Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Айала Ф. -> "Современная генетика. Том 1." -> 32

Современная генетика. Том 1. - Айала Ф.

Айала Ф., Кайгер Дж. Современная генетика. Том 1. — М.: Мир, 1987. — 295 c.
Скачать (прямая ссылка): sovremennayagenetika1987.djvu
Предыдущая << 1 .. 26 27 28 29 30 31 < 32 > 33 34 35 36 37 38 .. 113 >> Следующая

относительно мало, то каждая негативная колония на бактериальном газоне
содержит потомство одной индивидуальной частицы фага. Концентра-
Рис. 4.2. Для определения количества жизнеспособных фаговых частиц
образец препарата последовательно разводят и фиксированный объем
разбавленной фаговой культуры смешивают с определенным объемом
полужидкого питательного агара, содержащего несколько капель свежей
бактериальной культуры (примерно 108 клеток). Затем полужидкий агар,
смешанный с бактериями и фагами, выливают на поверхность твердой среды в
чашку Петри, где он и застывает. После инкубации бактерии образуют на
поверхности чашки плотный газон. В тех местах, где заражение фагом
вызвало лизис
бактерий, в газоне образуются "дырки". Число "дырок", или бляшек,
отражает число частиц фага, попавших в полужидкий агар. Если на
поверхности чашки насчитывается 100 бляшек, значит, в 0,1 мл разбавленной
культуры содержалось 100 фаговых частиц. Число фагов в исходной культуре,
следовательно, было равно
(100 фагов/0,1 мл) ¦ 102 • 102 • 102 • 102 = 1011 фагов в 1 мл. (Stent
G.S., Calendar R. 1978. Molecular Genetics, 2nd ed., W. H. Freeman, San
Francisco.) [Имеется перевод: Стент Г., Кэлиндар Р. 1981. Молекулярная
генетика,
М., Мир.]
4. Природа генетического материала
93
цию (титр) фага в исходной культуре можно определить, подсчитав число
бляшек на газоне и умножив его на коэффициент разведения, как это
показано на рис. 4.2. Заражая свежую культуру бактерий материалом из
одной негативной колонии, можно получить чистый препарат фага.
ДНК-трансформирующий фактор пневмококка
В наши дни общеизвестно, что дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК)-
носитель наследственности у всех прокариот и эукариот. Впервые это было
показано в исследованиях на бактериях пневмококках. Некоторые линии
(штаммы) этого микроорганизма вызывают воспаление легких у млекопитающих.
Бактерии патогенных штаммов синтезируют полисахаридную капсулу, слизистая
поверхность которой защищает бактериальную клетку от фагоцитов иммунной
системы зараженного животного. Штаммы пневмококков можно отличить друг от
друга по антителам, продуцируемым животными в ответ на попадание в их
организм различных полисахаридов и белков соответствующей линии бактерий.
Именно по антителам на капсулярные полисахариды различают патогенные
штаммы; их обозначают как тип I, тип II, тип III И т.д.
Патогенные штаммы, выращиваемые на твердой питательной среде в
лаборатории, образуют блестящие гладкие колонии; такую морфологию колонии
имеют из-за синтезируемых бактериями слизистых оболочек. Иногда возникают
мутантные клетки, утратившие способность к ферментативной активности,
необходимой для синтеза слизистой оболочки. Эти мутантные клетки образуют
колонии с шероховатой поверхностью; они в отличие от родительских клеток
S обозначаются буквой R (рис. 4.3). R-штаммы размножаются так же успешно,
как и штаммы S, причем иногда происходят обратные мутации,
восстанавливающие способность к синтезу слизистой оболочки. Тип
капсулярных полисахаридов, синтезируемых в ревертантах, всегда совпадает
с типом полисахаридов исходного родительского штамма: IISt^IIR, IIIS ^
IIIR и т.д. Следовательно, различные R-штаммы нетождественны: каждый из
них соответствует родительскому штамму S.
Рис. 4.3. Колонии пневмококков, растущие на питательной среде. Маленькие
колонии принадлежат бактериям типа IIR, а большие блестящие колонии -
трансформированному типу IIIS. (Prof. Maclyn McCarty, Rockfeller
University.)
Организация и передача генетического материаш
Бактерии R-штаммов непатогенны. Когда такие клетки попадают в организм
животного, например мыши, то такая мышь обычно переносит заражение,
вырабатывая антитела, ведущие к фагоцитозу и гибели бактериальных клеток.
Однако мышь, зараженная бактериями S-штам-ма, неизбежно гибнет от
воспаления легких, поскольку эти бактерии покрыты синтезируемой ими
слизистой оболочкой. В 1928 г. Фредерик Гриффит показал, что если мыши
ввести пневмококки штамма IIR вместе с убитыми нагреванием клетками типа
IIIS, то мыши погибают от инфекции, которая, как показывает вскрытие,
вызывается клетками типа IIIS. Контрольные эксперименты показали, что
порознь ни инъекция клеток IIR, ни инъекция убитых нагреванием клеток
IIIS не ведет к гибели мышей. Тот факт, что вызывающие инфекцию клетки
синтезировали слизистую оболочку типа III, а не типа II, свидетельствовал
о том, что эти клетки не могли возникнуть в результате обратной мутации в
клетках штамма IIR (IIR IIS). Гриффит пришел к заключению, что
непатогенные клетки штамма IIR могут трансформироваться в патогенные
убитыми нагреванием клетками штамма IIIS. Оказалось, что слишком высокая
температура разрушает трансформирующий фактор, а слишком низкая
температура не нарушает активность фермента, разрушающего
трансформирующий фактор, и, следовательно, тоже подавляет трансформацию.
Было показано, что при температуре 65°С уже прекращается ферментативная
Предыдущая << 1 .. 26 27 28 29 30 31 < 32 > 33 34 35 36 37 38 .. 113 >> Следующая
Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed