Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Айала Ф. -> "Современная генетика. Том 1." -> 60

Современная генетика. Том 1. - Айала Ф.

Айала Ф., Кайгер Дж. Современная генетика. Том 1. — М.: Мир, 1987. — 295 c.
Скачать (прямая ссылка): sovremennayagenetika1987.djvu
Предыдущая << 1 .. 54 55 56 57 58 59 < 60 > 61 62 63 64 65 66 .. 113 >> Следующая

рекомбинации двойных гЛ-мутантов показало, что такие мутации как бы
вырезают из генетической карты участки, расположенные между фланкирующими
генетическими маркерами, это неудивительно, поскольку у таких мутантов
физически отсутствует участок ДНК между этими маркерами (рис. 6.5).
Из этих исследований был сделан важный вывод: фенотипически неразличимые
г//-мутации могут быть следствием либо замены отдельной нуклеотидной
пары, либо делеции некоторого числа пар нуклеотидов. Свойства,
обнаруживаемые у таких делеций, нельзя считать неожиданными.
Действительно, вряд ли утрата некоторого числа нуклеотидных пар может
быть обратимым процессом, поскольку при этом должны восстанавливаться
точное число и последовательность этих пар. Аналогично скрещивание между
носителем такой делеции и штаммом с точечной мутацией, расположенной в
участке, отсутствующем у партнера по скрещиванию, не должно приводить к
появлению рекомбинантов дикого типа. Ни один из геномов, участвующих в
таком
г168
г 16 95
г924
ш
Рис. 6.5. Схема, иллюстрирующая механизм сокращения генетического
расстояния между фланкирующими маркерами при скрещивании фаговых
мутантов, несущих делению в одном и том же участке. [Nomura М., Benzer S.
(1961). J. Mol. Biol., 3, 684.]
<5-=> 0, 34%
4, 7%
г 168 г 1695
а
т 1695 г924
Я
166
Организация и передача генетического материала
скрещивании, не содержит нужной нуклеотидной пары в месте точечной
мутации. Следовательно, восстановление нуклеотидной последовательности
дикого типа невозможно.
Функциональные особенности /if мутаций
Генетический анализ состоит в экспериментальном изучении отношений,
существующих между мутантами. Для определения характера этих отношений
используются два основных приема-рекомбинационный тест и тест на
комплементацию. Рекомбинационный тест, как мы уже отмечали в предыдущем
разделе, определяет взаимное пространственное расположение мутаций на
генетической карте. Комплемента-ционный тест, с другой стороны,
определяет функциональные отношения мутантов. Все /-//-мутанты обладают
одинаковым фенотипом (табл. 6.1). Одинаковы ли их генетические функции?
Для ответа на этот вопрос клетки Е. coli К (/.) заражали различными
парными комбинациями мутантов гП, как это схематически изображено на рис.
6.6. Если в такой дважды инфицированной клетке возникает потомство фага,
то это означает, что каждый из двух мутантных фагов осуществляет функцию,
которую не в состоянии осуществлять второй мутант. Такие два мутанта
называют комплементарными. С другой стороны, если в такой дважды
инфицированной клетке потомства фагов не возникает, то это означает, что
оба мутанта не способны осуществлять одну и ту же функцию.
Комплементационный анализ гП-мутантов легко проводится с помощью так
называемого spot-mecma. Клетки, инфицированные гП-мутантом с
множественностью 0,1 (примерно один фаг на десять бактериальных клеток)
смешиваются с теплым расплавленным агаром, и смесь наносится на
поверхность питательной среды в чашке Петри. Когда агар затвердевает, на
его поверхность капают несколько капель среды, содержащей другой гП-
мутант. В месте падения капель некоторые клетки инфицируются обоими
мутантами. Если при этом происходит комплементация, то в инфицированных
клетках возникает потомство фагов обоих родительских генотипов (а также
рекомбинантных генотипов). Это потомство инфицирует затем все остальные
бактериальные клетки в покрытом каплей участке и убивает их. Таким
образом, комплементация проявляется в лизисе бактерий на месте капли
(рис. 6.7).
Результаты комплементационного теста показывают, что все гП-мутации, за
исключением некоторых делеций, распадаются на две группы, обозначаемые
как А и В. Следовательно, /-//-фенотип может быть обусловлен утратой
одной из двух генетических функций, А или В. Например, принадлежащий
группе А мутант 104 не дает потомства при одновременном заражении с
мутантами 47, 101 и 106 (рис. 6.4) и дает потомство при совместной
инфекции с фаговыми мутантами из группы В, например 51 и 102. Делеции,
которые не могут быть отнесены ни к одной из этих групп, включают в себя
на генетической карте границу между этими двумя группами комплементации и
потому утрачивают обе функции.
Тонкая структура гена
167
Потомство фагов
Потомство отсутствует
Вывод: мутации А и В относятся к разным генам
Вывод: мутации В и С относятся к одному и тому же гену
Рис. 6.6. Положительный (мутанты А и В) и отрицательный (мутанты В и С)
ответы при постановке комплементационного теста между фаговыми мутантами.
168
Организация и передача генетического материала
Рис. 6.7. Комплемента-ционный тест между парами /-//-мутаций фага Т4.
Пять прозрачных пятен указывают на комплементацию. В шестом секторе
комплементации нет.
Цистрон
Использованный Бензером тест на комплементацию оценивает функциональные
отношения между мутациями, находящимися в транс-кон-фигурации (рис. 6.8).
Если две мутации принадлежат к одной группе комплементации и находятся в
Предыдущая << 1 .. 54 55 56 57 58 59 < 60 > 61 62 63 64 65 66 .. 113 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed