Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Айала Ф. -> "Современная генетика. Том 2" -> 59

Современная генетика. Том 2 - Айала Ф.

Айала Ф. , Кайгер Дж. Современная генетика. Том 2 — М.: Мир, 1988. — 368 c.
ISBN 5-03-000495-5
Скачать (прямая ссылка): sovremennayagenetikat21988.djvu
Предыдущая << 1 .. 53 54 55 56 57 58 < 59 > 60 61 62 63 64 65 .. 164 >> Следующая

Холлидея можно изобразить так, как показано на рис. 14.1, Е. Вращение
такой структуры вокруг точки перекреста может приводить к образованию
другой изомерной формы (рис. 14.1, Ж, 3). При разрезании структуры двумя
возможными способами (рис. 14.1, Я-Л) могут вновь возникать линейные
молекулы ДНК различного типа. При разрезании по вертикальной оси
образуются линейные молекулы, рекомбинантные по родительским генетическим
маркерам, расположенным по обе стороны от ге-теродуплексного участка ДНК.
При разрезании по горизонтальной оси две образовавшиеся молекулы ДНК не
будут рекомбинантными по родительским маркерам, фланкирующим область
перекреста, но обе будут содержать по гетеродуплексному участку.
Современные представления о механизме общей рекомбинации, отраженные на
рис. 14.1, являются результатом многолетних генетических и биохимических
исследований этого процесса как у прокариотических, так и у
эукариотических организмов. Мы вкратце рассмотрим данные,
свидетельствующие в пользу рассмотренной модели рекомбинации. Большая
часть таких данных была получена при физическом и генетическом изучении
молекул ДНК плазмид или бактериофагов. Ввиду относительно небольшого
размера этих молекул при работе с ними довольно легко удается избежать их
физического повреждения. Некоторые генетические данные, позволившие
предсказать определенные детали механизма рекомбинации, были получены при
изучении явлений генной
14. Рекомбинация
133
zx:
а
А
zx:
ъ
в
ъ
в
ъ
в
ъ
в
д
Рис. 14.1. Общая рекомбинация - модель Холлидея. Обратите внимание, что
перемещение области перекреста может приводить к образованию протяженных
участков гете-родуплексной ДНК. Показаны два варианта промежуточной
структуры при рекомбинации, отличающиеся поворотом на 180° вокруг
вертикальной оси. Возможны два спо-
соба расщепления структуры креста: один из них приводит к рекомбинации
маркеров, фланкирующих гетеродуплексную область ДНК, расщепление вторым
способом не приводит к рекомбинации. (По Potter Н., Dressier D., 1976.
Proc. Nat. Acad. Sci. USA,
73, 3000.)
Экспрессия генетического материала
конверсии у грибов и высокой отрицательной интерференции (о которой также
пойдет речь позже) у целого ряда организмов. Кроме того, генетический
анализ рекомбинационных процессов у Е. coli позволил выявить и изучить in
vitro ряд важнейших ферментов, участвующих в рекомбинации.
Консервативный разрыв и воссоединение
Важнейшим допущением в рамках модели, проиллюстрированной на рис. 14.1,
является представление об образовании рекомбинантных молекул ДНК за счет
разрыва и воссоединения цепей родительских молекул. Этот процесс
происходит независимо от процесса полукон-сервативной репликации ДНК.
Консервативная природа рекомбинации была впервые выявлена при работе с
фагом X.
Фаги, размножавшиеся в клетках Е. coli, растущих на среде, содержащей
тяжелые изотопы азота и углерода -15N и 13С, могут быть легко отделены от
фагов, культивируемых на обычной среде, содержащей легкие изотопы 14N и
12С (рис. 14.2, А). На рис. 14.2, Б показано распределение по плотности
фагового потомства, образующегося при инфекции "тяжелыми" фагами
(множественность инфекции около 1) клеток, растущих на "легкой" среде.
Большинство дочерних фагов содержит "легкую" ДНК, состоящую из двух
новосинтезированных легких цепей. В небольшой части фагового потомства
содержится ДНК, возникшая в результате полуконсервативной репликации
родительской ДНК "тяжелых" фагов и состоящая из одной тяжелой и одной
легкой цепи. Такие фаговые частицы характеризуются более высокой
плотностью. На рис. 14.2, В показан характерный профиль распределения по
плотности дочерних фагов, образующихся при заражении "легких" клеток
"тяжелыми" фаговыми частицами с высокой множественностью инфекции (~ 20
фагов на клетку). В этом случае некоторые из вошедших в клетку фаговых
геномов не успевают реплицироваться, а заново упаковываются в головки,
образовавшиеся при созревании фагового потомства. Эти нереплицированные
геномы можно идентифицировать в виде третьего, самого тяжелого пика при
фракционировании смеси дочерних фагов. Изучение фагового потомства,
образовавшегося при одновременной множественной инфекции клеток, растущих
на легкой среде, тяжелыми фагами с двумя различными генотипами а + и + Ь,
показало, что некоторые фаговые частицы с нереплицированным геномом
характеризуются рекомбинантным генотипом + / + (рис. 14.2, Г). Это
означает, что рекомбинация родительских геномов может происходить
независимо от репликации ДНК.
На рис. 14.1 показано, что образование рекомбинантных молекул ДНК за счет
разрыва и воссоединения цепей сопровождается возникновением
гетеродуплексного участка ДНК. Образование таких гетеродуплексов не
обязательно связано с последующим "разрезанием" структуры Холлидея,
которое приводит к рекомбинации фланкирующих генетических маркеров.
Генетическим свидетельством образования гете-родуплексных молекул ДНК
Предыдущая << 1 .. 53 54 55 56 57 58 < 59 > 60 61 62 63 64 65 .. 164 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed