцией. L-CAM, многочисленные адгезионные и щелевые контак-V\A часто‘распределяется гомогенно по контак-петочным мембранам, в ряде работ было отмече-ня .L-САМ с участками мембраны, входящими в иализированных контактных структур адгезионного >39м ] . Интересно, что контактные структуры о типа могут возникать между клетками, несущими верхности различные ММА, принадлежащими прав-у семейству- кадгеринам: L-САМ (Е -кадгерик)
-кадгерин) [б39м ] . О структуре и молеку-гаве межклеточных контактов адгезионного типа много. Эти межклеточные контакты схожи по :туре с так называемыми фокальными контактами кой и внеклеточным субстратом. Между этими и структурами имеется сходство и по биохими-зтаву: цитоплазматический плак обеих структур инкулин [222], и обе структуры заякоривают чки актиновых филаментов [80]. Ключевым ком-окальных контактов являются трансмембранные [нтегринов, которые своим внеклеточным доменом твуют со специфическими сайтами молекул вне-матрикса, а посредством цитоплазматического до-в ряд других белков (талин, винкулин, а -актинии), аны с актиновыми филаментами [80]. Можно пред-что ММА играют в межклеточных кон/тактах ад-
гезионного типа ту же роль, что интегрины в фокальных контактах между клеткой и субстратом. Более того, при неизвестных пока дополнительных условиях взаимодействие между двумя ММА на прилегающих друг к другу клетках, возможно, инициирует сборку структур межклеточных контактов адгезионного типа. Вполне вероятно, что именно образование адгезионных контактов, заякоренных на актиновый цитоскелет, определяет возникновение структуры эпителиоидного пласта взамен простых клеточных аггрегатов, которые возникают при склеивании клеток за счет "неструктурированных" ММА.
