Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Айала Ф. -> "Современная генетика. Том 2" -> 110

Современная генетика. Том 2 - Айала Ф.

Айала Ф. , Кайгер Дж. Современная генетика. Том 2 — М.: Мир, 1988. — 368 c.
ISBN 5-03-000495-5
Скачать (прямая ссылка): sovremennayagenetikat21988.djvu
Предыдущая << 1 .. 104 105 106 107 108 109 < 110 > 111 112 113 114 115 116 .. 164 >> Следующая

показано на рис. 16.20, вариабельный участок Н-цепи кодируют три
различные семейства генов: VH (около 300 представителей); D (не менее 10
представителей) и JH [4 гена]. Из них может быть составлено около 12000
комбинированных генов тяжелых цепей. Таким образом, при случайном
попарном сочетании различных вариантов легких и тяжелых цепей можно
получить 24-106 (12000 -2000) различных видов антител. Кроме того, С-
концевая область Н-цепей кодируется различными генами Сн, которые
соответствуют различным классам иммуноглобулинов, перечисленным в табл.
16.5 (рис. 16.21).
В течение многих лет было совершенно непонятно, каким образом
направляется синтез Н- и L-цепей, содержащих идентичные С-участки и
различные V-участки. Предполагали, что С- и V-участки кодируются
различными генами, а для интерпретации процессов объединения этих
участков в единую полипептидную цепь выдвигали ряд различных гипо-
Рис. 16.21. Субъединич-ная структура различных классов иммуноглобулинов
человека. Различия в структуре целиком определяются различиями в
константных участках тяжелых цепей (см. табл. 16.5). (По Hood L. Weissman
I. L, Wood W.B., 1978. Immunology, Benjamin Cummings, Menlo Park, Calif.)
IgM
IgA Димер
IgA2
16. Регуляция экспрессии генов у эукариот 241
тез. В 1976 г. Тонегава и его коллеги показали, что гены К, и Сх,
кодирующие легкую цепь иммуноглобулинов мышиной миеломы, примыкают друг к
другу в составе ДНК миеломных клеток, но находятся гораздо дальше друг от
друга в ДНК эмбриональных клеток или клеток спермы. Авторы предположили,
что в ходе дифференциации лимфоцитов выбор пути синтеза данного варианта
L-цепи сопровождается перемещением данной пары генов VK и Сх, которое
приводит к согласованной транскрипции обоих генов с образованием общей
мРНК, кодирующей данную разновидность цепи. В других миеломных опухолях
наблюдалась перегруппировка генов Vx и Сх легких цепей. Выбор пути
образования иммуноглобулиновых цепей данного типа, основанный на
комбинации данных генов Vx и С;, исключает продуктивное использование
комбинаций генов Vy и Сч. Верно и обратное. Более того, в каждом случае в
продуктивном комбинировании семейств генов X или х принимают участие
только гены, расположенные на одной из гомологичных хромосом. Это явление
получило название аллельного исключения.
Экспериментальные данные о процессах перегруппировки генов, кодирующих
константные и вариабельные участки иммуноглобулиновых цепей, были
получены с помощью методов, основанных на применении рекомбинантных ДНК.
Для этого из фракции полисом выделяли мРНК, кодирующую L-цепь миеломы, на
ее основе с помощью обратной транскриптазы получали кДНК, которую
клонировали на плазмид-ном векторе. Наработанную в значительных
количествах клонированную кДНК расщепляли подходящей рестриктазой таким
образом, чтобы получить два фрагмента, соответствующих V- и С-участкам L-
цепи. Фрагменты ДНК разделяли препаративно с помощью электрофореза,
вводили радиоактивную метку с помощью ник-трансляции, денатурировали и
использовали в качестве зондов для идентификации фрагментов рестрикции
ДНК из миеломных или эмбриональных клеток, содержащих последовательности,
комплементарные последовательностям зондов. Наиболее существенно, что,
как показано на рис. 16.22, в ДНК клеток миеломы оба V- и С-кодирующих
участка локализуются на одном и том же Есо RI-фрагменте, в то время как в
эмбриональной ДНК они находятся на различных Есо RI-фрагментах. Это
означает, что на каком-то этапе развития между эмбриональной клеткой и
дифференцированным лимфоцитом происходит специфическая перестройка ДНК,
которая в данном случае привела к удалению Есо RI-сайта (или сайтов),
находившегося в рамках протяженной области ДНК между V- и С-ко-дирующим
участками в эмбриональной ДНК. После такой перестройки эти участки
оказались расположенными в непосредственной близости друг к другу.
Комбинация генов L-цепи, возникшая при их перегруппировке в ходе
дифференциации лимфоцита, при его последующем митотическом делении
устойчиво наследуется дочерними клетками.
Общая организация группы генов L-цепи показана на рис. 16.23. Число генов
V точно неизвестно и находится в диапазоне 200-300. Каждый ген содержит
примыкающую к структурной области промо-торную последовательность, однако
не транскрибируется до тех пор, пока не произойдет продуктивная
перестройка ДНК, соединяющая его с одним из пяти генов J. Гены V и J
разделяются короткими, одинаково организованными участками
последовательности, которые содержат
242
Экспрессия генетического материала
Эмбриональная ДНК
3
\ JK4
V L !, V X
J I, С
\
\
Ч^
ч . \т_
J '"-V
)\Л с
L 1, J
Миеломная ДНК
Рис. 16.22. Организация последовательностей ДНК -легких цепей в
зародышевых и дифференцированных миеломных клетках мыши. Пронумерованные
стрелки указывают положения Есо RI-сайтов. мРНК, соответствующая легкой
полипептидной цепи, состоит из лидерной последовательности (L),
Предыдущая << 1 .. 104 105 106 107 108 109 < 110 > 111 112 113 114 115 116 .. 164 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed