Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Ашмарин И.П. -> "Молекулярная биология, избранные разделы" -> 111

Молекулярная биология, избранные разделы - Ашмарин И.П.

Ашмарин И.П. Молекулярная биология, избранные разделы — М.: Медицина, 1974. — 360 c.
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiya1974.djvu
Предыдущая << 1 .. 105 106 107 108 109 110 < 111 > 112 113 114 115 116 117 .. 164 >> Следующая

(1972) показали, что предварительное промывание хроматина 0,35М NaCl практически полностью лишает его «фракции Wang». Пока еще рано считать это исчерпывающим доказательством не-хроматиновой природы кислых, «белков Wang», ибо даже такая мягкая обработка представляется небезразличной для взаимодействия с хроматином той части кислых белков, которые связаны с ДНК опосредованно, через относительно гидрофобные участки молекул гистонов (см. рис. 42). Тем более, что такие концентрации NaCl могут, видимо, оказывать влияние даже на взаимодействие с ДНК некоторых фракций гистонов (Li, Bonner, 1971).
Общим для состава всех групп негистоновых белков является существенное преобладание дикарбоновых кислот над основными. Соответствующий коэффициент варьирует от 1,3 до 2. Большинство из них (о всех пока говорить рано) содержит триптофан, что
tt— * «¦
M-
11'
34
43-
41—
41
54
<14-
51-
69
70-
n-\
94
100
110
193—
120
W
150
05—
189
пю=
• • L
Itfin l----------
Origin
a
A
_A_
В
a
+
— 19 —18
— 35
Рис. 40. Разделение в полиакриламидном геле (в присутствии 0,1% додецилсульфата) продуктов диссоциации хроматина эмбрионов морского ежа в 37% гуанидинхлориде.
а, в, с — кислые белки из эмбрионов разных стадий развития; df е, f — кислоторастворимые белки. Цифры возле полос — примерные значения молекулярного веса в тысячах дальтон (Hill et al., 1971).
служит надежным отличием от гистонов. При ионной силе и pH, близких к физиологическим, они образуют комплексы с гистонами
и ДНК.
I группа и 1а подгруппа разделяются по растворимости в различных условиях и гельфильтрацией на ряд фракций (три — четыре). В них обнаруживаются, во-первых, фракции, содержащие РНК, около 3,6%, R—ft/VP-фракция Wang и С-фракция Уманского и соавт. Пока трудно судить о степени родства РНК-содержащих фракций, получаемых разными авторами. С-фракция характеризуется относительной низкомолекулярностью. Для R-RNP-фрак-
дикарбоновые аминокислоты
ции установлено отношение ----------------------------, которое
основные аминокислоты оказалось наименьшим по сравнению с другими негистоновыми белками —1,36. Она же отличалась особенно высоким сродством к гистонам и ДНК (Wang, 1967). Эти особенности важно заметить для рассмотрения в следующем разделе данных о существовании тройственных комплексов, состоящих из так называемой векторной РНК, гистона и кислого белка. Интересно, что эта фракция особенно богата белковым фосфором (0,14%). Используя другой метод (освобождение от ДНК нуклеазой), Langan и Lipmann выделили из хроматина фосфопротеин, содержащий около 1 % фосфора. Наличие фосфопротеина в рассматриваемой фракции позволяет понять ее особенно высокое сродство к гистонам (И. П. Ашмарин, А. И. Комкова, 1969).
Более высокомолекулярными являются фракции В и А
I группы. Молекулярный вес последней равен или превосходит 75 000 (С. Р. Уманский и сотр., 1970). Фракции 1а подгруппы, кроме R-RNP, практически не содержат белкового фосфора. Преобладание дикарбоновых кислот над основными в них еще более выражено — в 1,4—1,7 раза. В то же время сродство к гистонам и ДНК у них меньше.
Особенности негистоновых белков II группы, остаточных белков, помимо чрезвычайно прочной их связи с ДНК, охарактеризованы пока весьма скудно. По соотношению дикарбоновых и основных аминокислот они не являются выдающимися. Довольно велико в них содержание аминокислот с неполярными радикалами.
Сопоставив все эти данные с изложенными выше результатами разделения в полиакриламидном геле, можно предположить, что фракции Wang и С. Р. Уманского с сотр. являются многокомпонентными. Очевидна незавершенность систем выделения и очистки негистоновых белков и недостаточность их характеристик.
Накопленный опыт изучения ферментных свойств негистоновых белков в целом и продуктов их разделения свидетельствует пока не только о каких-то характерных активностях, но и о существенных загрязнениях внехроматиновыми белками. Наибольшего внимания заслуживают данные о наличии в составе хроматина ДНК-, РНК-полимераз, а также ДНК-аз (Leob и др., 1970). Высказывалось предположение, что белок II группы (остаточный белок) — это и есть РНК-полимераза (Г. Г. Кривцов, А. А. Богданов, 1970).
Наибольший интерес представляют данные о регуляторных функциях некоторых из негистоновых белков. Они будут рассмотрены позже. Однако уже здесь следует отметить довольно высокую видоспецифичность негистоновых белков в отношении способности образовывать комплексы с ДНК. Так, например, негистоно-вые белки печени крысы образуют наиболее прочный комплекс с ДНК крысы, менее прочный — с ДНК мыши и не вступают в комплекс с человеческой и обезьяньей ДНК (Teng et al., 1970,
1971), а также с ДНК из рыб и бактерий (Kleinsmith et al., 1970).
Предыдущая << 1 .. 105 106 107 108 109 110 < 111 > 112 113 114 115 116 117 .. 164 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed